To determine the assay’s limit of d

To determine the assay’s limit of detection (LOD),
10-fold serial dilutions of cloned DNA ranging
from100 pg/ml to 0.1 fg/ml were made and the assays were
carried out according to optimized protocols. The LOD of
the SEA and SEB assay was 0.5 fg of plasmid DNA (12
copies) per PCR reaction (Fig. 1). The electrochemical
signals obtained with 0.5 fg of plasmid DNA (23 replicates)
were significantly higher (p!0.001) than those obtained
with the negative controls (23 replicates) for both assays.
Regression analysis of electrochemical signals obtained
with the SEA and SEB assays showed a linear correlation
with DNA concentrations spanning seven orders of
magnitude (r
2
R93%) indicating the utility of the assays
as quantitative tests (Fig. 1).
When a 10-fold dilution series of S. aureus genomic DNA
was used, the LOD of each assay was 10 fg/ml (50 fg per PCR
reaction) or 16 copies of template. Each assay was tested by
colorimetric EIA detection and compared with the electrochemical
detection assay. Similar sensitivity levels were
obtained with the colorimetric assays (data not shown). Tests
with spiked DNA showed that addition of non-enterotoxigenic
staphylococcal DNA or human DNA to a cloned DNA
had no effect on the amplification and detection limits. This
indicates the absence of PCR inhibition and interference with
ELISA detection (data not shown) and that the performance
of our hand held electrochemical detection system was
comparable to the colorimetric PCR-EIA methods.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดขีดจำกัดของวิเคราะห์ตรวจ (ลอด),dilutions 10-fold อนุกรมของการโคลนดีเอ็นเอตั้งแต่from100 pg/ml ไป 0.1 ทำ fg/ml และ assaysดำเนินตามโปรโตคอลให้เหมาะ ลอดของทดสอบซีและ SEB ถูก 0.5 fg ของ plasmid DNA (12คัดลอก) ต่อปฏิกิริยา PCR (Fig. 1) การไฟฟ้ารับสัญญาณ ด้วย 0.5 fg ของ plasmid DNA (เหมือนกับ 23)ได้อย่างมีนัยสำคัญ (p ! 0.001) มากกว่าผู้รับมีค่าลบ (เหมือนกับ 23) การควบคุม assays ทั้งนั้นวิเคราะห์การถดถอยของสัญญาณไฟฟ้าที่ได้รับทะเลและ SEB assays แสดงให้เห็นความสัมพันธ์เชิงเส้นมีความเข้มข้นของดีเอ็นเอที่รัฐสั่ง 7ขนาด (r2R93%) ระบุของ assaysเป็นการทดสอบเชิงปริมาณ (Fig. 1)เมื่อชุดเจือจาง 10-fold S. หมอเทศข้างลาย genomic DNAถูกใช้ ลอดของวิเคราะห์แต่ละถูก fg 10 มล. (50 fg ต่อ PCRปฏิกิริยา) หรือ 16 สำเนาของแม่แบบ ทดสอบโดยการทดสอบแต่ละตรวจสอบ EIA เคียง และเปรียบเทียบกับการไฟฟ้าตรวจวิเคราะห์ ระดับความไวที่คล้ายกันได้รับกับ assays เคียง (ข้อมูลไม่แสดง) ทดสอบมี spiked ดีเอ็นเอที่แสดงให้เห็นว่าที่นี้ไม่ใช่ enterotoxigenicstaphylococcal ดีเอ็นเอหรือดีเอ็นเอมนุษย์กับดีเอ็นเอโคลนไม่มีผลต่อการจำกัดการขยายและตรวจสอบได้ นี้ระบุการขาดงานของ PCR ยับยั้งและรบกวนตรวจสอบ ELISA (ไม่แสดงข้อมูล) และประสิทธิภาพมือของเราจัดตรวจไฟฟ้า ระบบไม่เทียบได้กับวิธี PCR EIA เทียบเคียง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตรวจสอบการทดสอบขีด จำกัด ของการตรวจสอบ (LOD)
10 เท่าเจือจางอนุกรมดีเอ็นเอโคลนตั้งแต่
from100 pg / ml 0.1 FG / ml
ถูกสร้างขึ้นมาและการวิเคราะห์เป็นกลุ่มดำเนินการตามโปรโตคอลที่ดีที่สุด ล็อดของทะเลและ SEB ทดสอบ 0.5 FG พลาสมิดดีเอ็นเอ (12 เล่ม) ต่อปฏิกิริยา PCR (รูปที่ 1). แบบไฟฟ้าสัญญาณที่ได้รับ 0.5 FG ดีเอ็นเอพลาสมิด (23 ซ้ำ) อย่างมีนัยสำคัญที่สูงขึ้น (P! 0.001) มากกว่าที่ได้รับผู้ที่มีการควบคุมเชิงลบ(23 ซ้ำ) สำหรับการตรวจทั้งสอง. การวิเคราะห์การถดถอยของสัญญาณไฟฟ้าที่ได้รับกับทะเลและตรวจ SEB แสดงให้เห็นว่า ความสัมพันธ์เชิงเส้นที่มีความเข้มข้นดีเอ็นเอทอดเจ็ดคำสั่งของขนาด(R 2 r93%) แสดงให้เห็นประโยชน์ของการตรวจที่การทดสอบเชิงปริมาณ(รูปที่ 1).. เมื่อชุดเจือจาง 10 เท่าของเชื้อ S. aureus ดีเอ็นเอถูกนำมาใช้ล็อดของแต่ละการทดสอบคือ 10 FG / ml (50 FG ต่อ PCR ปฏิกิริยา) หรือ 16 สำเนาของแม่แบบ ทดสอบแต่ละคนได้รับการทดสอบโดยการตรวจสอบและประเมินผลกระทบสิ่งแวดล้อมสีเมื่อเทียบกับไฟฟ้าทดสอบการตรวจจับ ระดับความไวที่คล้ายกันได้ด้วยการตรวจสี (ไม่ได้แสดงข้อมูล) การทดสอบกับดีเอ็นเอถูกแทงแสดงให้เห็นว่านอกจากไม่ enterotoxigenic ดีเอ็นเอ staphylococcal หรือดีเอ็นเอของมนุษย์ที่จะดีเอ็นเอโคลนไม่มีผลกระทบต่อการขยายข้อจำกัด และการตรวจสอบ นี้แสดงให้เห็นตัวตนของการยับยั้ง PCR และการรบกวนกับการตรวจสอบวิธีELISA (ไม่ได้แสดงข้อมูล) และประสิทธิภาพการทำงานของมือของเราจัดระบบตรวจจับการไฟฟ้าก็เปรียบได้กับวิธีPCR-EIA สี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตรวจสอบวงเงินของการทดสอบของการตรวจสอบ ( LOD )
10 พับต่อเนื่องวิธีการโคลนดีเอ็นเอตั้งแต่
from100 pg / ml 0.1 fg / ml ได้และวิธี =
ดำเนินการตามกระบวนการปรับให้เหมาะสม LOD ของ
ทะเลและ Seb assay คือ 0.5 fg ของพลาสมิดดีเอ็นเอ ( 12
ชุด ) ต่อปฏิกิริยา PCR ( รูปที่ 1 ) สัญญาณไฟฟ้าเคมี
ได้ 0.5 FG ของพลาสมิดดีเอ็นเอ ( 23 นาที )
อย่างมีนัยสำคัญยิ่งทางสถิติ ( P ! 0.001 ) มากกว่าผู้ที่ได้รับ
กับการควบคุมเชิงลบ ( 23 นาที ) สำหรับทั้ง 2 วิธี .
การวิเคราะห์สัญญาณทางเคมีไฟฟ้าได้
กับทะเลและ Seb ) มีสหสัมพันธ์เชิงเส้นกับดีเอ็นเอเข้มข้น

