An analytical methodology based on

An analytical methodology based on cloud point extraction (CPE) coupled to Ultra-Fast Liquid Chromatography and electrospray tandem mass spectrometry (UFLC-MS/MS) was developed for analysis of Abacavir (ABC), Efavirenz (EFV), Lamivudine (3 TC) and Nelfinavir (NFV) in human plasma. It is the first time that CPE was used for extraction of antiretrovirals (ARV) from plasma. The effects of relevant physic-chemical variables on analytical response of each ARV, including pH, surfactant concentration, equilibration time and temperature, were study and optimized; as well as its coupling to UFLC-ESI-MS/MS. Under optimized conditions, the resulting methodology was as follows: a 500 μL aliquot of human plasma was diluted with 2 mL deionized water in a 10 mL centrifuge tube. A 500 μL aliquot Triton X-114 5% w/v was added and homogenized using a vortex stirrer. The resulting cloudy solution was kept at 65 °C for 20 min for promoting the condensation of surfactant micelles. Then it was centrifuged at 3000 × g for 5 min for separation of the surfactant-rich phase. After discarding the aqueous supernatant, 400 μL ACN were added to the remaining surfactant rich phase and centrifuged in order to precipitate proteins and separate them. A 150 μL aliquot of the supernatant was transferred to 2 mL vial and further diluted with 400 μL deionized water. A 30 μL aliquot of the so-prepared solution was injected and analyzed into the UFLC-MS/MS. The method detection limits for ABC, EFV, 3 TC and NFV under optimized conditions were 31, 77, 57 and 21 ng mL−1, respectively. The RSD% for the studied analytes were

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธีการวิเคราะห์ตามสกัดจุด (CPE) เมฆประกอบ Ultra-Fast เหลว Chromatography และมิกส์ควบคู่โตรเมทรี (UFLC-MS/MS) พัฒนาขึ้นสำหรับการวิเคราะห์ของ Lamivudine อะบาคาเวียร์ (ABC), อีฟาวิเรนซ์ (EFV), (3 TC) และเนลฟินาเวียร์ (NFV) ในพลาสมา มันเป็นครั้งแรกที่ใช้ CPE สำหรับ antiretrovirals (ARV) สกัดจากพลาสม่า ได้ศึกษาผลของตัวแปรที่เกี่ยวข้องกับฟิสิกส์เคมีวิเคราะห์การตอบสนองของแต่ละ ARV ค่า pH ความเข้มข้นของ surfactant ที่ เวลา equilibration และ อุณหภูมิ และ เหมาะ เช่นเดียวกับการต่อกับ UFLC-ESI-MS/MS ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม วิธีการผลลัพธ์เป็น: ส่วนลงตัว 500 μL พลาสมาถูกเจือจาง ด้วยน้ำจุ 2 มล.