order to compare the chemical change in the skeleton
between AgNP-exposed and control samples.
2. Experimental Section
2. 1. Preparation of Silver Nanoparticles
The silver nanoparticles used in this study were
prepared by chemical reduction of silver compounds,
following a method used by Link et al. (1999) with a minor
modification. 0.0043 g silver nitrate (AgNO3, from SigmaAldrich,
ACS reagent) was dissolved in 95 mL de-ionised
water (Millipore, 18 MΩ-cm). The resulting solution was
heated by a hot plate to boiling point whereupon 5 mL of
sodium citrate (1% w/v, from BDH Chemicals) was added.
The solution was then refluxed for 30 minutes and turned
into the AgNP suspension. After the suspension temperature
decreased to room temperature, it was stored in the dark at
4-8 0C before use. AgNPs produced by this method were
found to have a lateral size in the range of 5-35 nm,
determined from the images from a high resolution
transmission electron microscope (HRTEM) (JEOL 2100F
FGETEM) at Durham University.
2. 2. Preparation of Sea Urchin Specimens
Sperm and eggs (Gametes) were collected from adult sea
urchins (Paracentrotus lividus) inhabiting the Adriatic Sea at
Limski kanal, Croatia. Fertilization, using 0.5 M KCl injection
to induce spawning of gametes, was carried out in natural
seawater filtered through a 0.22 µm membrane filter. For
AgNP-exposed samples (in contrast to the control), about 2 h
after fertilization, AgNPs were added to the sea urchin larvae
at a concentration of 0.3 mg/L. In both cases, the larvae were
collected at 51 h after fertilization by fixing with 100%
ethanol. The samples were washed with DI water several
times before any measurements.
2. 3. XANES and FTIR
XANES and FTIR measurements were performed at
beamline ID21 of the European Synchrotron Radiation
Facility (ESRF), Grenoble, France. XANES spectra were
collected in fluorescence mode on selected points of the
sample with the beam size of 0.2 µm x 0.8 µm. Measurements
were made using X-rays with tuneable energy in the range
from 3.32 to 3.47 keV, with a 0.225 eV energy step and 0.1 s
dwell time.
FTIR spectra were collected in transmission mode, with
a resolution of 4 cm-1. The beam size was 6 µm x 6 µm,
imprinting on specimens deposited on 0.2 mm thickness BaF2
windows. Specimens were scanned with steps of 4 µm in both
directions. For each spectrum, 64 scans were accumulated
from 4000 to 500 cm-1 and averaged. Background spectra
were collected every 30 minutes.
3. Results and Discussion
A typical XANES spectrum is shown in fig. 1a. The
spectrum was acquired over the black spot encircled in the
การเปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลงทางเคมีในโครงกระดูกระหว่าง agnp เปิดเผยและตัวอย่างควบคุม2 . ส่วนการทดลอง2 . 1 . การเตรียมอนุภาคนาโนซิลเวอร์ซิลเวอร์นาโนที่ใช้ในการศึกษา คือที่เตรียมโดยการลดสารเคมีสารเงินต่อไปนี้เป็นวิธีที่ใช้โดยเชื่อมโยง et al . ( 1999 ) กับผู้เยาว์การปรับเปลี่ยน 0.0043 G ซิลเวอร์ไนเทรต ( agno3 จาก sigmaaldrich , ,สารเคมีที่ละลายในน้ำ ( ACS ) ionised 95 เดอน้ำ ( มิลลิเมตรΩ - 18 ซม. ) ผลคือ โซลูชั่นความร้อนจากจานร้อนถึงจุดเดือด ซึ่ง 5 มิลลิลิตรโซเดียมซิเตรท ( 1% w / v , จาก bdh สารเคมี ) ถูกเพิ่มเข้ามาโซลูชั่นจากนั้น refluxed 30 นาที และหันใน agnp ระงับ หลังช่วงล่าง อุณหภูมิลดอุณหภูมิห้อง มันถูกเก็บไว้ในที่มืดที่4-8 องศาเซลเซียสก่อนใช้ agnps ที่ผลิตโดยวิธีนี้พบว่ามีขนาดด้านข้างในช่วง 5-35 นาโนเมตรพิจารณาจากภาพความละเอียดสูงกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ( hrtem ) ( จอล 2100ffgetem ) มหาวิทยาลัยเดอร์แฮมใน .2 . 2 . การเตรียมการของเม่นทะเลชิ้นงานสเปิร์มและไข่ ( gametes ) ถูกเก็บจากทะเล ผู้ใหญ่เม่นทะเล ( paracentrotus lividus ) ที่อาศัยอยู่ในทะเลอะเดรียติค ที่limski kanal , โครเอเชีย การผสมพันธุ์ , การฉีด 0.5 m .เพื่อก่อให้เกิดการวางไข่ของเซลล์สืบพันธุ์ที่มีถูกทดลองในธรรมชาติน้ำทะเลกรองผ่านเยื่อกรองµ 0.22 เมตร . สำหรับagnp เปิดเผยตัวอย่าง ( ในทางตรงกันข้ามกับควบคุม ) ประมาณ 2 ชั่วโมงหลังจากการปฏิสนธิ agnps ถูกเพิ่มไปยังเม่นทะเลตัวอ่อนที่ความเข้มข้น 0.3 mg / L . ในทั้งสองกรณี , ตัวอ่อนคือจำนวน 51 H หลังจากการปฏิสนธิ โดยการแก้ไขด้วย 100%เอทานอล ตัวอย่างการล้างด้วยน้ำ DI หลายครั้ง ก่อนการวัด2 . 3 . xanes และ FTIRxanes และ FTIR การวัดจำนวนที่บีมไลน์ id21 ของการแผ่รังสีซิงโครตรอนยุโรปสิ่งอำนวยความสะดวก ( esrf ) , Grenoble , ฝรั่งเศส xanes สเปกตรัมคือในการเลือกโหมดเก็บคะแนนของตัวอย่างคานขนาด 0.2 x 0.8 เมตร วัดµµม.ถูกสร้างโดยใช้รังสีเอกซ์ที่มีพลังงานในช่วง tuneableจากข้อมูลการ 3.47 เคฟกับ 0.225 EV พลังงานขั้นตอนและ 0.1 วินาทีเวลาหน่วงFTIR spectra ถูกเก็บในโหมดการส่งด้วยความละเอียด 4 cm-1 . คานขนาด 6 µเมตร x 6 µ Mพิมพ์บนตัวอย่างฝากไว้บน baf2 ความหนา 0.2 มม.หน้าต่าง ทำการสแกน ด้วยขั้นตอนที่ 4 µ M ทั้งในเส้นทาง สำหรับคนสะสม 64 สแกนสเปกตรัมจาก 4 , 500 cm-1 และเฉลี่ย . แสงพื้นหลังรวบรวมทุก 30 นาที3 . ผลและการอภิปรายสเปกตรัม xanes ปกติจะแสดงในรูปที่ 1 .สเปกตรัมได้ผ่านจุดสีดำล้อมรอบใน
การแปล กรุณารอสักครู่..