abstractSubtype-selective thyromime

abstract
Subtype-selective thyromimetics have potential as new pharmaceuticals for the prevention or treatment
of heart disease, high LDL cholesterol and obesity, but there are only a few methods that can detect
agonistic behavior of TR-active compounds. Among these are the rat pituitary GH3 cell assay and transcriptional
activation assays in engineered yeast and mammalian cells. We report the construction and
validation of a newly designed TRα-1 bacterial biosensor, which indicates the presence of thyroid active
compounds through their impacts on the growth of an engineered Escherichia coli strain in a simple
defined medium. This biosensor couples the configuration of a hormone receptor ligand-binding domain
to the activity of a thymidylate synthase reporter enzyme through an engineered allosteric fusion
protein. The result is a hormone-dependent growth phenotype in the expressing E. coli cells. This sensor
can be combined with our previously published TRβ-1 biosensor to detect potentially therapeutic
subtype-selective compounds such as GC-1 and KB-141. To demonstrate this capability, we determined
the half-maximal effective concentration (EC50) for the compounds T3, Triac, GC-1 and KB-141 using our
biosensors, and determined their relative potency in each biosensor strain. Our results are similar to
those reported by mammalian cell reporter gene assays, confirming the utility of our assay in identifying
TR subtype-selective therapeutics. This biosensor thus provides a high-throughput, receptor-specific,
and economical method (less than US$ 0.10 per well at laboratory scale) for identifying important
therapeutics against these targets.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อเลือกชนิดย่อย thyromimetics มีศักยภาพเป็นยาใหม่สำหรับรักษาหรือป้องกันโรคหัวใจ ไขมัน LDL สูง และโรค อ้วน แต่มีเฉพาะวิธีกี่ที่สามารถตรวจสอบได้พฤติกรรม agonistic TR ใช้งานสาร หมู่เหล่านี้หนูค้น GH3 เซลล์วิเคราะห์ และ transcriptionalเปิดใช้งาน assays ออกแบบยีสต์และเซลล์ mammalian เรารายงานก่อสร้าง และตรวจสอบการออกแบบใหม่ TRα 1 แบคทีเรีย biosensor ซึ่งบ่งชี้สถานะของต่อมไทรอยด์ที่ใช้งานอยู่สารถึงผลกระทบต่อการเจริญเติบโตของสายพันธุ์ที่ coli Escherichia การออกแบบในที่เรียบง่ายกลางกำหนด Biosensor นี้คู่ของโดเมนรวมลิแกนด์ตัวรับฮอร์โมนกิจกรรมของเอนไซม์โปรแกรมรายงาน synthase thymidylate ผ่านฟิวชั่น allosteric การออกแบบโปรตีน ผลคือ phenotype เติบโตขึ้นอยู่กับฮอร์โมนในเซลล์ E. coli expressing เซนเซอร์นี้สามารถรวมกับ biosensor TRβ-1 ของเราเผยแพร่ก่อนหน้านี้ตรวจหาอาจรักษาสารประกอบชนิดย่อยใช้ GC 1 และ KB 141 แสดงให้เห็นถึงความสามารถนี้ เรากำหนดสูงสุดครึ่งผลความเข้มข้น (EC50) สำหรับสาร T3, Triac, GC 1 และ KB 141 ใช้ของเราbiosensors และกำหนดศักยภาพของญาติในแต่ละต้องใช้ biosensor ผลของเราจะคล้ายกับผู้รายงาน โดยเซลล์ mammalian โปรแกรมรายงานยีน assays ยืนยันของการวิเคราะห์ของเราในการระบุTR ชนิดย่อยเลือก therapeutics Biosensor นี้จึงแสดงความสูงสูง ตัวรับเฉพาะวิธีประหยัด (ต่ำกว่าสหรัฐอเมริกา $ 0.10 ต่อทั้งในระดับห้องปฏิบัติการ) สำหรับการระบุความสำคัญและtherapeutics กับเป้าหมายเหล่านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นามธรรม
