Diacylglycerol acyltransferase (DGA

Diacylglycerol acyltransferase (DGAT) activity is an essential enzymatic step in the formation of neutral lipid i.e.,
triacylglycerol in all living cells capable of accumulating storage lipid. Previously, we characterized an oleaginous yeast
Candida tropicalis SY005 that yields storage lipid up to 58% under a specific nitrogen-stress condition, when the DGATspecific
transcript is drastically up-regulated. Here we report the identification, differential expression and function of two
DGAT2 gene homologues- CtDGAT2a and CtDGAT2b of this C. tropicalis. Two protein isoforms are unique with respect to the
presence of five additional stretches of amino acids, besides possessing three highly conserved motifs known in other
reported DGAT2 enzymes. Moreover, the CtDGAT2a and CtDGAT2b are characteristically different in amino acid sequences
and predicted protein structures. The CtDGAT2b isozyme was found to be catalytically 12.5% more efficient than CtDGAT2a
for triacylglycerol production in a heterologous yeast system i.e., Saccharomyces cerevisiae quadruple mutant strain H1246
that is inherently defective in neutral lipid biosynthesis. The CtDGAT2b activity rescued the growth of transformed S.
cerevisiae mutant cells, which are usually non-viable in the medium containing free fatty acids by incorporating them into
triacylglycerol, and displayed preferential specificity towards saturated acyl species as substrate. Furthermore, we document
that the efficiency of triacylglycerol production by CtDGAT2b is differentially affected by deletion, insertion or replacement
of amino acids in five regions exclusively present in two CtDGAT2 isozymes. Taken together, our study characterizes two
structurally novel DGAT2 isozymes, which are accountable for the enhanced production of storage lipid enriched with
saturated fatty acids inherently in C. tropicalis SY005 strain as well as in transformed S. cerevisiae neutral lipid-deficient
mutant cells. These two genes certainly will be useful for further investigation on the novel structure-function relationship
of DGAT repertoire, and also in metabolic engineering for the enhanced production of lipid feedstock in other organisms

