Two grams of fruit tissues were hom

Two grams of fruit tissues were homogenized in 10 mL of
100 mmol L
1 sodium phosphate buffer (pH 7.8) containing 5%
polyvinylpyrrolidone and 5 mmol L
1 1,4-dithiothreitol at 4 C. The
homogenate was centrifuged at 10,000  g for 15 min at 4 C, and
then the supernatant was collected for SOD activity assay as
described by Yang et al. (2009) with some modification. The
reaction medium contained 1.7 mL of 50 mmol L
1 sodium
phosphate buffer (pH 7.8), 0.3 mL of 130 mmol L
1 methionine,
0.3 mL of 100mmol L
1 EDTA-Na, 0.3 mL of 750mmol L
1 nitroblue-tetrazolium
(NBT), 0.3 mL of 20mmol L
1 riboflavin, and
25mL of enzyme extract. The reaction was initiated by switching
on the light consisting of two 4000 lx fluorescent lamps; after
25 min, the light was turned off, and the absorbance at 560 nm was
recorded. One unit of SOD activity was defined as the amount of
62 H. Chen et al. / Postharvest Biology and Technology 108 (2015) 61–67
enzyme that caused a 50% inhibition of NBT. Results were
expressed as units of SOD per kilogram of fresh weight.
For CAT activity assay, two grams of fruit tissues were treated
with liquid nitrogen, pulverized and extracted in 10 mL of
100 mmol L
1 Tris–HCl buffer (pH 7.8) containing 2 mmol L
1
EDTA-Na and 5 mmol L
1 1,4-dithiothreitol. The enzyme extract
was obtained by centrifugation at 12,000  g for 10 min (4 C). CAT
activity was determined according to the method of Hu et al.
(2014) with slight modifications. The reaction mixture consisted of
3 mL of 100 mmol L
1 Tris–HCl buffer (pH 7.8), 0.1 mL of 0.75% H2O2
and 0.2 mL of crude enzyme extract. H2O2 decomposition was
measured by the decline in absorbance at 240 nm. One unit of CAT
activity was defined as 0.01 change of absorbance at 240 nm per
minute. Specific CAT activity was expressed as units per kilogram
of fresh fruit weight.
For POD activity assay, two grams of fruit tissues were treated
with liquid nitrogen, pulverized and extracted in 10 mL of
200 mmol L
1 sodium phosphate buffer (pH 6.8) containing 8%
polyvinylpyrrolidone. The crude enzyme extract was obtained by
centrifugation at 8000  g for 20 min (4 C). POD activity was
determined according to the method of Yang et al. (2009) with
some modifications. The reaction mixture consisted of 0.3 mL of
6 mmol L
1 guaiacol, 1.7 mL of 5 mmol L
1 H2O2, and 1 mL of crude
enzyme extract. Increases in absorbance at 470 nm at intervals of
30 s were recorded spectrophotometrically. One unit of POD
activity was defined as 0.01 change of absorbance at 470 nm per
min. Specific POD activity was expressed as units per kilogram of
fresh fruit weight.
For As-POD activity assay, two grams of fruit tissues were
treated with liquid nitrogen, pulverized and extracted in 10 mL of
50 mmol L
1 sodium phosphate buffer (pH 7.0). The crude enzyme
extract was obtained by centrifugation at 12,000  g for 15 min
(4 C). As-POD activity was determined according to the method of
Yang et al. (2009) with slight modifications. The reaction mixture
consisted of 1.5 mL of 0.1875 mmol L
1 EDTA-Na, 1 mL of 1.5 mmol
L
1 ascorbic acid, 50mL of 0.3mmol L
1 H2O2, and 200mL of
enzyme extract. The reaction was initiated by adding H2O2 and the
change of absorbance at 290 nm was recorded. One unit of As-POD
activity was defined as the amount of enzyme that oxidized
1 mmol of ascorbic acid in one minute. Specific As-POD activity
was expressed as units per kilogram of fresh fruit weight.
2

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สองกรัมของเนื้อเยื่อผลไม้ถูก homogenized เป็นกลุ่มใน 10 mL ของ100 mmol L 1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.8) ที่มี 5%polyvinylpyrrolidone และ 5 mmol L 1 1,4-dithiothreitol ที่ค. 4 แบบhomogenate ถูก centrifuged ที่ g 10000 สำหรับ 15 นาทีที่ 4 C และแล้ว supernatant ถูกเก็บรวบรวมการวิเคราะห์กิจกรรมสดเป็นอธิบายโดย Yang et al. (2009) มีการปรับเปลี่ยนบาง ที่ปฏิกิริยาปานกลางอยู่ 1.7 mL ของ 50 mmol โซเดียม L 1ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.8), 0.3 mL ของ 130 mmol L 1 methionineของ 100mmol L 1 EDTA-นา 0.3 mL ของ 750mmol L 1 nitroblue-tetrazolium 0.3 mL(เอ็นบีที), 0.3 mL ของ 20mmol L 1 ไรโบเฟลวิน และสารสกัดจากเอนไซม์ 25mL เริ่มปฏิกิริยา โดยการสลับไฟประกอบด้วยสอง 4000 lx ฟลูออเรสเซนต์ หลังจาก25 นาที เปิดปิด ไฟ และ absorbance ที่ 560 nm มีบันทึก หนึ่งหน่วยกิจกรรมสดถูกกำหนดเป็นจำนวนAl. ร้อยเอ็ดเฉิน H. 62 / หลังการเก็บเกี่ยววิชาชีววิทยาและเทคโนโลยี 108 (2015) 61-67เอนไซม์ที่ทำให้เกิดการยับยั้งเอ็นบีที 50% ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นหน่วยของสดต่อกิโลกรัมของน้ำหนักสดสำหรับแมวกิจกรรมวิเคราะห์ สองกรัมของเนื้อเยื่อของผลไม้ได้รับการรักษาด้วยไนโตรเจนเหลว คลุก และแยกใน 10 mL ของ100 mmol L 1 ตรี – HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.8) มี 2 mmol L 1นา EDTA และ 5 mmol L 1 1,4-dithiothreitol สารสกัดจากเอนไซม์กล่าว โดย centrifugation ที่ g 12000 สำหรับ 10 นาที (4 C) แมวกำหนดกิจกรรมตามวิธีการของ Hu et al(2014) มีปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ประกอบด้วยส่วนผสมของปฏิกิริยา3 mL 100 mmol L 1 ตรี – HCl บัฟเฟอร์ (pH 7.8), 0.1 mL ของ 0.75% H2O2และ 0.2 mL ของเอนไซม์ดิบแยก ถูกแยกส่วนประกอบของ H2O2วัด โดยการลดลงของ absorbance ที่ 240 nm หน่วยหนึ่งของแมวกิจกรรมถูกกำหนดให้เป็นการเปลี่ยนแปลง absorbance ที่ 240 0.01 nm ต่อนาที กิจกรรมแมวถูกแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลไม้สำหรับ POD กิจกรรมวิเคราะห์ สองกรัมของเนื้อเยื่อของผลไม้ได้รับการรักษาด้วยไนโตรเจนเหลว คลุก และแยกใน 10 mL ของ200 L 1 mmol โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.8) มี 8%polyvinylpyrrolidone สารสกัดจากเอนไซม์ดิบกล่าวโดยcentrifugation ที่ g 8000 สำหรับ 20 นาที (4 C) มีกิจกรรมเท่านั้นกำหนดตามวิธีการของ Yang et al. (2009) ด้วยปรับเปลี่ยนบางอย่าง ประกอบด้วยส่วนผสมของปฏิกิริยา 0.3 mL ของguaiacol mmol L 1 6, 1.7 mL ของ 5 mmol L 1 H2O2 และ 1 mL ของดิบสารสกัดจากเอนไซม์ เพิ่ม absorbance ที่ 470 nm ในช่วงของ30 ได้รับการบันทึก s spectrophotometrically หนึ่งหน่วยเท่านั้นกิจกรรมถูกกำหนดให้เป็นการเปลี่ยนแปลง absorbance ที่ 470 0.01 nm ต่อลดกิจกรรมเฉพาะฝักที่แสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมน้ำหนักผลไม้การวิเคราะห์กิจกรรมเป็น POD สองกรัมของเนื้อเยื่อของผลไม้ได้รักษา ด้วยไนโตรเจนเหลว คลุก และสกัดใน 10 mL ของL 1 50 mmol โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) เอนไซม์ดิบสารสกัดได้รับ โดย centrifugation ที่ g 12000 สำหรับ 15 นาที(4 C) กำหนดตามวิธีการของกิจกรรมเป็นฝักยาง et al. (2009) มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ส่วนผสมของปฏิกิริยาประกอบด้วย 1.5 mL ของ 0.1875 mmol EDTA 1 L-นา 1 mL ของ 1.5 mmolกรดแอสคอร์บิค L 1, 50mL ของ 0.3mmol L 1 H2O2 และ 200 mL ของสารสกัดจากเอนไซม์ เริ่มปฏิกิริยา โดยเพิ่ม H2O2 และเปลี่ยนแปลง absorbance ที่ 290 nm ถูกบันทึก หนึ่งหน่วยเป็นฝักกิจกรรมถูกกำหนดเป็นจำนวนเอนไซม์ที่ออกซิไดซ์mmol 1 ของกรดแอสคอร์บิคในหนึ่งนาที กิจกรรมเฉพาะเป็น-PODถูกแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลไม้2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สองกรัมของเนื้อเยื่อผลไม้ปั่นใน 10 มิลลิลิตร
100 มิลลิโมล L 1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.8) ที่มี 5%
polyvinylpyrrolidone และ 5 มิลลิโมล L 1 1,4-dithiothreitol ที่ 4 องศาเซลเซียส
homogenate ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 10,000? กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4
องศาเซลเซียสและจากนั้นใสที่ถูกเก็บไว้สำหรับการทดสอบกิจกรรมSOD
เป็นอธิบายโดยYang et al, (2009) ที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง
กลางปฏิกิริยาที่มีอยู่ 1.7 มิลลิลิตร 50 มิลลิโมล L 1
โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์(pH 7.8) 0.3 มิลลิลิตร 130 มิลลิโมล L 1 methionine,
0.3 มิลลิลิตร 100mmol L 1 EDTA-Na, 0.3 มิลลิลิตร 750mmol L 1 nitroblue- tetrazolium
(NBT) 0.3 มิลลิลิตร 20mmol L 1 riboflavin และ
25ml ของสารสกัดเอนไซม์ ปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเปลี่ยนไฟประกอบด้วยสอง 4000 LX หลอด;
หลังจาก
25 นาทีไฟถูกปิดและการดูดกลืนแสงที่ 560
นาโนเมตรที่ถูกบันทึกไว้ หนึ่งหน่วยของกิจกรรม SOD ถูกกำหนดเป็นจำนวน
62 เอชเฉินและอัล / หลังการเก็บเกี่ยวชีววิทยาและเทคโนโลยี 108 (2015) 61-67
เอนไซม์ที่ก่อให้เกิดการยับยั้ง 50% ของ NBT ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นหน่วยงานของ SOD ต่อกิโลกรัมของน้ำหนักสด. สำหรับการทดสอบกิจกรรม CAT สองกรัมของเนื้อเยื่อผลไม้ที่ได้รับการรักษาด้วยไนโตรเจนเหลวแหลกลาญและสกัดใน10 มิลลิลิตร100 มิลลิโมล L 1 บัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH 7.8) ที่มี 2 มิลลิโมล L 1 EDTA นาและ 5 มิลลิโมล L 1 1,4-dithiothreitol สารสกัดจากเอนไซม์ที่ได้รับจากการหมุนเหวี่ยงที่ 12,000? กรัมเป็นเวลา 10 นาที (4 C) กสท. กิจกรรมที่ถูกกำหนดตามวิธีการของ Hu et al,. (2014) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย3 มิลลิลิตร 100 มิลลิโมล L 1 บัฟเฟอร์ Tris-HCl (pH 7.8) 0.1 มิลลิลิตร H2O2 0.75% และ 0.2 มิลลิลิตรของสารสกัดเอนไซม์ การสลายตัว H2O2 ถูกวัดจากการลดลงของการดูดกลืนแสงที่240 นาโนเมตร หนึ่งหน่วยของกสท. กิจกรรมถูกกำหนดเป็น 0.01 การเปลี่ยนแปลงของการดูดกลืนแสงที่ 240 นาโนเมตรต่อนาที กิจกรรม CAT เฉพาะได้รับการแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลไม้สด. สำหรับการทดสอบกิจกรรม POD สองกรัมของเนื้อเยื่อผลไม้ที่ได้รับการรักษาด้วยไนโตรเจนเหลวแหลกลาญและสกัดใน10 มิลลิลิตร200 มิลลิโมล L 1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 6.8) ที่มี 8% polyvinylpyrrolidone สารสกัดจากเอนไซม์ดิบที่ได้รับจากการหมุนเหวี่ยงที่ 8000? กรัมเป็นเวลา 20 นาที (4 C) กิจกรรม POD ถูกกำหนดตามวิธีการของยางและอัล (2009) ที่มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย 0.3 มิลลิลิตร6 มิลลิโมล L 1 guaiacol 1.7 มิลลิลิตร 5 มิลลิโมล L 1 H2O2 และ 1 มิลลิลิตรน้ำมันดิบสารสกัดเอนไซม์ การเพิ่มขึ้นของการดูดกลืนแสงที่ 470 นาโนเมตรในช่วงเวลา30 วินาทีที่ถูกบันทึกไว้ spectrophotometrically หนึ่งหน่วยของ POD กิจกรรมถูกกำหนดเป็น 0.01 การเปลี่ยนแปลงของการดูดกลืนแสงที่ 470 นาโนเมตรต่อนาที กิจกรรม POD เฉพาะได้รับการแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลไม้สด. สำหรับการทดสอบกิจกรรม As-POD สองกรัมของเนื้อเยื่อผลไม้ที่ได้รับการรักษาด้วยไนโตรเจนเหลวแหลกลาญและสกัด10 มล50 มิลลิโมล L 1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0 ) เอนไซม์ดิบสารสกัดที่ได้จากการหมุนเหวี่ยงที่ 12,000? กรัมเป็นเวลา 15 นาที(4 C) ในฐานะที่เป็นรุนกิจกรรมที่ถูกกำหนดตามวิธีการของยาง et al, (2009) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ผสมปฏิกิริยาประกอบด้วย 1.5 มิลลิลิตร 0.1875 มิลลิโมล L 1 EDTA-Na, 1 มิลลิลิตร 1.5 มิลลิโมล L 1 วิตามินซี 50mL ของ 0.3mmol L 1 H2O2 และ 200mL ของสารสกัดจากเอนไซม์ ปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเพิ่ม H2O2 และการเปลี่ยนแปลงของการดูดกลืนแสงที่290 นาโนเมตรได้รับการบันทึก หนึ่งหน่วยของ As-POD กิจกรรมถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ออกซิไดซ์1 มิลลิโมลของกรดวิตามินซีในหนึ่งนาที ในฐานะที่เป็นกิจกรรมเฉพาะรุนถูกแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลไม้สด. 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สองกรัมของผลไม้บดเนื้อเยื่อมี 10 ml
100 mmol l
1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.8 ) ที่ประกอบด้วยพอลิวินิลไพร์โรลิโดน 5 %
5 mmol l
1 1,4-dithiothreitol 4 C .
แยกเป็นระดับ 10 , 000  G สำหรับ 15 นาทีที่ 4 C ,
จากนั้นนำรวบรวมเพื่อสดกิจกรรมการทดสอบเป็น
อธิบายโดยหยาง et al . ( 2009 ) มีการปรับเปลี่ยน
ปฏิกิริยาปานกลาง ประกอบด้วย 1 .7 ml 50 mmol l

1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.8 ) , 0.3 มล. 130 mmol l

0.3 มิลลิลิตร 1 , เมทไธโอนีน 100mmol ผม
1 EDTA na , 0.3 มล. 750mmol ผม
1 nitroblue tetrazolium
( NBT ) , 0.3 มล. 20mmol ผม
1 วิตามินบี2 และ
รอบเอนไซม์สกัดเข้มข้น ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดยการสลับ
เปิดไฟประกอบด้วยสอง 4000 LX หลอด ; หลังจาก
25 นาที ไฟปิดและค่าการดูดกลืนแสงที่ 560 นาโนเมตรเท่ากับ
บันทึก หน่วยหนึ่งของกิจกรรมสดถูกกำหนดไว้เป็นจํานวน
62 H . Chen et al . ชีววิทยาและเทคโนโลยีหลังการเก็บเกี่ยว / 108 ( 2015 ) 61 - 67
เอนไซม์ที่ทำให้ 50% inhibition NBT . ผลลัพธ์ที่ได้แสดงออกมาเป็นหน่วยของ sod
ต่อกิโลกรัมของน้ำหนักสด .