thyromimetics ย่อย-เลือกที่มีศักยภาพเป็นยาใหม่สำหรับการป้องกันหรือรักษา
โรคหัวใจ, คอเลสเตอรอลสูงและโรคอ้วน แต่มีเพียงไม่กี่วิธีที่สามารถตรวจจับ
พฤติกรรมกระชับมิตรของสาร TR-ใช้งาน กลุ่มคนเหล่านี้ทดสอบต่อมใต้สมองหนูเซลล์ GH3 และการถอดรหัส
การตรวจยืนยันการใช้งานในยีสต์วิศวกรรมและเซลล์สัตว์ เรารายงานการก่อสร้างและ
การตรวจสอบของการออกแบบใหม่TRα-1 ไบโอเซนเซอร์แบคทีเรียซึ่งบ่งชี้ว่าการปรากฏตัวของการใช้งานของต่อมไทรอยด์
สารประกอบผ่านผลกระทบที่มีต่อการเจริญเติบโตของการออกแบบสายพันธุ์เชื้อ Escherichia coli ในง่าย
ขนาดกลางที่กำหนดไว้ คู่ไบโอเซนเซอร์นี้การกำหนดค่าของฮอร์โมนรับแกนด์ผูกพันโดเมน
กับกิจกรรมของเอนไซม์ thymidylate synthase นักข่าวผ่านฟิวชั่น allosteric วิศวกรรม
โปรตีน ผลที่ได้คือฮอร์โมนขึ้นอยู่กับต้นการเจริญเติบโตในการแสดงเซล E.coli เซ็นเซอร์นี้
สามารถใช้ร่วมกับการเผยแพร่ก่อนหน้านี้ของเราTRβ-1 ไบโอเซนเซอร์ในการตรวจสอบการรักษาอาจ
สารประกอบชนิดย่อยเลือกเช่น GC-1 และ KB-141 เพื่อแสดงให้เห็นความสามารถในการนี้เรากำหนด
ครึ่งเข้มข้นที่มีประสิทธิภาพสูงสุด (EC50) สารประกอบ T3, Triac, GC-1 และ KB-141 ใช้ของเรา
ไบโอเซนเซอร์และกำหนดความแรงของญาติของพวกเขาในแต่ละสายพันธุ์ไบโอเซนเซอร์ ผลของเรามีความคล้ายคลึงกับ
ผู้ที่รายงานโดยเซลล์เลี้ยงลูกด้วยนมการตรวจยีนนักข่าวยืนยันประโยชน์ของการทดสอบของเราในการระบุ
TR บำบัดชนิดย่อยเลือก ไบโอเซนเซอร์นี้จึงให้การส่งผ่านสูงรับเฉพาะ
และวิธีที่ประหยัด (น้อยกว่า 0.10 ดอลลาร์สหรัฐต่อทั้งในระดับห้องปฏิบัติการ) สำหรับการระบุความสำคัญ
กับเป้าหมายการรักษาเหล่านี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นามธรรมซึ่งมีศักยภาพในการ thyromimetics
เป็นยาใหม่ในการป้องกันหรือการรักษา
ของโรคหัวใจ คอเลสเตอรอลสูง โรคอ้วน แต่มีเพียงไม่กี่วิธีที่สามารถตรวจจับพฤติกรรม agonistic ของ TR ที่ใช้สารประกอบ ในหมู่เหล่านี้คือหนู ขับเสมหะ gh3 เซลล์ในการสร้าง particle
) ในยีสต์และ mammalian เซลล์เรารายงานการสร้างและการตรวจสอบของ
ออกแบบใหม่ TR แอลฟา 1 ไบโอเซนเซอร์แบคทีเรีย ซึ่งบ่งชี้ว่า การปรากฏตัวของต่อมไทรอยด์ปราดเปรียว
สารประกอบผ่านผลกระทบต่อการเจริญเติบโตของเชื้อ Escherichia coli สายพันธุ์วิศวกรรมในง่ายๆ
นิยามปานกลาง นี้ไบโอเซนเซอร์คู่การตั้งค่าของฮอร์โมนตัวรับลิแกนด์ผูกพัน
โดเมนต่อกิจกรรมของเอนไซม์และ thymidylate นักข่าวผ่านตัวควบคุมฟิวชั่น
วิศวกรรมโปรตีน ผลที่ได้คือฮอร์โมนการเจริญเติบโตขึ้นอยู่กับฟีโนไทป์ในการแสดง E . coli เซลล์ เซนเซอร์นี้
สามารถรวมกับของเราเผยแพร่ก่อนหน้านี้ TR บีตา - 1 ไบโอเซนเซอร์ตรวจจับอาจรักษา
ทั้งเลือกสารประกอบ เช่น gc-1 และ kb-141 . เพื่อแสดงให้เห็นถึงความสามารถนี้ เรากำหนด
เข้มข้นประสิทธิภาพสูงสุด ( ครึ่ง ec50 ) สำหรับสารประกอบ T3 , ไทรแอก gc-1 kb-141 , และใช้ไบโอเซนเซอร์ของเรา
และกำหนดความแรงสัมพัทธ์ของไบโอเซนเซอร์ในแต่ละสายพันธุ์ ผลของเราจะคล้ายกับ
ที่รายงานโดยเฉพาะนักข่าวยีนหรือเซลล์ยืนยันประโยชน์ของการทดสอบของเราในการระบุกลุ่ม
TR เลือกมากที่สุดในโลก ไบโอเซนเซอร์นี้จึงช่วยให้ ,รับเฉพาะ
และประหยัดวิธี ( น้อยกว่า US $ 0.10 ต่อได้ดีในระดับห้องปฏิบัติการ ) สำหรับการระบุสำคัญ
) กับเป้าหมายเหล่านี้