Material and MethodsPreparation of

Material and Methods
Preparation of modified diesel oil medium: The modified
diesel oil medium comprised of 0.7 gm K2HPO4, 0.1 gm
(NH4)2SO4, 0.3 gm KH2PO4, 0.3 gm MgSO4 7H2O, 2.2 gm agar
– agar5. The mineral components of the medium were dissolved
in 100 ml of distilled water and mixed with 2 ml of Gulf diesel
engine oil. The medium was autoclaved at 121oC for 15 min.

Enrichment of microorganisms: Microorganisms capable of
degrading diesel engine oil were enriched in sterile modified
diesel engine oil medium by inoculating soil (which was
collected from Maharashtra garage, 65 years old garage at
Sewri) in to the medium in 250 ml conical flask. 0.5 gm of this
garage soil was inoculated in to the 100 ml of sterile modified
diesel oil broth and allowed to incubate at 37oC for 1 week.
Isolation of microorganisms: After 1 week of incubation
period, 1 drop of enriched culture was spread on to the sterile
modified diesel oil agar plate. The plate was incubated at 37oC
for 48 hr. After 48 hr incubation; two different bacterial
colonies were selected from incubated plate. Each bacterial
colony type was sub cultured repeatedly onto sterile nutrient
agar plates to obtain a pure culture. Pure cultures of bacterial
isolates were identified on the basis of their colonial
morphology, cellular morphology and biochemical
characteristics according to the taxonomic scheme of Bergey’s
Manual of Determinative Bacteriology6.
Determination of microbial colony numbers for degradation
studies: 5 ml of sterile Nutrient broth was aseptically inoculated
with a loopful of pure culture of Colony 1(C1) in first test tube
and Colony 2 (C2) in second test tube and incubated both the
tubes at 37oC for 24 hr. After incubation, the numbers of
organisms present in one ml of nutrient broth were determined
by spread plate method. The numbers of organisms were
adjusted in both the tubes in such a way that both the isolates
contain approximately equal numbers of microorganism in one
ml of sample by using sterile Nutrient broth as a diluent7.
Soil sample collection and preparation: Top surface soil
sample was collected from the premises of the Shahid
Bhagatsingh Ground, Kalachowki; in sterilized plastic
containers. Soil sample meant for degradation studies was
sterilized using autoclave at 121oC for 15 min, after which it
was allowed to cool to room temperature for further treatments.
Description and treatment of samples: Test: i. 12 samples of
15 gm sterilized soil mixed with 1 ml (0.848 gm) of Sterile Gulf
diesel engine oil + 0.2 ml culture of C1, ii. 12 samples of 15 gm
sterilized soil mixed with 1 ml (0.848 gm) of Sterile Gulf diesel
engine oil + 0.2 ml culture of C 2, iii. 12 samples of 15 gm
sterilized soil mixed with 1 ml (0.848 gm) of Sterile Gulf diesel
engine oil + 0.1 ml culture of C1+ 0.1 ml culture of C 2
Control: 12 samples of 15 gm sterilized soil mixed with 1 ml
(0.848 gm) of Sterile Gulf diesel engine oil + 0.2 ml of sterile
distilled water.
Diesel oil degradation studies: The ability of C1, C2 and
mixture of both the bacterial isolates to degrade diesel oil was
monitored on the first day (day zero) of the study and
subsequently at 5-day interval for 25 days. Carbon tetrachloride
was employed as an extractant. On each day, two samples per
single treatment were analyzed for the quantity of residual
diesel oil7. Each of the 15gm soil treatment samples was mixed
with 40 ml of carbon tetrachloride, placed in a separating
conical flask, shaken vigorously for 3 min and allowed to settle
for 5 min. The liquid phase was separated by allowing the
supernatant (diesel oil – carbon tetrachloride) to pass gradually
through a funnel fitted with filter paper (Whatman No 1).