สำหรับแมวกิจกรรมการทดสอบสองกรัมเนื้อเยื่อไม้ได้รับการรักษา
ด้วยไนโตรเจนเหลวบดและสกัด 10 มล.
L
1 ต่อ 100 มิลลิโมลและ HCl บัฟเฟอร์ pH 7.8 ) ประกอบด้วย 2 mmol l
1
5 mmol l EDTA และ
1 1,4-dithiothreitol . เอนไซม์ที่สกัดได้มาจาก 3
ที่ 12 , 000  กรัมเป็นเวลา 10 นาที ( 4 องศาเซลเซียส ) กิจกรรมแมว
ถูกกำหนดตามวิธีการของ Hu et al .
( 2014 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ปฏิกิริยาผสมประกอบด้วย
3 ml 100 mmol l
1 บริษัท– HCl บัฟเฟอร์ pH 7.8 ) , 0.1 มล.
H2O2 0.75% และ 0.2 มิลลิลิตรเอนไซม์สกัดเข้มข้น H2O2 สลายตัว
วัดโดยลดลงในการดูดกลืนแสงที่ 240 nm . หน่วยหนึ่งของกิจกรรมแมว
ถูกกำหนดไว้เป็น 0.01 เปลี่ยนของการดูดกลืนแสงที่ 240 nm /
1 นาที กิจกรรมเฉพาะแมวจะแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลสด
.
สำหรับกิจกรรมในฝัก ,สองกรัมของผลไม้ได้รับการรักษาเนื้อเยื่อ
ด้วยไนโตรเจนเหลว บดและสกัด 10 มล.
200 mmol l
1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.8 ) ที่มี 8 %
พอลิวินิลไพร์โรลิโดน . เอนไซม์ที่สกัดได้จาก
3 8 , 000  G 20 นาที ( 4 องศาเซลเซียส ) กิจกรรมฝักถูก
พิจารณาตามวิธีการของหยาง et al . ( 2009 ) กับ
ปรับเปลี่ยนบาง .ปฏิกิริยาผสมจำนวน 0.3 มล.
6 mmol l
1 ได , 1.7 มล. 5 mmol l
1 แบตเตอรี่ และ 1 ml สารสกัดเอนไซม์ดิบ

เพิ่มขึ้นในการดูดกลืนแสงที่ 470 nm ในช่วงเวลาของ
30 s บันทึกนี้ . หน่วยหนึ่งของกิจกรรมฝัก
ถูกกำหนดไว้เป็น 0.01 เปลี่ยนของการดูดกลืนแสงที่ 470 nm /
นาทีเฉพาะฝักกิจกรรมจะแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลสด

.เป็นกิจกรรมที่ใช้ฝักสองกรัมเนื้อเยื่อผล
รักษาด้วยไนโตรเจนเหลว , บดและสกัด 10 มล.
50 mmol l
1 โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) เอนไซม์ที่สกัดได้จาก 3
ที่ 12 , 000  G 15 นาที
4 C ) เป็นกิจกรรมฝักถูกกำหนดตามวิธีการของ
หยาง et al . ( 2009 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย ปฏิกิริยาผสม
จำนวน 1.5 มิลลิลิตร 0.1875 mmol l
1 EDTA na 1 มิลลิลิตร 1.5 mmol
L
1 กรดแอสคอร์บิค , 50ml ของ 0.3mmol ผม
1 แบตเตอรี่และ 200ml ของ
เอนไซม์สกัดเข้มข้น ปฏิกิริยาที่ถูกริเริ่มโดยการเพิ่มแบตเตอรี่และ
เปลี่ยนการดูดกลืนแสงที่ 290 nm จะถูกบันทึก หน่วยหนึ่งของกิจกรรมฝัก
ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ออกซิไดซ์
1 มิลลิโมลของกรดแอสคอร์บิค ใน 1 นาที ที่เฉพาะเจาะจงเป็นฝักกิจกรรม
จะแสดงเป็นหน่วยต่อกิโลกรัมของน้ำหนักผลสด .
2