2.2. Microorganism source and growt

2.2. Microorganism source and growth experiments
Original lignocellulose-degrading microflora was isolated
from Napiergrass and sheep’s dung compost using the method
that was proposed by [17]. The strain K. Oxytoca THLC0409 was
taken from a native community that was grown on modified
and chemically defined solid MR medium that comprised
carboxymethylcellulose, 10 g l1; peptone, 1 g l1; KH2PO4,
2 g l1; (NH4)2SO4, 1.4 g l1; Urea, 0.3 g l1; MgSO4.7H2O, 0.3 g l1;
CaCl2.2H2O, 0.34 g l1; FeSO4.7H2O, 0.005 g l1; ZnSO4.7H2O,
0.0014 g l1; MnSO4.H2O, 0.0016 g l1; CoCl2.H2O, 0.004 g l1,
and agar powder, 15 g l1 [18]. The isolation process was performed
in an aerobic environment at temperatures of
30e33
C. The strain THLC0409 was then cultivated many
times on solid MR medium in Petri dishes to obtain pure
colonies. These colonies were transferred and cultivated in
a liquid medium that comprised yeast extract, 1 g l1; peptone,
5 g l1, and NaCl, 5 g l1, under stably aerobic conditions at
30e33
C. The culture was cultivated for 24 h to a biomass
concentration of 300 mg l1 using a described method [19].
Growth experiments were performed in the medium 122
consisting of (NH4)2SO4, 1.3 g l1; MgCl2.6H2O, 2.6 g l1;
KH2PO4, 1.43 g l1; K2HPO4.3H2O, 7.2 g l1; CaCl2.6H2O,
0.13 g l1; FeSO4.7H2O, 1.1 mg l1; sodium b-glycerophosphate,
6.0 g l1; yeast extract, 4.5 g l1; lignocellulosic substrate,
10 g l1; glutathione (reduced), 0.25 g l1, and resazurin,
1 mg l1 [20]. The pH was adjusted to 7.0 using 0.1 M l1 HCl
and 0.1 M l1 NaOH. Cultures in 100 ml of medium 122 were
incubated in 250 ml cylindrical flasks without shaking. The
culture was 100-fold (v v1) diluted into 100 ml sterilized
medium 122 in all experiments. All blank experiments (i.e.,
without the microorganism) were conducted.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. จุลินทรีย์เจริญเติบโตและแหล่งทดลองMicroflora lignocellulose ลดเดิมถูกแยกจาก Napiergrass และปุ๋ยมูลของแกะโดยใช้วิธีที่ถูกเสนอ โดย [17] สายพันธุ์ Oxytoca THLC0409 คุณมีนำมาจากชุมชนท้องถิ่นที่มีปลูกในแก้ไขและกำหนดสารเคมีสื่อนายทึบที่ประกอบด้วยcarboxymethylcellulose, l 10 g 1 peptone, 1 g l 1 KH2PO42 g l 1 (NH4) 2SO4, 1.4 g l 1 ยูเรีย 0.3 g l 1 MgSO4.7H2O, 0.3 g l 1CaCl2.2H2O, 0.34 g l 1 FeSO4.7H2O, 0.005 g l 1 ZnSO4.7H2Ol 