3.2. Thermal resistance of M. circi

3.2. Thermal resistance of M. circinelloides yogurt spoilage isolate
3.2.1. Hyphal phase thermal resistance
The thermal resistance of theM. circinelloides yogurt spoilage isolate was assessed in both the hyphal and yeast-like growth phases. Hyphal phase growth was confirmed by colony and cell morphology (Fig. 2A) and was characterized by aerial mycelial development on plates incubated under aerobic conditions. Microscopic examination of these cultures revealed the typical branched, aseptate, apically growing hyphae (Schipper, 1976; Pitt and Hocking, 2009). Hypha and sporangiospores were observed by microscopy before thermal destruction. In skim milk as a medium, destruction of the hyphal phase cells was readily achieved at 58 °C. At 58 °C, about a log of hyphal phase M. circinelloides was eliminated every two minutes. The D- and z-values for hyphal
phase cells (Table 2) indicate that cells would be readily eliminated under typical milk pasteurization regimens (e.g. 72 °C for 15 s) (Codex, 2014).
3.2.2. Yeast-like phase thermal resistance
The M. circinelloides yogurt spoilage isolate in the yeast-like phase was determined to be less resistant to thermal treatment than hyphal phase cells. Yeast-like growth was confirmed by colony and cell morphology (Fig. 2B). Plates incubated under anaerobic conditions yielded smooth, round colonies similar to yeast colonies.Microscopic examination revealed small, round cells indicative of isotropic growth. In the
yeast-like phase, cells were rapidly destroyed by treatment at 55 °C using skim milk as a medium. Relative to hyphal phase cells, inactivation of yeast-like phase cells required less exposure to thermal processing (Table 2).
3.3. Challenge study
The impact on yogurt spoilage of the antifungal additive natamycin at varying oncentrations was evaluated by assessing fungal growth at 4 °C, 15 °C, 25 °C in the hyphal phase, yeast-like phase, and by measurement of CO2 production in the yeast-like phase. The effect of temperature abuse on spoilage is an indication of the storage conditions which lead to the large-scale recall.
3.3.1. Hyphal phase
Hyphal phase growth under various incubation conditions is shown in Fig. 3. The maximum population increase achieved under each storage conditionwas ~3.5 log CFU/g yogurt. Spoiled yogurt had visible mycelial growth and syneresis. However, the time at which maximum counts were achieved decreased as storage temperature increased. Additionally,
the relative effectiveness of natamycin addition was affected by storage temperature. At storage temperatures of 4 °C and 15 °C,10 ppm was sufficient to significantly inhibit hyphal phase growth throughout the 30 day incubation period. When storage temperature
