Mouse Model of Human SCDTransgenic

Mouse Model of Human SCD
Transgenic sickle mice (Sickle) with knockout of all mouse hemoglobin genes and insertion of a transgene that expresses human α- and β HbS were developed at Lawrence Berkeley National Laboratory [17]. Sickle mice were obtained by interbreeding sickle cell males with hemizygous (Hemi) females in-house. Breeding pairs for Sickle mice (strain number 3342) and wild type (WT) mice were obtained from Jackson Laboratory. Genotyping was performed by Transnetyx, Inc. Because C57BL/6 is one of the background strains for the transgenic sickle mice, C57BL/6 was chosen as WT control. Additional control animals were Hemi littermates, which have anemia but no sickle deformation [18]. Male mice used in experiments were 7–9 months old. Mice were pathogen free and received routine NIH rodent chow and water. Testes and blood were collected between 8 am and 11 am from anesthetized mice. Blood was obtained by cardiac puncture using 1 ml TB syringe with sterile 26Gx3/8 needle and collected into eppendorf tubes. Although we did not measure fetal Hb or erythrocyte sickling in Sickle mice, we did confirm their phenotype after euthanasia by their extremely big spleens [17].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

รูปแบบเมาส์ SCD มนุษย์หนูถั่วเหลืองเคียว (เคียว) ของยีนฮีโมโกลบินเมาส์ทั้งหมดและแทรก transgene ที่แสดงมนุษย์ด้วยกองทัพและβ HbS ถูกพัฒนาที่ลอว์เรนซ์เบิร์กลีย์ชาติปฏิบัติ [17] หนูเคียวได้รับ โดย interbreeding เคียวเซลล์ชายกับหญิง hemizygous (ซีก) ในบ้าน คู่ผสมพันธุ์หนูเคียว (ต้องใช้หมายเลข 3342) และชนิดป่า (WT) หนูได้รับจากห้องปฏิบัติการ Jackson Genotyping ทำ โดย Transnetyx, inc เพราะ C57BL/6 เป็นหนึ่งในสายพันธุ์พื้นหลังสำหรับหนูเคียวถั่วเหลือง C57BL/6 ได้รับเลือกเป็นตัวควบคุม WT ควบคุมสัตว์ได้ซีก littermates ซึ่งมีโรคโลหิตจางแต่ไม่มีแมพเคียว [18] ชายหนูที่ใช้ทดลองมีอายุ 7 – 9 เดือน หนูมีการศึกษาฟรี และรับงานประจำ NIH rodent เชาและน้ำ ลิ้มลองและเลือดถูกรวบรวมระหว่าง 08.00 น.และ 11.00 น.จากหนูด้วย เลือดได้ โดยหัวใจเจาะด้วยเข็มฉีดยา 1 ml TB ใส่ 26Gx3/8 เข็ม และถูกเก็บไว้ในท่อ eppendorf ถึงแม้ว่าเราไม่ได้วัดครรภ์ Hb หรือ sickling ในหนูเคียวของเม็ดเลือดแดง เราไม่ยืนยัน phenotype ของพวกเขาหลังจากการุณยฆาตได้ โดย spleens ของพวกเขาอย่างยิ่งใหญ่ [17]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เมาส์รุ่น SCD มนุษย์
ยีนหนูเคียว (เคียว) กับสิ่งที่น่าพิศวงของยีนฮีโมโกลเมาส์และการแทรกของยีนที่แสดงออกของมนุษย์และα-β HBS ได้รับการพัฒนาที่อเรนซ์เบิร์กลีย์ห้องปฏิบัติการแห่งชาติ [17] หนูเคียวได้จากการผสมข้ามพันธุ์เพศเซลล์เคียวกับ hemizygous (ครึ่ง) หญิงในบ้าน คู่ผสมพันธุ์หนูเคียว (หมายเลข 3342 สายพันธุ์) และประเภทป่า (น้ำหนัก) หนูที่ได้รับจากห้องปฏิบัติการแจ็คสัน genotyping ได้ดำเนินการโดย Transnetyx, Inc เพราะ C57BL / 6 เป็นหนึ่งในสายพันธุ์พื้นหลังสำหรับหนูเคียวพันธุ์, C57BL / 6 ได้รับเลือกให้เป็นตัวควบคุมน้ำหนัก สัตว์ควบคุมเพิ่มเติมได้ littermates ครึ่งที่มีภาวะโลหิตจาง แต่ยังไม่มีการเปลี่ยนรูปเคียว [18] หนูชายใช้ในการทดลองได้ 7-9 เดือน หนูเป็นอิสระและได้รับเชื้อโรคประจำหนู NIH โจวเหวินและน้ำ อัณฑะและเลือดที่ถูกเก็บรวบรวม 08:00-11:00 จากหนูดมยาสลบ เลือดที่ได้จากการเจาะการเต้นของหัวใจโดยใช้เข็มฉีดยาวัณโรค 1 มล. ที่มีการฆ่าเชื้อ 26Gx3 / 8 เข็มและเก็บเข้าหลอด Eppendorf ถึงแม้ว่าเราจะไม่ได้วัด Hb ทารกในครรภ์หรือเม็ดเลือดแดง sickling ในหนูเคียวเราไม่ยืนยันฟีโนไทป์ของพวกเขาหลังจากนาเซียโดยม้ามใหญ่มากของพวกเขา [17]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เมาส์แบบจำลองของมนุษย์ SCD
พันธุกรรมเคียวหนู ( เคียว ) กับสิ่งมหัศจรรย์ของยีนฮีโมโกลบินทั้งหมดเมาส์และการแทรกของยีนที่แสดงออกของมนุษย์และบีตาแอลฟา HBS ถูกพัฒนาที่ห้องปฏิบัติการแห่งชาติ Lawrence Berkeley [ 17 ] หนูเคียวที่ได้จากการผสมข้ามสายพันธุ์เคียวเซลล์เพศชาย hemizygous ( ครึ่ง ) ผู้หญิงในบ้านพันธุ์คู่เคียวหนู ( สายพันธุ์เบอร์ 3342 ) และพันธุ์ป่า ( WT ) หนูที่ได้จากห้องปฏิบัติการ แจ็คสัน ส่งเสริมการใช้ transnetyx อิงค์ เพราะ c57bl / 6 เป็นหนึ่งในสายพันธุ์สำหรับพื้นหลังหนูเคียวยีน c57bl / 6 , ใช้ควบคุมน้ำหนัก . ควบคุมสัตว์เพิ่มเติม littermates Hemi ซึ่งเป็นโลหิตจางแต่ไม่มีเคียวรูป [ 18 ]หนูเพศผู้ที่ใช้ในการทดลองเป็น 7 – 9 เดือน หนูปลอดโรคและได้รับตามปกติ NIH หนูเชา และน้ำ อัณฑะและเลือดถูกเก็บระหว่าง 8 และ 11 จากหนูอสัญญี . ในเลือดได้โดย ใช้เข็มฉีดยาเจาะหัวใจ 1 TB ml กับหมัน 26gx3 / 8 เข็ม และรวบรวมเป็นเพนดอร์ฟหลอดถึงแม้ว่าเราไม่ได้วัดของ HB หรือเม็ดเลือดแดงในหนูเคียวเคียว เราได้ยืนยันตนหลังจากการการุณยฆาตโดยมากของพวกเขาใหญ่ม้าม [ 17 ]