Anhydrous sodium sulphate spread on the filter paper was
employed to remove any moisture in the mixture. The liquid
phase was collected in a 50-ml pre-weighed beaker. The beaker
containing the extract was placed in an oven and the extractant
allowed to evaporate at 50oC. The beaker with the residual
diesel oil was allowed to cool to room temperature and weighed
to determine the quantity of residual diesel oil by difference8.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการเตรียมความพร้อมของกลางน้ำมันดีเซลที่ปรับเปลี่ยน: การปรับเปลี่ยนดีเซลน้ำมันกลางตั้งแต่ 0.7 กรัม K2HPO4, 0.1 กรัม(NH4) 2SO4, 0.3 กรัม KH2PO4, 0.3 กรัม MgSO4 7H2O, agar 2.2 กรัม-agar5 ส่วนประกอบแร่ของกลางถูกส่วนยุบใน 100 ml ของน้ำกลั่น และผสมกับ 2 ml ของอ่าวดีเซลน้ำมันเครื่อง สื่อ autoclaved ที่ 121oC สำหรับ 15 นาทีได้ของจุลินทรีย์: จุลินทรีย์สามารถลดน้ำมันเครื่องยนต์ดีเซลอุดมไปในกระบอกปรับเปลี่ยนกลางที่เป็นน้ำมันเครื่องยนต์ดีเซล โดย inoculating ดิน (ซึ่งเป็นรวบรวมจากมหาราษฎระโรงรถ โรงรถอายุ 65 ปีที่Sewri) ในระดับปานกลางใน 250 ml ทรงกรวยหนาว 0.5 กรัมนี้ดินโรงรถถูก inoculated ในการ 100 มลของกอซแก้ไขดีเซลน้ำมันซุป และสามารถฟักที่ 37oC สำหรับ 1 สัปดาห์แยกจุลินทรีย์: หลังจาก 1 สัปดาห์ของคณะทันตแพทยศาสตร์ระยะเวลา วัฒนธรรมอุดม 1 หยดกระจายไปเพื่อการฆ่าเชื้อปรับเปลี่ยนจาน agar น้ำมันดีเซล จานถูก incubated ที่ 37oCใน 48 ชม หลังจากบ่ม 48 ชั่วโมง แบคทีเรียแตกต่างกันสองอาณานิคมถูกเลือกจากแผ่น incubated แบคทีเรียแต่ละอาณานิคมชนิดถูกย่อยอ่างซ้ำ ๆ บนสารฆ่าเชื้อแผ่น agar รับวัฒนธรรมบริสุทธิ์ วัฒนธรรมบริสุทธิ์ของแบคทีเรียแยกระบุตามโคโลเนียลของพวกเขาสัณฐานวิทยาโทรศัพท์มือถือ สัณฐานวิทยา และชีวเคมีลักษณะตามโครงร่างของ Bergey ของอนุกรมวิธานคู่มือของ Determinative Bacteriology6กำหนดจำนวนโคโลนีจุลินทรีย์สำหรับย่อยสลายการศึกษา: 5 ml ของซุปใส่ธาตุอาหารถูก aseptically inoculatedมี loopful วัฒนธรรมบริสุทธิ์ของอาณานิคม 1(C1) ในหลอดทดสอบแรกและอาณานิคม 2 (C2) ในหลอดทดสอบที่สอง และ incubated ทั้งสองหลอดที่ 37oC 24 ชั่วโมง หลังจากบ่ม จำนวนสิ่งมีชีวิตที่อยู่ในมลหนึ่งของซุปธาตุอาหารถูกกำหนดโดยวิธีกระจายแผ่น หมายเลขของสิ่งมีชีวิตได้ปรับปรุงในหลอดทั้งสองในลักษณะที่ทั้งสองจะแยกประกอบด้วยจุลินทรีย์ในจำนวนเท่ากันโดยประมาณมิลลิลิตรของตัวอย่างโดยใช้ซุปใส่ธาตุอาหารเป็นตัว diluent7ดินการเก็บตัวอย่างและการเตรียม: บนผิวดินตัวอย่างรวบรวมจากสถานหิทพื้นดิน Bhagatsingh, Kalachowki ในพลาสติก