0.0014 g 1 MnSO4.H2O, l 0.0016 g 1 CoCl2.H2O, l 0.004 g 1และ ผง agar, l 15 g 1 [18] ทำการแยกระบบแอโรบิกที่อุณหภูมิของ30e33 C. สายพันธุ์ THLC0409 ถูกแล้ว cultivated หลายเวลาแข็งกลางนายในจาน Petri รับบริสุทธิ์อาณานิคม อาณานิคมเหล่านี้ถูกโอนย้าย และปลูกในขนาดกลางของเหลวที่ประกอบด้วยสารสกัดจากยีสต์ 1 g l 1 peptone5 g l 1 และ NaCl, 5 g l 1, stably แอโรบิกสภาวะที่30e33 C. วัฒนธรรมถูกปลูกมา 24 ชมจะเป็นชีวมวลความเข้มข้น 300 mg l 1 ใช้วิธีการอธิบายไว้ [19]ดำเนินการทดลองการเติบโตในสื่อ 122ประกอบด้วย (NH4) 2SO4, 1.3 g l 1 MgCl2.6H2O, 2.6 g l 1KH2PO4, 1.43 g l 1 K2HPO4.3H2O, l 7.2 g 1 CaCl2.6H2O0.13 g l 1 FeSO4.7H2O, 1.1 mg l 1 โซเดียม b-glycerophosphate6.0 g l 1 สารสกัดจากยีสต์ 4.5 g l 1 พื้นผิว lignocellulosic10 g l 1 กลูตาไธโอน (ลดลง), 0.25 g l 1 และ resazurinมก. 1 l 1 [20] ปรับ pH เป็น 7.0 ใช้ 0.1 M l 1 HClและ NaOH 0.1 M l 1 มีวัฒนธรรมใน 100 ml ของกลาง 122incubated ในน้ำ 250 ml ทรงกระบอกโดยไม่สั่น ที่วัฒนธรรมถูก 100-fold (v v 1) ทำให้เป็น 100 ml sterilizedกลาง 122 ในการทดลองทั้งหมด ทั้งหมดว่างเปล่าทดลอง (เช่นโดยจุลินทรีย์) ได้ดำเนินการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 แหล่งที่มาของเชื้อจุลินทรีย์และการเติบโตของการทดลอง
ต้นฉบับจุลินทรีย์ย่อยสลายลิกโนเซลลูโลส-ที่แยกได้
จาก Napiergrass และแกะของมูลสัตว์ปุ๋ยหมักโดยใช้วิธีการ
ที่ถูกเสนอโดย [17] สายพันธุ์เค Oxytoca THLC0409 ถูก
นำมาจากชุมชนพื้นเมืองที่ได้รับการปลูกในการแก้ไข
และสารเคมีที่กำหนดไว้กลาง MR ของแข็งที่ประกอบด้วย
carboxymethylcellulose, 10 GL 1; เปปโตน, 1 GL 1; KH2PO4,
2 GL 1; (NH4) 2SO4 1.4 GL 1; ยูเรีย 0.3 GL 1; MgSO4.7H2O 0.3 GL 1;?
CaCl2.2H2O, 0.34 GL 1; FeSO4.7H2O, 0.005 GL 1; ZnSO4.7H2O,
0.0014 GL 1; MnSO4.H2O, 0.0016 GL 1; CoCl2.H2O, 0.004 GL? 1,
และผงวุ้น 15 GL? 1 [18] ขั้นตอนการแยกกำลังดำเนินการ
อยู่ในสภาพแวดล้อมแอโรบิกที่อุณหภูมิ
30e33 องศาเซลเซียส สายพันธุ์ที่ได้รับการปลูกฝัง THLC0409 แล้วหลาย
ครั้งในกลาง MR มั่นคงในจานเลี้ยงเชื้อที่จะได้รับบริสุทธิ์
อาณานิคม อาณานิคมเหล่านี้มีการถ่ายโอนและการปลูกใน
อาหารเหลวที่ประกอบด้วยสารสกัดจากยีสต์, 1 GL 1; เปปโตน,
5 GL? 1 และโซเดียมคลอไรด์, 5 GL? 1 ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิกที่เสถียร
30e33 องศาเซลเซียส วัฒนธรรมได้รับการปลูกฝังเป็นเวลา 24 ชั่วโมงเพื่อชีวมวล
? ความเข้มข้น 300 มิลลิกรัมต่อลิตร 1 ใช้วิธีการที่อธิบายไว้ [19]
การทดลองการเจริญเติบโตได้ดำเนินการในกลาง 122
ซึ่งประกอบด้วย (NH4) 2SO4 1.3 GL 1; MgCl2.6H2O 2.6 GL 1;?
KH2PO4, 1.43 GL 1; K2HPO4.3H2O 7.2 GL 1; CaCl2.6H2O,
0.13 GL 1; FeSO4.7H2O 1.1 มิลลิกรัมต่อลิตร 1; โซเดียม B-GLYCEROPHOSPHATE,
6.0 GL 1; สารสกัดจากยีสต์, 4.5 GL 1; สารลิกโนเซลลูโลส,
10 GL 1; กลูตาไธโอน (ลดลง), 0.25 GL? 1 และ resazurin,
1 มิลลิกรัมต่อลิตร? 1 [20] พีเอชที่ได้รับการปรับใช้ 7.0 0.1 M L? 1 HCl
0.1 M L? 1 NaOH วัฒนธรรมใน 100 มิลลิลิตรของกลาง 122 ถูก
บ่มในขวด 250 มลทรงกระบอกโดยไม่ต้องสั่น
วัฒนธรรมเป็น 100 เท่า (VV? 1) ปรับลดเป็น 100 มลฆ่าเชื้อ
ขนาดกลาง 122 ในการทดลองทั้งหมด ทุกการทดลองที่ว่างเปล่า (กล่าวคือ
ไม่มีจุลินทรีย์) กำลังดำเนินการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . แหล่งที่มาและการเติบโตของจุลินทรีย์จุลินทรีย์ย่อยสลายลิกโนเซลลูโลสการทดลอง
เดิมที่แยกได้จากปุ๋ยหมักมูลสัตว์และ napiergrass

แกะใช้วิธีที่เสนอโดย [ 17 ] K . oxytoca สายพันธุ์ thlc0409 คือ
ถ่ายจากชุมชนพื้นเมืองที่ปลูกในการแก้ไขและคุณกลางกำหนดของแข็งเคมี

ที่ประกอบด้วยผู้ป่วยใน 10 g l  1 G ผม  extract , 1 kh2po4 1 ; ,
2 g l  1 ; ( NH4 ) 2so4 1.4 G L  1 ; ยูเรีย , 0.3 g l  1 ; mgso4.7h2o 0.3 กรัม  1 L ;
cacl2.2h2o , 0.34 g l  1 ; feso4.7h2o , 0.005 กรัมผม  1 ; znso4.7h2o
0.0014 G , L  1 ; mnso4.h2o 0.0016 กรัม , ผม  1 ; cocl2.h2o 0.004 กรัม , ผม  1
และวุ้นผง 15 กรัม ต่อลิตร  1 [ 18 ] กระบวนการแยกการแอโรบิก
ในสภาพแวดล้อมที่อุณหภูมิ
30e33
C ก็ปลูกหลายสายพันธุ์ thlc0409
เวลาบนของแข็งคุณปานกลาง ในจานเพาะเลี้ยงเพื่อให้ได้โคโลนีล้วนๆ

อาณานิคมเหล่านี้ถูกปลูกใน
เหลวสูตร ประกอบด้วยสารสกัดจากยีสต์ 1 กรัมต่อลิตร ตามลำดับ  1 ;
5 G , L  1 และเกลือ 5 กรัมต่อลิตร  1 ภายใต้สภาวะแอโรบิก เสถียร ที่
C
30e33 วัฒนธรรมการปลูกเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ให้มวลชีวภาพ
ความเข้มข้น 300 มก. ผม  1 โดยใช้วิธีที่บรรยาย
[ 19 ]การทดลองการเจริญเติบโตได้ในกลาง 122
ประกอบด้วย ( NH4 ) 2so4 1.3 g l  1 ; mgcl2.6h2o 2.6 g l  1 ;
kh2po4 , 1.43 กรัม ผม  1 ; k2hpo4.3h2o 7.2 g , L  1 ; cacl2.6h2o
0.13 กรัม , ผม  1 ; feso4.7h2o 1.1 มิลลิกรัมต่อลิตร  1 ; โซเดียม b-glycerophosphate
6.0 กรัม , ผม  1 ; สารสกัดจากยีสต์ , 4.5 g l  1 ; lignocellulosic ตั้งต้น
10 กรัม ผม  1 กลูต้าไธโอน ( ลดลง ) 0.25 กรัม ผม  1 และรีซาซูริน
1 mg L ,  1 [ 20 ] ปรับ pH เป็น 70 ใช้ 0.1 M HCl
1 L  และ 0.1 M L  1 NaOH วัฒนธรรมใน 100 มล. ขนาดกลางคือ
) 250 ml ขวดทรงกระบอก ไม่มีสั่น
วัฒนธรรมเป็น 100 เท่า ( V V  1 ) เจือจางใน 100 ml ฆ่าเชื้อ
ขนาดกลาง 122 ตลอดการทดลอง การทดลองว่างทั้งหมด ( เช่น
โดยจุลินทรีย์ ) ในการ