was increased to 25 °C, outgrowth of fungi was observed by day 14 with 10 ppm natamycin. At 25 °C, natamycin concentrations of 15 ppm or greater were necessary to inhibit hyphal growth. Natamycin in yogurt at a concentration of 10 ppm significantly reduced fungal proliferation compared to yogurt samples treated with 0 ppm or 5 ppm natamycin. However, response to natamycin concentrations of 15 ppm and 20 ppm was significantly different compared to 10 ppm natamycin concentrations by day 30 of the challenge study. Fungicidal
activity was observed at natamycin concentrations in excess of 5 ppm.Die off of M. circinelloides was more rapid at 15 °C and 25 °C, although the counts were eventually reduced to below detection limits under all incubation conditions. Natamycin concentrations of 10 ppm allowed hyphal phase populations incubated at 15 °C and 25 °C to recover before the end of the 30 day incubation period.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2. ความร้อนความต้านทานของเน่าเสียโยเกิร์ต circinelloides เมตรแยก3.2.1. hyphal ระยะต้านทานความร้อนต้านทานความร้อนของพวกเขา รับการประเมินในระยะเติบโต hyphal และยีสต์เหมือน circinelloides โยเกิร์ตโปรตีนเน่าเสีย เติบโตระยะ hyphal ยืนยันการอาณานิคมและเซลล์สัณฐาน (รูป 2A) และมีลักษณะพิเศษ โดยทางอากาศ mycelial พัฒนาบนแผ่นภายใต้เงื่อนไขแอโรบิกได้รับการกก ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของวัฒนธรรมเหล่านี้เปิดเผย aseptate กิ่ง ปกติ apically เติบโต hyphae (Schipper, 1976 พิตต์และ Hocking, 2009) Hypha และ sporangiospores ถูกตั้งข้อสังเกต ด้วยกล้องจุลทรรศน์ก่อนความร้อนทำลาย ในนมพร่องมันเนยเป็นสื่อกลาง ทำลายเซลล์ระยะ hyphal สำเร็จพร้อมที่ 58 องศาเซลเซียส ที่ 58 ° C เกี่ยวกับล็อก hyphal ระยะ circinelloides เมตรถูกตัดทุก ๆ สองนาทีออก D-z-ค่า และสำหรับ hyphalระยะเซลล์ (ตารางที่ 2) ระบุว่า เซลล์จะถูกกำจัดได้อย่างง่ายดายภายใต้สูตรการพาสเจอร์ไรซ์นมทั่วไป (เช่น 72 ° C เป็นเวลา 15 วินาที) (Codex, 2014)3.2.2 ต้านทานความร้อนระยะเหมือนยีสต์พิจารณา M. circinelloides โยเกิร์ตเน่าเสีย isolate ในเฟสเหมือนยีสต์จะไม่ทนต่อการรักษาความร้อนกว่าเซลล์ hyphal เฟส เหมือนยีสต์เจริญเติบโตได้รับการยืนยัน โดยอาณานิคมและเซลล์สัณฐาน (รูปที่ 2B) ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนได้รับการกกแผ่นผลเรียบ กลมคล้ายกับยีสต์อาณานิคมอาณานิคม ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์เปิดเผยเล็ก กลมบ่งบอกถึง isotropic เจริญเติบโตของเซลล์ ในขั้นตอนเหมือนยีสต์ เซลล์ถูกทำลายอย่างรวดเร็ว โดยการรักษาที่ 55 ° C โดยใช้นมพร่องมันเนยเป็นสื่อกลาง สัมพันธ์กับเซลล์ hyphal เฟส ฤทธิ์เซลล์ยีสต์เหมือนขั้นตอนจำเป็นน้อยเพื่อประมวลผลความร้อน (ตาราง 2)3.3 การศึกษาท้าทายผลกระทบต่อการเน่าเสียของโยเกิร์ตของ natamycin เสพติดเชื้อราที่แตกต่างกัน oncentrations รับการประเมิน โดยการประเมินการเจริญเติบโตเชื้อราที่ 4 ° C, 15 ° C, 25 ° C ในระยะ hyphal ยีสต์เหมือนระยะ และวัดการผลิต CO2 ในเฟสเหมือนยีสต์ ผลของอุณหภูมิการละเมิดเน่าเสียเป็นการบ่งชี้เงื่อนไขเก็บข้อมูลที่นำไปสู่การเรียกคืนขนาดใหญ่3.3.1. hyphal เฟสHyphal ระยะเจริญเติบโตภายใต้เงื่อนไขกกไข่ต่าง ๆ จะแสดงใน การเพิ่มขึ้นของประชากรสูงสุดได้ภายใต้แต่ละแฟ้มบันทึก ~3.5 conditionwas เก็บโยเกิร์ต CFU/g เติบโต mycelial ที่มองเห็นและ syneresis โยเกิร์ตบูดได้ อย่างไรก็ตาม เวลาที่บรรลุผลในการนับสูงสุดลดลงตามอุณหภูมิที่เพิ่มขึ้น นอกจากนี้ประสิทธิภาพสัมพัทธ์ของ natamycin นอกจากนี้ได้รับผลกระทบจากอุณหภูมิ ที่เก็บอุณหภูมิ 4 ° C ถึง 15 ° C, 10 ppm ไม่เพียงพออย่างมีนัยสำคัญยับยั้ง hyphal ระยะเจริญเติบโตตลอดระยะเวลากกไข่ 30 วัน เมื่ออุณหภูมิในการเก็บเพิ่มขึ้นถึง 25 ° C เติบโตของเชื้อราพบว่า วันที่ 14 กับ 10 ppm natamycin ที่ 25 ° C, natamycin ความเข้มข้น 15 ppm หรือมากกว่าจำเป็นในการยับยั้งการเจริญเติบโต hyphal Natamycin ในโยเกิร์ตที่ความเข้มข้น 10 ppm ลดเชื้อราแพร่กระจายเมื่อเทียบกับตัวอย่างโยเกิร์ตรักษา ด้วย natamycin 0 ppm หรือ 5 ppm อย่างไรก็ตาม ตอบ natamycin ความเข้มข้น 15 ppm และ 20 ppm ได้แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับความเข้มข้นของ natamycin 10 ppm โดยวันที่ 30 ของการศึกษาความท้าทาย เชื้อรากิจกรรมพบว่า ที่ความเข้มข้น natamycin เกิน 5 ppm ตายออกจาก M. circinelloides ได้เร็วกว่าที่ 15 ° C และ 25 ° C แม้ว่าการตรวจนับถูกลดไปต่ำกว่าขีดจำกัดการตรวจสอบสภาวะบ่มในที่สุด รับการ Natamycin ความเข้มข้นของ 10 ppm อนุญาตประชากร hyphal ระยะกกที่ 15 ° C และ 25 ° C การกู้คืนก่อนสิ้นสุดระยะเวลากกไข่ 30 วัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 ความต้านทานความร้อนของเอ็ม circinelloides การเน่าเสียของโยเกิร์ตแยก
3.2.1 เฟสเส้นใยต้านทานความร้อน
ความต้านทานความร้อนของพวกเขา โยเกิร์ต circinelloides เน่าเสียแยกได้รับการประเมินทั้งในเส้นใยและยีสต์เช่นระยะการเจริญเติบโต การเจริญเติบโตของเส้นใยขั้นตอนการได้รับการยืนยันโดยอาณานิคมและสัณฐานวิทยาของเซลล์ (รูป. 2A) และก็มีลักษณะการพัฒนาเส้นใยอากาศบนจานบ่มภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์วัฒนธรรมเหล่านี้เผยให้เห็นทั่วไปกิ่ง aseptate, ปลายเป็นเส้นใยเจริญเติบโต (Schipper 1976; พิตต์และสาบ 2009) Hypha และปอร์ถูกตั้งข้อสังเกตโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ก่อนที่จะทำลายความร้อน ในนมพร่องมันเนยเป็นสื่อกลางในการทำลายของเซลล์เฟสเส้นใยก็ประสบความสำเร็จได้อย่างง่ายดายที่ 58 ° C ที่ 58 ° C, เกี่ยวกับการล็อกเฟสเส้นใย circinelloides เมตรถูกตัดออกทุกสองนาที D- และ Z-ค่าสำหรับเส้นใย
เซลล์เฟส (ตารางที่ 2) แสดงให้เห็นว่าเซลล์จะถูกกำจัดได้อย่างง่ายดายภายใต้สูตรพาสเจอร์ไรซ์นมทั่วไป (เช่น 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 วินาที) (Codex 2014).
3.2.2 ยีสต์เหมือนขั้นตอนการต้านทานความร้อน
circinelloides เอ็มโยเกิร์ตเน่าเสียแยกในระยะยีสต์เช่นมุ่งมั่นจะเป็นน้อยดื้อต่อการรักษาความร้อนกว่าเซลล์เฟสเส้นใย การเจริญเติบโตของยีสต์เหมือนได้รับการยืนยันโดยอาณานิคมและสัณฐานวิทยาของเซลล์ (รูป. 2B) แผ่นบ่มภายใต้สภาวะไร้ออกซิเจนให้ผลเรียบอาณานิคมรอบคล้ายกับการตรวจสอบยีสต์ colonies.Microscopic เปิดเผยขนาดเล็กเซลล์รอบตัวบ่งชี้ของการเจริญเติบโตแบบรอบทิศ ใน
เฟสยีสต์เช่นเซลล์ถูกทำลายได้อย่างรวดเร็วโดยการรักษาที่ 55 องศาเซลเซียสโดยใช้นมพร่องมันเนยเป็นสื่อกลาง เมื่อเทียบกับเซลล์เฟสเส้นใยยับยั้งของเซลล์ยีสต์เฟสเหมือนต้องเปิดรับแสงน้อยที่จะประมวลผลความร้อน (ตารางที่ 2).
3.3 การศึกษาความท้าทาย
ผลกระทบต่อการเน่าเสียของโยเกิร์ตของ natamycin สารเติมแต่งเชื้อราที่ oncentrations ที่แตกต่างกันได้รับการประเมินโดยการประเมินการเจริญเติบโตของเชื้อราที่ 4 ° C, 15 ° C, 25 ° C ในขั้นตอนเส้นใยเฟสยีสต์เหมือนและโดยการวัดของการผลิตก๊าซ CO2 ใน ระยะยีสต์เช่น ผลของการละเมิดอุณหภูมิต่อการเน่าเสียเป็นข้อบ่งชี้ของเงื่อนไขการจัดเก็บข้อมูลที่นำไปสู่การเรียกคืนขนาดใหญ่.