sterilizedบรรจุภัณฑ์ ตัวอย่างดินสำหรับการศึกษาการย่อยสลายได้sterilized ใช้ด้วยที่ 121oC สำหรับ 15 นาที หลังจากที่ได้ได้รับอนุญาตให้เย็นอุณหภูมิห้องสำหรับการรักษาต่อไปคำอธิบายและรักษาตัวอย่าง: ทดสอบ: i. 12 ตัวอย่าง15 กรัม sterilized ดินผสม มี 1 ml (0.848 กรัม) ของอ่าว Sterileน้ำมันเครื่องยนต์ดีเซล + 0.2 ml วัฒนธรรมของ C1, ii ตัวอย่าง 15 กรัม 12sterilized ดินผสม มี 1 ml (0.848 กรัม) ของอ่าว Sterile ดีเซลน้ำมันเครื่อง + 0.2 ml วัฒนธรรม C 2, iii ตัวอย่าง 15 กรัม 12sterilized ดินผสม มี 1 ml (0.848 กรัม) ของอ่าว Sterile ดีเซลน้ำมันเครื่อง + 0.1 มล.วัฒนธรรมของ C1 + 0.1 มล.วัฒนธรรม 2 Cควบคุม: ตัวอย่างดิน 15 กรัม sterilized 12 ผสมกับ 1 ml(0.848 กรัม) ของน้ำมันเครื่องยนต์ดีเซล Sterile อ่าว + 0.2 ml ของกอซน้ำกลั่นศึกษาการย่อยสลายน้ำมันดีเซล: ความสามารถของ C1, C2 และมีส่วนผสมของทั้งสองแบคทีเรียที่แยกได้เพื่อย่อยสลายน้ำมันดีเซลตรวจสอบในวันแรก (วันศูนย์) ของการศึกษา และต่อมาในช่วงเวลา 5 วันวันที่ 25 คาร์บอนเตตระคลอไรด์ถูกจ้างเป็น extractant ในแต่ละวัน สองตัวอย่างต่อเดียวรักษาได้วิเคราะห์ปริมาณส่วนที่เหลือจากดีเซล oil7 แต่ละอย่างรักษาดิน 15 กรัมถูกผสมมี 40 ml ของคาร์บอนเตตระคลอไรด์ วางในการแยกทรงกรวยหนาว เขย่าโยคะสำหรับ 3 นาที และสามารถชำระใน 5 นาที เฟสของเหลวถูกคั่น โดยการให้การsupernatant (น้ำมันดีเซล – คาร์บอนเตตระคลอไรด์) ผ่านค่อย ๆโดยใช้กรวยที่มีกระดาษกรอง (Whatman No 1)ไดโซเดียมซัลเฟตที่แพร่กระจายบนกระดาษกรองได้หยุดเอาความชื้นใด ๆ ในส่วนผสม ของเหลวขั้นตอนรวบรวมในบีกเกอร์ก่อนชั่งน้ำหนักตัว 50 ml บีกเกอร์ประกอบด้วยการดึงข้อมูลถูกวางไว้ในเตาอบและ extractantสามารถระเหยที่ 50oC บีกเกอร์กับส่วนที่เหลือจากการน้ำมันดีเซลที่อนุญาตให้เย็นอุณหภูมิห้อง และชั่งน้ำหนักเพื่อกำหนดปริมาณของน้ำมันดีเซลที่เหลือ โดย difference8

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
เตรียมความพร้อมของกลางน้ำมันดีเซลแก้ไข: แก้ไข
กลางน้ำมันดีเซลประกอบด้วย 0.7 กรัม K2HPO4 0.1 กรัม
(NH4) 2SO4 0.3 กรัม KH2PO4 0.3 กรัม MgSO4 7H2O, วุ้น 2.2 กรัม
- agar5 ส่วนประกอบแร่ของกลางที่ถูกละลาย
ใน 100 มิลลิลิตรของน้ำกลั่นและผสมกับ 2 มิลลิลิตรของอ่าวดีเซล
