2.6.1. Flow cytometryLeaf fragments

2.6.1. Flow cytometry
Leaf fragments from in vitro-grown plants derived from the
anther cultures were chopped with a razor blade in Lysis
buffer (15 mmol/l Tris, 2 mmol/l Na2EDTA, 0.5 mmol/l spermine,
80 mmol/l KCl, 20 mmol/l NaCl, and 0.1% (v/v) Triton X-100; pH
7.5) to release the nuclei. The entire sample was filtered through
a 25 m nylon mesh and stained with 2 l DAPI. Analysis of
nuclei was conducted using a Partec CA II flow cytometer (Partec
GmbH, Germany). Tissue from a diploid plant of P. forbesii was
used as an internal standard. The ploidy level of each tested plant
was determined based on a comparison between the fluorescence
peak value of the tested plants with that of the diploid control.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6.1 การกระแสเซลล์ใบแยกส่วนจากในเครื่องปลูกพืชได้มาจากการวัฒนธรรม anther ถูกสับ ด้วยใบมีดโกนใน Lysisบัฟเฟอร์ (15 mmol/l ตรี 2 mmol/l Na2EDTA สเปอร์มีน 0.5 mmol/lmmol/l KCl 80, 20 mmol/l NaCl และ 0.1% (v/v) ไตรตั้น X-100 ค่า pH7.5) การปลดปล่อยแอลฟา ตัวอย่างทั้งหมดถูกส่องผ่านไนล่อน 25 เมตรตาข่าย และสีกับ 2 l DAPI วิเคราะห์แอลฟาวิธีใช้ cytometer เป็นกระแส Partec CA II (PartecGmbH เยอรมนี) เป็นเนื้อเยื่อจากพืช diploid ของ P. forbesiiใช้เป็นการภายใน พล็อยดีระดับของแต่ละโรงงานทดสอบกำหนดตามการเปรียบเทียบระหว่างการ fluorescenceค่าสูงสุดของพืชทดสอบที่ควบคุม diploid

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6.1 โฟเศษใบจากพืชในหลอดทดลองปลูกมาจากวัฒนธรรมดอกไม้ถูกสับด้วยใบมีดโกนในการสลายบัฟเฟอร์(15 มิลลิโมล / ลิตร Tris 2 มิลลิโมล / ลิตร Na2EDTA, 0.5 มิลลิโมล / ลิตรเปอร์, 80 มิลลิโมล / ลิตร KCl 20 มิลลิโมล / ลิตรโซเดียมคลอไรด์และ 0.1% (v / v) Triton X-100; pH 7.5) ที่จะปล่อยนิวเคลียส กลุ่มตัวอย่างทั้งหมดถูกกรองผ่าน25 เมตรตาข่ายไนลอนและย้อมด้วยสี 2 ลิตร DAPI การวิเคราะห์นิวเคลียสได้ดำเนินการโดยใช้ CA พาร์เท็คครั้งที่สองไหล cytometer (พาร์เท็ GmbH ประเทศเยอรมนี) จากเนื้อเยื่อพืชซ้ำพี forbesii ถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานภายใน ระดับ ploidy ของแต่ละโรงงานที่ผ่านการทดสอบได้รับการพิจารณาจากการเปรียบเทียบระหว่างการเรืองแสงค่าสูงสุดของพืชทดสอบกับที่ของการควบคุมซ้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดูแล . การไหล (
ใบเศษจากการเพาะปลูกพืชที่ได้มาจาก
( วัฒนธรรมถูกสับด้วยมีดในการสลาย
บัฟเฟอร์ ( 15 mmol / L หรือ 2 mmol / L na2edta 0.5 มิลลิโมล / ลิตร spermine
80 มิลลิโมล / ลิตร , KCl , 20 mmol / L NaCl 0.1 และ 0.2% ( v / 5 ) Triton X-100
; พีเอช 7.5 ) ปล่อยนิวเคลียส . ตัวอย่างทั้งหมดถูกกรองผ่าน
25 เมตรตาข่ายไนลอนและย้อมด้วย 2 L dapi . การวิเคราะห์
นิวเคลียสมีวัตถุประสงค์การใช้พาร์เท็ค CA การใช้โมโน II ( พาร์เท็ค
GmbH , Germany ) เนื้อเยื่อจากพืชซ้ำของหน้า forbesii คือ
ใช้เป็นมาตรฐานภายใน ส่วนการระดับของแต่ละการทดสอบพืช
ถูกกำหนดบนพื้นฐานของการเปรียบเทียบระหว่างการ
ยอดค่าของพืชทดสอบกับของการควบคุมการเกิด
.