was added. The plate was allowed to stand for 1 h at 37 °C; washed thrice with PBS-T. Then 100 μL of goat anti-rabbit IgG antibody conjugated with horseradish peroxidase (GeNei, India, diluted 1:2000 in PBS) was added to each well and incubated at 37 °C for 1 h. The plate was again washed thrice with PBS-T. 100 μL of 3, 3′, 5, 5′- tetramethyl benzidine (GeNei, India) mixed with 0.1% (v/v) of hydrogen peroxide was added for colour development. The reaction was stopped by adding 25 μL of 1 M sulphuric acid. The optical density was measured at 450 nm. The mean absorbance value of each well was used to express serum antibody level.
ถูกเพิ่มเข้ามา จานรับอนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส ล้างสามครั้งด้วย PBS-T 100 ไมโครลิตรของแพะป้องกันกระต่ายแอนติบอดี IgG ผันกับมะรุม peroxidase (GENEI, อินเดีย, เจือจาง 1: 2000 ในพีบีเอส) ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมง จานถูกล้างอีกครั้งสามครั้งกับพีบีเอส-T 100 ไมโครลิตร 3, 3 ', 5, 5'- tetramethyl benzidine (GENEI, อินเดีย) ผสมกับ 0.1% (v / v) ของไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ถูกเพิ่มเข้ามาสำหรับการพัฒนาสี ปฏิกิริยาก็หยุดโดยการเพิ่ม 25 ไมโครลิตร 1 M กรดกำมะถัน ความหนาแน่นของแสงวัดที่ 450 นาโนเมตร ค่าการดูดกลืนเฉลี่ยของแต่ละดีถูกนำมาใช้ในการแสดงระดับแอนติบอดีในซีรั่ม
การแปล กรุณารอสักครู่..