น้ำมันเครื่อง ขนาดกลางได้รับการนึ่งฆ่าเชื้อที่ 121oC เป็นเวลา 15 นาที. ตกแต่งของจุลินทรีย์: จุลินทรีย์ที่มีความสามารถในการย่อยสลายน้ำมันเครื่องยนต์ดีเซลได้รับการเสริมสมรรถนะในการแก้ไขผ่านการฆ่าเชื้อเครื่องยนต์ดีเซลขนาดกลางน้ำมันโดยการฉีดวัคซีนดิน (ซึ่งถูกเก็บมาจากโรงรถ Maharashtra, อายุ 65 ปีที่จอดรถที่Sewri) ในการ กลางในขวดรูปกรวยขนาด 250 ml 0.5 กรัมนี้ดินที่จอดรถได้รับเชื้อใน 100 มิลลิลิตรของการแก้ไขผ่านการฆ่าเชื้อน้ำซุปน้ำมันดีเซลและได้รับอนุญาตในการฟักไข่ที่ 37oC เป็นเวลา 1 สัปดาห์. การแยกจุลินทรีย์: หลังจาก 1 สัปดาห์ของการบ่มระยะเวลา 1 หยดของวัฒนธรรมที่อุดมได้รับการแพร่กระจายไปยัง ผ่านการฆ่าเชื้อน้ำมันดีเซลปรับเปลี่ยนจานเลี้ยงเชื้อ แผ่นที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37oC เป็นเวลา 48 ชั่วโมง หลังจาก 48 ชั่วโมงบ่ม; แบคทีเรียที่แตกต่างกันสองอาณานิคมได้รับการคัดเลือกจากจานบ่มเพาะ แต่ละแบคทีเรียชนิดอาณานิคม Sub เลี้ยงซ้ำลงบนสารอาหารที่ผ่านการฆ่าเชื้อแผ่นวุ้นที่จะได้รับเชื้อบริสุทธิ์ วัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ของแบคทีเรียสายพันธุ์ที่ถูกระบุบนพื้นฐานของอาณานิคมของพวกเขาสัณฐานวิทยา, การเปลี่ยนรูปร่างของเซลล์และชีวเคมีลักษณะตามโครงการการจัดหมวดหมู่ของ Bergey ของคู่มือการ Determinative Bacteriology6. การกำหนดหมายเลขอาณานิคมจุลินทรีย์ย่อยสลายการศึกษา: 5 มิลลิลิตรของน้ำซุปสารอาหารที่ผ่านการฆ่าเชื้อได้รับเชื้อปลอดเชื้อกับ loopful ของวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ของอาณานิคมที่ 1 (C1) ในหลอดทดสอบครั้งแรกและอาณานิคม 2 (C2) ในหลอดทดสอบที่สองและบ่มทั้งหลอดที่ 37oC เป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังจากการบ่มตัวเลขของสิ่งมีชีวิตที่อยู่ในหนึ่งมิลลิลิตรของน้ำซุปสารอาหารที่ได้รับการพิจารณาโดยการแพร่กระจายวิธีแผ่น หมายเลขของสิ่งมีชีวิตที่ได้รับการปรับเปลี่ยนทั้งในหลอดในลักษณะที่ว่าทั้งสองสายพันธุ์มีตัวเลขเท่ากันโดยประมาณของจุลินทรีย์ในหนึ่งมิลลิลิตรตัวอย่างโดยใช้น้ำซุปเป็นสารอาหารที่ผ่านการฆ่าเชื้อ diluent7. เก็บตัวอย่างดินและการเตรียมความพร้อม: บนผิวดินตัวอย่างที่เก็บ จากสถานที่ของ Shahid Bhagatsingh พื้น Kalachowki; พลาสติกฆ่าเชื้อภาชนะ ตัวอย่างดินหมายสำหรับการศึกษาการย่อยสลายได้รับการฆ่าเชื้อโดยใช้หม้อนึ่งความดันที่ 121oC เป็นเวลา 15 นาทีหลังจากที่มันได้รับอนุญาตให้เย็นที่อุณหภูมิห้องสำหรับการรักษาต่อไป. คำอธิบายและการรักษาตัวอย่าง: การทดสอบ: ฉัน 12 ตัวอย่าง15 กรัมดินฆ่าเชื้อผสมกับ 1 มิลลิลิตร (0.848 กรัม) หมันอ่าวน้ำมันหล่อลื่นเครื่องยนต์ดีเซล + วัฒนธรรม 0.2 มิลลิลิตร C1, ii 12 ตัวอย่างจาก 15 กรัมดินฆ่าเชื้อผสมกับ 1 มิลลิลิตร (0.848 กรัม) หมันอ่าวดีเซลน้ำมันเครื่อง + วัฒนธรรม 0.2 มิลลิลิตร C 2, iii 12 ตัวอย่างจาก 15 กรัมดินฆ่าเชื้อผสมกับ 1 มิลลิลิตร (0.848 กรัม) หมันอ่าวดีเซลน้ำมันเครื่อง + 0.1 มลวัฒนธรรมของ C1 + 0.1 มลวัฒนธรรมของ C 2 ควบคุม: 12 ตัวอย่างจาก 15 กรัมดินฆ่าเชื้อผสมกับ 1 มิลลิลิตร(0.848 กรัม) ของหมันอ่าวเครื่องยนต์ดีเซลน้ำมัน + 0.2 มิลลิลิตรผ่านการฆ่าเชื้อน้ำกลั่น. ดีเซลศึกษาการย่อยสลายน้ำมันสามารถของ C1, C2 และส่วนผสมของทั้งสองแบคทีเรียในการย่อยสลายน้ำมันดีเซลได้รับการตรวจสอบในวันแรก (วันที่ศูนย์) ของการศึกษาและต่อมาในช่วงเวลา 5 วัน 25 วัน คาร์บอนเตตระถูกจ้างมาเป็นสารสกัด ในแต่ละวันทั้งสองตัวอย่างต่อการรักษาเดียวที่ได้มาวิเคราะห์หาปริมาณของเหลือดีเซล oil7 แต่ละตัวอย่างรักษาดิน 15gm ผสมกับ 40 มิลลิลิตรของคาร์บอนที่วางไว้ในการแยกขวดรูปกรวยเขย่าแรง ๆ เป็นเวลา 3 นาทีและได้รับอนุญาตให้ชำระเป็นเวลา 5 นาที ของเหลวที่ถูกแยกออกจากกันโดยให้สารละลาย (น้ำมันดีเซล - คาร์บอน) ที่จะผ่านค่อยๆผ่านช่องทางที่พอดีกับกระดาษกรอง (Whatman ไม่มี 1). โซเดียมซัลเฟตรัสแพร่กระจายบนกระดาษกรองได้รับการว่าจ้างให้เอาความชื้นในส่วนผสม ของเหลวขั้นตอนที่ถูกรวบรวมไว้ใน 50 มลบีกเกอร์ก่อนชั่งน้ำหนัก ถ้วยแก้วที่มีสารสกัดจากถูกวางไว้ในเตาอบและสารสกัดที่ได้รับอนุญาตที่จะระเหยที่ 50 องศาเซลเซียส บีกเกอร์ที่มีเหลือน้ำมันดีเซลได้รับอนุญาตให้เย็นที่อุณหภูมิห้องและชั่งน้ำหนักเพื่อตรวจสอบปริมาณน้ำมันดีเซลเหลือโดย difference8

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการเตรียมสูตรอาหารดัด
น้ำมันดีเซล : แก้ไข
น้ำมันดีเซลกลางประกอบด้วย 0.7 กรัม k2hpo4 0.1 กรัม
( NH4 ) 2so4 0.3 กรัม kh2po4 0.3 กรัม MgSO4 ใ 7h2o 2.2 กรัมวุ้น
- agar5 . แร่องค์ประกอบของสื่อถูกละลาย
100 มิลลิลิตรของน้ำและผสมกับ 2 มล. ของน้ำมันในอ่าวเครื่องยนต์ดีเซล

สื่อที่ถูกสังเคราะห์ 121oc 15 นาที

การเพิ่มคุณค่าของจุลินทรีย์ จุลินทรีย์ที่สามารถย่อยสลายได้ด้วยน้ำมันเครื่องยนต์ดีเซล

น้ำมันเครื่องยนต์ดีเซลดัดแปลงในงานสื่อณดิน ( ซึ่งเป็น
เก็บจากรัฐมหาราษฏระอู่ อายุ 65 ปี อู่ที่
sewri ) ในสื่อ 250 ml ขวดกรวย . นี้
อู่ดิน 0.5 กรัมต่อ 100 มิลลิลิตร เป็นเชื้อในการเป็นหมันของ
ดีเซลน้ำมัน น้ำซุป และได้รับอนุญาตให้พักที่ 37oc 1 สัปดาห์
แยกจุลินทรีย์ : หลังจาก 1 สัปดาห์ของระยะฟักตัว
1 หยด อุดมวัฒนกระจายบนจานวุ้นปลอดเชื้อ
แก้ไขน้ำมันดีเซล จาน บ่มที่ 37oc
เป็นเวลา 48 ชั่วโมง หลังจาก 48 ชั่วโมง บ่ม ; สองอาณานิคมแบคทีเรีย
แตกต่างกันจำนวนเชื้อในจาน แบคทีเรีย
แต่ละประเภทย่อย ๆอาณานิคมถูกเลี้ยงบนอาหารวุ้นปลอดเชื้อ
แผ่นเพื่อให้ได้เชื้อบริสุทธิ์ เชื้อบริสุทธิ์ของแบคทีเรียไอโซเลท
ระบุบนพื้นฐานของอาณานิคมของพวกเขา
สัณฐานวิทยาของเซลล์ ลักษณะทางสัณฐานวิทยาและชีวเคมี
ตามโครงการและวิธีของ
คู่มือของตัวกำหนด bacteriology6 .