ในหลอดหมุนเหวี่ยง 10 mL การ 500 μL ทั้งไทรทัน X-114 5% w/v เพิ่ม และ homogenized ใช้ช้อนคนวอร์เท็กซ์เป็น โซลูชันเมฆได้ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 65 ° C สำหรับการส่งเสริมการรวมตัวของ micelles surfactant ที่ 20 นาที แล้ว มันถูกเหวี่ยงที่ 3000 × g 5 นาทีสำหรับการแยกเฟส surfactant ที่อุดมไปด้วย หลังจากทิ้ง supernatant ละลาย 400 μL ACN เพิ่มระยะรวย surfactant ที่เหลือ และเหวี่ยงเพื่อตกตะกอนโปรตีน และแยก ส่วนลงตัว 150 μL ของ supernatant ถูกย้ายไป 2 mL ขวด และเติม ผสมน้ำ μL จุ 400 ส่วนลงตัว 30 μL ของโซลูชันการเตรียมเพื่อฉีด และวิเคราะห์เป็น UFLC-MS/MS ข้อจำกัดของการตรวจจับวิธี ABC, EFV, 3 TC และ NFV ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม mL−1 ฉบับ 31, 77, 57 และ 21 ตามลำดับ % RSD สำหรับวิเคราะห์ศึกษา < 15% ยกเว้นในของ LOQ ซึ่งถูก < 19% กู้คืนค่าที่อยู่ในช่วงจาก 81% 107 มีวิธีการนำเสนอนำไปใช้สำหรับการวิเคราะห์ของ ABC, EFV, 3 TC และ NFV ในพลาสมาภายในช่วงความเข้มข้นของ 43-6816, 125-4992, 81-3248 และ mL−1 ฉบับ 49-7904 ตามลำดับ ภายใต้เงื่อนไขการทำงานที่เหมาะสม วิธีวิเคราะห์เสนอต่อมาตรฐานแนวทางระหว่างประเทศ ซึ่งทำให้เหมาะสำหรับการสี่ ARV เช่นเรื่อง pharmacokinetic สำหรับตรวจสอบรักษาของผู้ป่วยเอชไอวี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการวิเคราะห์บนพื้นฐานของการสกัดเมฆจุด (CPE) คู่กับ Liquid Chromatography รวดเร็วและ electrospray ตีคู่มวลสาร (UFLC-MS / MS) ได้รับการพัฒนาสำหรับการวิเคราะห์ abacavir (ABC), Efavirenz (EFV) Lamivudine (3 TC) และ nelfinavir (NFV) พลาสม่าในมนุษย์ มันเป็นครั้งแรกที่ CPE ที่ถูกใช้ในการสกัดยาต้านไวรัส (ARV) จากพลาสม่า ผลของตัวแปรฟิสิกส์เคมีที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองการวิเคราะห์ของแต่ละยาต้านไวรัสรวมทั้งค่า pH ความเข้มข้นลดแรงตึงผิวเวลาสมดุลและอุณหภูมิมีการศึกษาและเพิ่มประสิทธิภาพ; เช่นเดียวกับการมีเพศสัมพันธ์ในการ UFLC-ESI-MS / MS ภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุดวิธีการที่เกิดขึ้นเป็นดังนี้หาร 500 ไมโครลิตรของพลาสม่าของมนุษย์ถูกเจือจางด้วย 2 มล deionized น้ำในหลอด centrifuge 10 มล 500 ไมโครลิตรหาร Triton X-114 5% w / v ถูกบันทึกและหดหายใช้กวนน้ำวน วิธีการแก้ปัญหาที่เกิดเมฆถูกเก็บไว้ที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาทีในการส่งเสริมการรวมตัวของไมเซลล์ลดแรงตึงผิว จากนั้นก็จะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 3000 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาทีสำหรับการแยกเฟสลดแรงตึงผิวที่อุดมไปด้วย หลังจากทิ้งสารละลายน้ำ 400 ไมโครลิตร ACN ถูกเพิ่มเข้าไปในขั้นตอนการลดแรงตึงผิวที่อุดมไปด้วยที่เหลืออยู่และหมุนเหวี่ยงเพื่อให้เกิดการตกตะกอนโปรตีนและแยกพวกเขา หาร 150 ไมโครลิตรของสารละลายถูกย้ายไป 2 มิลลิลิตรขวดและปรับลดต่อไปด้วย 400 ไมโครลิตรน้ำปราศจากไอออน หาร 30 ไมโครลิตรของการแก้ปัญหาเพื่อเตรียมฉีดและวิเคราะห์ลงใน UFLC-MS / MS ขีด จำกัด ของการตรวจสอบวิธีการ ABC, EFV 3 TC และ NFV ภายใต้เงื่อนไขที่ดีที่สุดอยู่ที่ 31, 77, 57 และ 21 NG ML-1 ตามลำดับ RSD% สำหรับการวิเคราะห์การศึกษาได้ <15% ยกเว้นที่ LOQ ซึ่งเป็น <19% การกู้คืนค่าอยู่ในช่วง 81-107% วิธีการที่นำเสนอถูกนำมาใช้ประสบความสำเร็จสำหรับการวิเคราะห์ของเอบีซี EFV 3 TC และ NFV ในพลาสม่าของมนุษย์อยู่ในช่วงความเข้มข้นของ 43-6816, 125-4992, 81-3248 และ 49-7904 NG ML-1 ตามลำดับ ภายใต้สภาพการทำงานที่ดีที่สุดวิธีการวิเคราะห์ที่นำเสนอมาตรฐานตรงตามความต้องการของแนวทางระหว่างประเทศซึ่งจะทำให้มันเหมาะสำหรับการศึกษาเภสัชจลนศาสตร์ของสี่ยาต้านไวรัสเช่นเดียวกับการตรวจสอบการรักษาของผู้ป่วยเอชไอวี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการวิเคราะห์โดยการสกัดจุดเมฆ ( CPE ) คู่กับ อัลตร้า วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวอย่างรวดเร็วและวิธีพ่นละอองไฟฟ้าตีคู่มวลสาร ( uflc-ms / MS ) ถูกพัฒนาขึ้นสำหรับการวิเคราะห์ของกีตาร์ ( ABC ) , ยา ( efv ) , ลามิวูดีน ( TC ) และเนลฟินาเวียร์ ( nfv ) ในพลาสมาของมนุษย์ มันเป็นครั้งแรกที่ใช้ในการสกัด CPE ยาต้านไวรัส ( ARV ) จากพลาสมา ผลของตัวแปรต่อการตอบสนองทางเคมีกับฟิสิกส์ของแต่ละยาต้านไวรัส ได้แก่ pH , ความเข้มข้นของสารลดแรงตึงผิวที่ใช้ เวลา equilibration และอุณหภูมิ ศึกษาและปรับให้เหมาะสม ; รวมทั้งควบคู่กับ uflc-esi-ms / คุณภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะ ซึ่งวิธีการมีดังนี้ : 500 μ L ส่วนลงตัวของพลาสมาถูกเจือจางด้วย 2 ml คล้ายเนื้อเยื่อประสานน้ำ 10 ml centrifuge หลอด 500 μ L ส่วนลงตัว ไทรทัน x-114 5% w / v และใช้เป็นโฮโมน้ำวนหมุน . เมฆโซลูชั่นซึ่งถูกเก็บไว้ที่ 65 องศา C เป็นเวลา 20 นาทีเพื่อส่งเสริมการควบแน่นของผิวมั . มันเป็นระดับที่ 3000 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาทีสำหรับการแยกเฟสรวยสารลดแรงตึงผิว หลังจากทิ้งนำน้ำ 400 ลิตรμ ACN เป็นเพิ่มสารลดแรงตึงผิวที่เหลือรวยเฟสไฟฟ้าในการตกตะกอนโปรตีนและแยกพวกเขา 150 μ L ส่วนลงตัวของน่าน ถูกย้ายไป 2 ml ขวดเล็กและอีก 400 μผมคล้ายเนื้อเยื่อประสานเจือจางด้วยน้ำ 30 μ L ส่วนลงตัวของเพื่อเตรียมสารละลายที่ฉีดและวิเคราะห์ใน uflc-ms / คุณ วิธีการตรวจสอบข้อ จำกัด สำหรับ ABC , efv 3 TC และภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม nfv 31 , 77 , 57 และ 21 ของ− 1 มิลลิลิตร ตามลำดับ การพิจารณาศึกษากรณี % สำหรับ ( < 15% ยกเว้นที่ loq ซึ่งเป็น < 19 % ค่าการกู้คืนระหว่าง 81 107 ล้านบาท วิธีการที่เสนอสามารถนำมาประยุกต์ ใช้ในการวิเคราะห์ ABC , efv 3 TC และ nfv ความเข้มข้นในพลาสมาภายในช่วง 43 – 6816 125 – 4992 81 – 3000 49 – 7904 ของ− 1 มิลลิลิตร ตามลำดับ ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสมเสนอวิธีการวิเคราะห์ตามความต้องการมาตรฐานหลักสากล ซึ่งทำให้มันเหมาะสำหรับเภสัชจลนพลศาสตร์ของสี่ยา รวมทั้งการติดตามการรักษาของผู้ป่วยเอดส์