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Diacylglycerol acyltransferase (DGAT) เป็นขั้นตอนเอนไซม์สำคัญในการก่อตัวของไขมันที่เป็นกลางtriacylglycerol ในเซลล์ชีวิตความสามารถในการเก็บสะสมไขมัน ก่อนหน้านี้ เราลักษณะเป็นยีสต์ oleaginousCandida tropicalis SY005 ที่กักเก็บผลผลิตถึง 58% ภายใต้เงื่อนไขเฉพาะไนโตรเจนความเครียด เมื่อ DGATspecificเสียงบรรยายเป็นระเบียบมากขึ้น นี่เรารายงานระบุ แสดงออกแตกต่างกัน และฟังก์ชันสองยีน DGAT2 homologues-CtDGAT2a และ CtDGAT2b ของ tropicalis นี้ C. สองโปรตีน isoforms ไม่ซ้ำกับของห้าเพิ่มเติมเหยียดของกรดอะมิโน นอกจากมีสามสูงอนุรักษ์ลวดลายรู้จักกันในที่อื่น ๆรายงาน DGAT2 เอนไซม์ นอกจากนี้ CtDGAT2a และ CtDGAT2b จะแตกต่างกันในกรดอะมิโนลำดับนั้นและโครงสร้างของโปรตีนที่คาดการณ์ พบ CtDGAT2b isozyme จะ catalytically มากกว่า CtDGAT2a 12.5%สำหรับการผลิตในระบบยีสต์ heterologous triacylglycerol ที่ Saccharomyces cerevisiae สี่เท่าสายพันธุ์กลายพันธุ์ H1246ที่มีความบกพร่องในการสังเคราะห์ไขมันที่เป็นกลาง กิจกรรม CtDGAT2b ช่วยการเติบโตของ s ได้รับการเปลี่ยนแปลงcerevisiae กลายพันธุ์เซลล์ ซึ่งมักจะไม่ทำกำไรในการที่ประกอบด้วยกรดไขมันอิสระ โดยผสมผสานเข้าไปtriacylglycerol และมีความจำเพาะต่ำแสดงต่อการอิ่มตัวชนิด acyl เป็นพื้นผิว นอกจากนี้ เราเอกสารว่า ประสิทธิภาพของ triacylglycerol ผลิตโดย CtDGAT2b differentially ได้รับผลกระทบจากการลบ การแทรก หรือแทนที่กรดอะมิโนในปัจจุบันโดยเฉพาะในสอง CtDGAT2 isozymes 5 ภูมิภาค นำมารวมกัน การศึกษาของเราลักษณะสองisozymes DGAT2 โครงสร้างนวนิยาย ซึ่งเป็นความรับผิดชอบในการผลิตเพิ่มเก็บไขมันที่อุดมด้วยกรดไขมันอิ่มตัวใน C. tropicalis SY005 สายพันธุ์เป็นอย่างดีเช่นเปลี่ยน S. cerevisiae กลางไขมันขาดเสมอเซลล์กลายพันธุ์ สองยีนเหล่านี้แน่นอนจะเป็นประโยชน์สำหรับตรวจสอบเพิ่มเติมบนความสัมพันธ์ฟังก์ชันโครงสร้างนวนิยายละคร DGAT และในเผาผลาญวิศวกรรมการผลิตขั้นสูงวัตถุดิบไขมันในสิ่งมีชีวิตอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

diacylglycerol acyltransferase (DGAT) กิจกรรมที่เป็นขั้นตอนของเอนไซม์สำคัญในการก่อตัวของไขมันเช่นเป็นกลาง
triacylglycerol ในเซลล์ที่มีชีวิตทั้งหมดมีความสามารถในการจัดเก็บสะสมไขมัน ก่อนหน้านี้เราโดดเด่นยีสต์น้ำมัน
Candida tropicalis SY005 ที่ทำให้การจัดเก็บไขมันได้ถึง 58% ภายใต้เงื่อนไขไนโตรเจนความเครียดเฉพาะเมื่อ DGATspecific
หลักฐานเป็นอย่างมากขึ้นควบคุม ที่นี่เรารายงานประจำตัวที่แตกต่างกันการแสดงออกและการทำงานของทั้งสอง
DGAT2 ยีน homologues- CtDGAT2a และ CtDGAT2b นี้ C. tropicalis สองไอโซฟอร์มโปรตีนจะไม่ซ้ำกันเกี่ยวกับ
การปรากฏตัวของห้าเหยียดที่เพิ่มขึ้นของกรดอะมิโนที่นอกเหนือจากที่มีลวดลายสามป่าสงวนที่รู้จักกันในอื่น ๆ
รายงานเอนไซม์ DGAT2 นอกจากนี้ CtDGAT2a และ CtDGAT2b มีลักษณะแตกต่างกันในลำดับกรดอะมิโน
และคาดการณ์โครงสร้างโปรตีน ไอโซไซม์ CtDGAT2b ถูกพบว่าเป็นแบบเร่งปฏิกิริยา 12.5% ​​มีประสิทธิภาพมากขึ้นกว่า CtDGAT2a
สำหรับการผลิต triacylglycerol ในระบบยีสต์ heterologous เช่น Saccharomyces cerevisiae สี่เท่ากลายพันธุ์สายพันธุ์ H1246
ที่เป็นเนื้อแท้ที่มีข้อบกพร่องในการสังเคราะห์ไขมันที่เป็นกลาง กิจกรรม CtDGAT2b ช่วยเหลือการเจริญเติบโตของการเปลี่ยนที่ S