หาตัวเลขโคโลนีจุลินทรีย์เพื่อการย่อยสลาย
ศึกษา :5 ml ของน้ำสารอาหารเป็นหมันคือ aseptically หัวเชื้อ
กับ loopful ของเชื้อบริสุทธิ์ของกลุ่ม 1 ( C1 ) ในหลอดทดลองและกลุ่มแรก
2 ( C2 ) ในหลอดทดลอง 2 หลอด 37oc
) ทั้ง 24 ชั่วโมง หลังจากบ่ม ตัวเลข
สิ่งมีชีวิตปัจจุบันในหนึ่งมิลลิลิตร สารละลายธาตุอาหาร โดยวิธี Broth
แผ่นกระจาย ตัวเลขของสิ่งมีชีวิตใน
ปรับได้ทั้งในท่อในลักษณะที่ทั้งสองไอโซเลต
มีประมาณเท่ากับตัวเลขของจุลินทรีย์ในตัวอย่างน้ำซุป
มิลลิลิตรโดยใช้สารอาหารที่เป็นหมันเป็น diluent7 .
การเก็บตัวอย่างดินและการเตรียมพื้นผิวด้านบน
: การเก็บตัวอย่างดินจากสถานที่ของ ชา ด
bhagatsingh kalachowki ; ในการฆ่าเชื้อภาชนะบรรจุดิน พลาสติก

ตัวอย่างดินหมายถึงการฆ่าเชื้อ Autoclave ที่ใช้ศึกษาคือ
121oc 15 นาทีหลังจากที่มัน
ได้รับอนุญาตให้เย็นเพื่ออุณหภูมิห้อง เพื่อการรักษาต่อไป .
รายละเอียดและการรักษาของตัวอย่างทดสอบ : ชั้น 12 ตัวอย่างของ
15 กรัมฆ่าเชื้อดินผสม 1 ml ( 0.488 กรัม ) ของวัฒนธรรมอ่าว
เครื่องยนต์ดีเซล น้ำมัน 0.2 มล. ปลอดเชื้อของ C1 , 2 12 ตัวอย่าง 15 กรัม
ฆ่าเชื้อในดินผสม 1 ml ( 0.488 กรัม ) เป็นหมันของอ่าวดีเซลน้ำมันเครื่อง 0.2 มล.
วัฒนธรรม C 2 3 12 ตัวอย่าง 15 กรัม
ฆ่าเชื้อดินผสม 1 ml ( 0.488 กรัม ) เป็นหมันของอ่าวดีเซล
น้ํามันเครื่อง 0.1 มิลลิลิตร วัฒนธรรมของ C1 0.1 มิลลิลิตร วัฒนธรรมของ C 2
12 ตัวอย่างควบคุม 15 กรัมฆ่าเชื้อดินผสม 1 ml
( 0.488 กรัม ) ของมลอ่าวเครื่องยนต์ดีเซลน้ำมัน 0.2 ฆ่าเชื้อฆ่าเชื้อ

ของน้ำกลั่นการศึกษาความสามารถในการย่อยสลาย น้ำมัน ดีเซล ของ C1 , C2 และ
ผสมทั้งแบคทีเรียที่คัดเลือกเพื่อลดน้ำมัน ดีเซลเป็น
ตรวจสอบในวันแรก ( วันที่ศูนย์ ) ของการศึกษา
ต่อมาที่ 5 จำนวน 25 วัน คาร์บอนเตตระคลอไรด์
ถูกนำมาใช้เป็นสารสกัด . ในแต่ละวัน สองตัวอย่างต่อ
เดียวการวิเคราะห์หาปริมาณตกค้าง
ดีเซล oil7 .ของแต่ละ 15gm รักษาตัวอย่างดินผสม
40 มิลลิลิตร คาร์บอนเตตระคลอไรด์ วางอยู่ในจาน แยก
ขวด เขย่าแรงๆ สัก 3 นาที และได้รับอนุญาตให้ตั้งถิ่นฐาน
5 นาที เฟสของเหลวแยกโดยให้
น่าน ( น้ำมันดีเซล ) คาร์บอนเตตระคลอไรด์ ) ผ่านทางช่องทางติดตั้ง
ค่อย ๆ กระดาษกรอง ( whatman
1 )แอนไฮดรัสโซเดียมซัลเฟตกระจายบนกระดาษกรองคือ
ใช้เพื่อลบใด ๆความชื้นในส่วนผสม เฟสของเหลว
รวบรวมใน 50 ml ก่อนน้ำหนักบีกเกอร์ . เอา
ที่มีสารสกัดถูกวางในเตาอบและสกัด
อนุญาตให้ระเหยที่ 50oc . เอากับน้ำมันดีเซลที่เหลือ
ได้รับอนุญาตให้เย็นเพื่ออุณหภูมิห้องและชั่งน้ำหนัก
เพื่อศึกษาปริมาณน้ำมันดีเซลที่ตกค้าง โดย difference8 .