3.3.1 เฟสเส้นใย
เส้นใยเจริญเติบโตขั้นตอนภายใต้เงื่อนไขการบ่มต่างๆที่แสดงในรูป 3. การเพิ่มขึ้นของประชากรสูงสุดที่ประสบความสำเร็จในแต่ละ conditionwas จัดเก็บ ~ 3.5 log CFU / g โยเกิร์ต โยเกิร์ตมีนิสัยเสียเจริญของเส้นใยที่มองเห็นและ syneresis แต่เวลาที่นับสูงสุดก็ประสบความสำเร็จลดลงเมื่ออุณหภูมิการเก็บรักษาเพิ่มขึ้น นอกจากนี้
ประสิทธิภาพของญาตินอกจาก natamycin รับผลกระทบจากอุณหภูมิการเก็บรักษา ที่อุณหภูมิการเก็บรักษา 4 องศาเซลเซียสและ 15 องศาเซลเซียส 10 ppm ก็เพียงพอที่จะยับยั้งการเจริญเติบโตอย่างมีนัยสำคัญเฟสเส้นใยตลอดระยะเวลาการบ่ม 30 วัน เมื่ออุณหภูมิการเก็บรักษา
เพิ่มขึ้นเป็น 25 ° C, ผลพลอยได้จากเชื้อราได้รับการตรวจสอบโดยวันที่ 14 มี natamycin 10 ppm ที่ 25 ° C เข้มข้น natamycin 15 ppm หรือมากกว่ามีความจำเป็นในการยับยั้งการเจริญเติบโตเส้นใย natamycin ในโยเกิร์ตที่มีความเข้มข้น 10 ppm อย่างมีนัยสำคัญลดการแพร่กระจายของเชื้อราเมื่อเทียบกับตัวอย่างโยเกิร์ตได้รับการรักษาด้วย 0 ppm หรือ 5 natamycin ppm แต่การตอบสนองต่อความเข้มข้น natamycin 15 ppm และ 20 ppm ถูกที่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับ 10 ppm ความเข้มข้น natamycin โดยวันที่ 30 ของการศึกษาความท้าทาย เชื้อรา
กิจกรรมพบว่าที่ความเข้มข้น natamycin ในส่วนที่เกิน 5 ppm.Die ออกจาก circinelloides เมตรเป็นมากขึ้นอย่างรวดเร็วที่ 15 ° C และ 25 ° C ถึงแม้ว่านับในที่สุดก็ลดลงไปต่ำกว่าเกณฑ์การตรวจสอบภายใต้เงื่อนไขการบ่มทั้งหมด ความเข้มข้น natamycin 10 ppm อนุญาตให้ประชากรเฟสเส้นใยบ่มที่อุณหภูมิ 15 องศาเซลเซียสและ 25 องศาเซลเซียสในการกู้คืนก่อนที่จะสิ้นสุดระยะเวลาการบ่ม 30 วัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 . ความต้านทานความร้อนของ circinelloides โยเกิร์ตการแยกดำเนินงาน . ต้านทานความร้อนลดลง เฟสความต้านทานความร้อนของพวกเขา การแยกและ circinelloides โยเกิร์ตทั้งเส้นใยและยีสต์ เช่น ระยะการเจริญเติบโต การเจริญเติบโตระยะที่เส้นใยที่ได้รับการยืนยันโดยอาณานิคมและรูปร่างของเซลล์ ( รูปที่ 2A ) และมีลักษณะการพัฒนาของอากาศบนแผ่นบ่มภายใต้สภาวะแอโรบิก . ตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ของวัฒนธรรมเหล่านี้ พบทั่วไป aseptate กิ่ง , การ , apically ( ชิปเปอร์ ) , 1976 ; Pitt และขาย , 2009 ) ไฮฟา และ sporangiospores พบด้วยกล้องจุลทรรศน์ก่อนที่จะทำลายความร้อน ในหางนมเป็นสื่อ ทำลายเซลล์ระยะที่เส้นใยพร้อมความ 58 องศา ที่ 58 องศา C , เกี่ยวกับบันทึกของเส้นใยระยะที่ม. circinelloides ถูกตัดทุกสองนาที D - และ z-values สำหรับเส้นใยเซลล์ระยะ ( ตารางที่ 2 ) พบว่าเซลล์จะพร้อมตัดนมพาสเจอร์ไรส์ภายใต้ทั่วไปยา ( เช่น 72 ° C เป็นเวลา 15 วินาที ) ( Codex 2014 )3.2.2 . ยีสต์ชอบระยะต้านทานความร้อนเมตร circinelloides โยเกิร์ตการแยกยีสต์เหมือนในเฟสก็ตั้งใจที่จะเป็นน้อยทนต่อความร้อนการรักษากว่าเส้นใยระยะที่เซลล์ ยีสต์ เช่น การยืนยันจากอาณานิคมและรูปร่างของเซลล์ ( รูปที่ 2B ) แผ่น ) ภายใต้เงื่อนไขและถังกลมเกลี้ยงอาณานิคมคล้ายคลึงกับโคโลนียีสต์ กล้องจุลทรรศน์ พบเซลล์ขนาดเล็ก บ่งบอกถึงการเจริญเติบโตแบบกลม ในยีสต์ชอบเฟสเซลล์ได้อย่างรวดเร็วทำลายโดยการรักษาที่ 55 องศา C โดยใช้หางนมเป็นตัวกลาง เมื่อเทียบกับเส้นใยระยะที่เซลล์ ทำให้เซลล์ของยีสต์ เช่นระยะที่ต้องการแสงน้อยกระบวนการความร้อน ( ตารางที่ 2 )3.3 . การศึกษาความท้าทายผลกระทบในโยเกิร์ต การเน่าเสียของนาตาไมซิน เสริมฤทธิ์ที่แตกต่างกัน oncentrations ประเมินการประเมินการเจริญเติบโตที่ 4 ° C , 15 ° C 25 ° C ในระยะที่เส้นใย ยีสต์ เช่น ระยะ และการวัดผลของการผลิต CO2 ในยีสต์ เช่น ระยะ ผลของการใช้อุณหภูมิในการเป็นข้อบ่งชี้ของการจัดเก็บภาพ ซึ่งนำไปสู่การขนาดใหญ่3.3.1 . เส้นใยระยะที่เส้นใยระยะการเจริญเติบโตภายใต้เงื่อนไขการบ่มต่างๆ จะแสดงในรูปที่ 3 การเพิ่มจำนวนประชากรสูงสุดบรรลุภายใต้แต่ละกระเป๋า conditionwas ~ 3.5 log CFU / กรัมโยเกิร์ต โยเกิร์ตบูดได้มองเห็นของการเจริญเติบโตและการแยกตัวของน้ำ . อย่างไรก็ตาม เวลาที่ถือว่าสูงสุดเป็นบรรลุลดลงเมื่ออุณหภูมิเพิ่มขึ้น นอกจากนี้ประสิทธิภาพสัมพัทธ์ของการบวกนาตาไมซินได้รับผลกระทบจากอุณหภูมิการเก็บรักษา ที่ระดับอุณหภูมิ 4 ° C และ 15 ° C 10 ppm ก็เพียงพอที่จะมีการเจริญระยะลดลงตลอด 30 วันระยะเวลาการบ่มดิน เมื่ออุณหภูมิเพิ่มขึ้นถึง 25 ° C , ผลพลอยได้ของเชื้อรา 2 14 วันกับ 10 ppm นาตาไมซิน . ที่อุณหภูมิ 25 ° C , นาตาไมซินที่ความเข้มข้น 15 ppm หรือมากกว่าความจำเป็นเพื่อขัดขวางการเจริญเติบโตของเส้นใย . นาตาไมซินในโยเกิร์ตที่ความเข้มข้น 10 ppm สามารถลดการขยายตัวเมื่อเทียบกับโยเกิร์ตตัวอย่างเชื้อรารักษาด้วย 0 ส่วนในล้านส่วน หรือ 5 มิลลิกรัม นาตาไมซิน . อย่างไรก็ตาม การตอบสนองกับนาตาไมซินความเข้มข้น 15 และ 20 ppm ) มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเปรียบเทียบกับ 10 ppm นาตาไมซินความเข้มข้น 30 วันของความท้าทายการศึกษา fungicidalกิจกรรมที่พบในนาตาไมซินความเข้มข้นเกิน 5 วัน ตาย ของ ม. circinelloides อย่างรวดเร็วคือเพิ่มเติมที่ 15 ° C และ 25 ° C , แม้ว่านับในที่สุดลดลงไปด้านล่างขีด จำกัด ภายใต้เงื่อนไขระยะเวลาการตรวจสอบทั้งหมด นาตาไมซินความเข้มข้น 10 ppm ให้ประชากรลดลงระยะบ่มที่อุณหภูมิ 15 องศา C และ 25 ° C กู้ก่อนที่จะสิ้นสุดวันที่ 30 ระยะเวลาการบ่มดิน