ทอดคำสั่งของขนาดเจ็ด ( R
2
93 % ) แสดงประโยชน์ของ )
ทดสอบเชิงปริมาณ
( รูปที่ 1 )เมื่อเจือจาง 10 เท่าชุดของ S . aureus genomic DNA
ใช้ LOD ของแต่ละวิธีคือ 10 fg / มิลลิลิตร ( 50 FG ต่อปฏิกิริยา PCR
) หรือ 16 ชุดแม่แบบ ในแต่ละการทดสอบถูกทดสอบโดย
ตรวจสอบ EIA 7.4 และเมื่อเทียบกับการทดสอบการตรวจสอบออก

ระดับความไวใกล้เคียงกันได้ด้วยวิธี Colorimetric
( ข้อมูลไม่แสดง ) การทดสอบ
กับแหลมดีเอ็นเอพบว่านอกจากไม่ E
staphylococcal ดีเอ็นเอหรือดีเอ็นเอของมนุษย์โคลนดีเอ็นเอ
ไม่มีผลต่อการเพิ่มปริมาณและขอบเขตการตรวจสอบ นี้บ่งชี้ว่า ขาดการยับยั้ง

ELISA และ PCR รบกวนด้วยการตรวจจับ ( ข้อมูลไม่แสดง ) และการแสดง
มือของเราจัดระบบตรวจจับเคมีไฟฟ้าคือ
เมื่อเทียบกับวิธีการ pcr-eia 7.4 .