เซลล์กลายพันธุ์ cerevisiae ซึ่งมักจะไม่ใช่ที่ทำงานได้ในระดับปานกลางที่มีกรดไขมันอิสระโดยการรวมไว้ใน
triacylglycerol และแสดงความจำเพาะพิเศษต่ออิ่มตัวชนิด acyl เป็นสารตั้งต้น นอกจากนี้เรามีเอกสาร
ที่ประสิทธิภาพการผลิตโดย triacylglycerol CtDGAT2b ได้รับผลกระทบที่แตกต่างกันโดยการลบแทรกหรือการเปลี่ยน
ของกรดอะมิโนในห้าภูมิภาคในปัจจุบันโดยเฉพาะในสองไอโซไซม์ CtDGAT2 นำมารวมกันเป็นลักษณะเฉพาะของการศึกษาของเราสอง
ไอโซไซม์ DGAT2 นวนิยายโครงสร้างซึ่งมีหน้าที่รับผิดชอบในการผลิตที่เพิ่มขึ้นของการจัดเก็บไขมันอุดมไปด้วย
กรดไขมันอิ่มตัวโดยเนื้อแท้ใน C. tropicalis ความเครียด SY005 เช่นเดียวกับในการเปลี่ยน S. cerevisiae เป็นกลางไขมันขาด
เซลล์กลายพันธุ์ ทั้งสองยีนอย่างแน่นอนจะเป็นประโยชน์ในการตรวจสอบต่อไปในนวนิยายเรื่องนี้ความสัมพันธ์ของโครงสร้างและหน้าที่
ของ DGAT ละครและยังอยู่ในการเผาผลาญวิศวกรรมสำหรับการผลิตที่เพิ่มขึ้นของไขมันวัตถุดิบในสิ่งมีชีวิตอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

acyltransferase diacylglycerol ( dgat ) กิจกรรมเป็นขั้นตอนสำคัญในการสร้างเอนไซม์ไขมันที่เป็นกลางเช่นtriacylglycerol ทุกเซลล์มีชีวิต สามารถเก็บสะสมไขมัน ก่อนหน้านี้เรามีลักษณะเป็นยีสต์ที่ผสมด้วยน้ำมันยีสต์ sy005 ที่ผลผลิตที่เก็บไขมันได้ถึงร้อยละ 58 โดยเฉพาะไนโตรเจนภายใต้สภาวะความเครียด เมื่อ dgatspecificหลักฐานอยู่ในคา . ที่นี่เรารายงานระบุค่านิพจน์และฟังก์ชันสองdgat2 ยีนใน - ctdgat2a ctdgat2b นี้และ C . tropicalis มีผลต่อ . 2 โปรตีนไอโซฟอร์มจะไม่ซ้ำกันกับการเคารพการปรากฏตัวของกรดอะมิโนอีกห้าเหยียด นอกจากครอบครองสามที่มีการอนุรักษ์ลวดลายอื่น ๆที่รู้จักกันในรายงาน dgat2 เอนไซม์ นอกจากนี้ ctdgat2a ctdgat2b และมีลักษณะที่แตกต่างกันในลำดับกรดอะมิโนและทำนายโครงสร้างโปรตีน การ ctdgat2b ไอโซไซม์ พบว่า catalytically 12.5 % มีประสิทธิภาพมากขึ้นกว่า ctdgat2aการผลิตในระบบ เช่น triacylglycerol ชนิดยีสต์ Saccharomyces cerevisiae สายพันธุ์กลายพันธุ์ h1246 สี่เท่ามันเป็นอย่างโดยเนื้อแท้มีข้อบกพร่องในระดับกลางของ . การ ctdgat2b กิจกรรมช่วยการเจริญเติบโตของแปลง sS . cerevisiae กลายพันธุ์เซลล์ ซึ่งมักจะไม่ทำงานได้ในอาหารที่มีกรดไขมันอิสระโดยผสมผสานเข้าไปในtriacylglycerol และแสดงพิเศษเฉพาะเจาะจงต่อชนิดอิ่มตัว , เป็นสับสเตรท นอกจากนี้ เรา เอกสารที่ประสิทธิภาพของการผลิต triacylglycerol โดย ctdgat2b เป็นต่างกัน ผลกระทบ โดยการลบแทรก หรือทดแทนกรดอะมิโนใน 5 ภูมิภาค โดยเฉพาะปัจจุบันสอง ctdgat2 สำหรับ . ที่ได้ศึกษาในลักษณะสองของเราโครงสร้างใหม่ dgat2 ไอโซไซม์ ซึ่งจะสามารถเพิ่มการผลิตกระเป๋าและอุดมด้วยกรดไขมันไม่อิ่มตัวโดยเนื้อแท้ใน C . tropicalis มีผลต่อ sy005 สายพันธุ์เช่นเดียวกับใน S . cerevisiae เป็นกลางในการเปลี่ยนเซลล์ที่กลายพันธุ์ สองยีนเหล่านี้จะเป็นประโยชน์สำหรับการตรวจสอบเพิ่มเติมในโครงสร้างใหม่ฟังก์ชันความสัมพันธ์ของ dgat ละครและในวิศวกรรมการเผาผลาญอาหารเพื่อเพิ่มการผลิตของวัตถุดิบในสิ่งมีชีวิตอื่นๆ