Until now only a few genes encoding

Until now only a few genes encoding virulence factors have been characterized in the
avian pathogen Mycoplasma gallisepticum. In order to identify candidate targets associated
with infection we applied an immunoscreening technique—in vivo induced antigen
technology (IVIAT)—to detect immunogens of M. gallisepticum strain Rlow expressed
preferentially during in vivo infection. We identified 13 in vivo-induced (IVI) proteins that
correspond to different functional categories including: previously reported putative
virulence factors (GapA, PlpA, Hlp3, VlhA 1.07 and VlhA 4.01), transport (PotE, MGA_0241
and 0654), translation (L2, L23, ValS), chaperone (GroEL) and a protein with unknown
function (MGA_0042). To validate the in vivo antigenic reactivity, 10 IVI proteins were
tested by Western blot analysis using serum samples collected from chickens
experimentally (with strain Rlow) and naturally (outbreaks, N = 3) infected with
M. gallisepticum. All IVI proteins tested were immunogenic. To corroborate these results,
we tested expression of IVI genes in chickens experimentally infected with M. gallisepticum
Rlow, and in MRC-5 human lung fibroblasts cell culture by using relative real time reverse-
transcription PCR (RT-PCR). With the exception of MGA_0338, all six genes tested
(MGA_1199, 0042, 0654, 0712, 0928 and 0241) were upregulated at least at one time
point during experimental infection (2–4 week post-infection). In contrast, the expression
of seven out of eight IVI genes (MGA_1199, 0152, 0338, 0042, 0654, 0712, 0928) were
downregulated in MRC-5 cell culture at both 2 and 4 h PI; MGA_0241 was upregulated 2 h
PI. Our data suggest that the identified IVI antigens may have important roles in the
pathogenesis of M. gallisepticum infection in vivo

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จนถึงขณะนี้มีเพียงไม่กี่ยีนปัจจัยความรุนแรงมีลักษณะในการติดเชื้อ Mycoplasma gallisepticum นก
เพื่อที่จะระบุเป้าหมายผู้สมัครที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อที่เรานำมาใช้เป็นเทคนิคใน immunoscreening ร่างกายสารเหนี่ยวนำเทคโนโลยี(IVIAT) -to ตรวจหาภูมิคุ้มกันของสายพันธุ์เอ็ม gallisepticum Rlow แสดงพิเศษในระหว่างการติดเชื้อในร่างกาย เราระบุ 13 ในร่างกายที่เกิดขึ้น (IVI) โปรตีนที่สอดคล้องกับประเภทการทำงานที่แตกต่างกันรวมถึงก่อนหน้านี้รายงานสมมุติปัจจัยรุนแรง(GAPA, PlpA, Hlp3, VlhA 1.07 และ VlhA 4.01) การขนส่ง (พจน์, MGA_0241 และ 0654), การแปล (L2 , L23, Vals) พี่เลี้ยง (GroEL) และโปรตีนที่ไม่รู้จักฟังก์ชั่น(MGA_0042) ในการตรวจสอบในร่างกายเกิดปฏิกิริยาแอนติเจน 10 IVI โปรตีนถูกทดสอบโดยการวิเคราะห์ดวงตะวันโดยใช้ตัวอย่างซีรั่มที่เก็บได้จากไก่ทดลอง (มีสายพันธุ์ Rlow) และเป็นธรรมชาติ (ระบาด, N = 3) การติดเชื้อเอ็ม gallisepticum ทั้งหมดโปรตีน IVI ได้ทดสอบภูมิคุ้มกัน เพื่อยืนยันผลลัพธ์เหล่านี้เราทดสอบการแสดงออกของยีน IVI ในไก่ที่ติดเชื้อทดลองกับเอ็ม gallisepticum Rlow และใน MRC-5 เซลล์ปอดของมนุษย์การเพาะเลี้ยงเซลล์โดยใช้เวลาจริงญาติ reverse- ถอดความ PCR (RT-PCR) ด้วยข้อยกเว้นของ MGA_0338 ทั้งหมดหกยีนทดสอบ(MGA_1199, 0042, 0654, 0712, 0928 และ 0241) ได้รับการ upregulated อย่างน้อยครั้งหนึ่งจุดระหว่างการติดเชื้อการทดลอง(2-4 สัปดาห์หลังการติดเชื้อ) ในทางตรงกันข้ามการแสดงออกของเจ็ดแปด IVI ยีน (MGA_1199, 0152, 0338, 0042, 0654, 0712, 0928) ได้รับการ downregulated ในเซลล์เพาะเลี้ยง MRC-5 ทั้ง 2 และ 4 ชั่วโมง PI; MGA_0241 ถูก upregulated 2 ชั่วโมงPI ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่าที่ระบุ IVI แอนติเจนอาจมีบทบาทสำคัญในการทำให้เกิดโรคติดเชื้อเอ็มgallisepticum ในร่างกาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จนถึงขณะนี้มีเพียงไม่กี่ปัจจัยที่มีลักษณะการเข้ารหัสยีนโรคในสัตว์ปีก
เชื้อ Mycoplasma gallisepticum . เพื่อระบุเป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับผู้สมัครที่เราใช้เป็น immunoscreening การติดเชื้อ

และเทคนิคโดยแอนติเจนเทคโนโลยี ( iviat ) - ตรวจสอบทดลองของม. gallisepticum เมื่อย rlow แสดง
preferentially ในระหว่างการติดเชื้อในร่างกายเราระบุ 13 ชนิดเหนี่ยวนำ ( IVI ) โปรตีนที่
สอดคล้องกับหมวดการทำงานที่แตกต่างกันรวมถึง : ก่อนหน้านี้ได้รายงานปัจจัยที่ก่อให้เกิดความรุนแรงซึ่ง
( กาปา plpa hlp3 vlha , , , 1.07 และ vlha 4.01 ) , ขนส่ง ( โปเต mga_0241
, และ 0654 ) , แปลเอกสาร ( L2 , l23 คนนอก , ) , เป็นพี่เลี้ยง ( โกรล ) และ โปรตีนที่มีฟังก์ชั่นที่ไม่รู้จัก
( mga_0042 ) การตรวจสอบโดยปฏิกิริยาแอนติเจน ,10 โปรตีน IVI )
ทดสอบโดยการวิเคราะห์ blot ตะวันตกใช้เซรั่ม การเก็บตัวอย่างจากไก่
ขนาด ( rlow สายพันธุ์ ) และเป็นธรรมชาติ ( ระบาด , N = 3 ) ติดเชื้อ
ม. gallisepticum . ทั้งหมดทั่วโลกมีโปรตีนทดสอบ immunogenic . ยืนยันผลลัพธ์เหล่านี้
เราทดสอบการแสดงออกของยีนในไก่ทดลองทั่วโลกติดเชื้อเมตร rlow gallisepticum
,และใน mrc-5 มนุษย์ปอด fibroblasts เซลล์โดยใช้เทียบเวลาจริงกลับ -
ถอดความ PCR ( RT-PCR ) ด้วยข้อยกเว้นของ mga_0338 ทั้งหมด 6 ยีนทดสอบ
( mga_1199 0042 0654 0712 , , , , และ 0928 0241 ) upregulated อย่างน้อยที่จุดเวลาหนึ่งในระหว่างการติดเชื้อ
ทดลอง ( 2 – 4 สัปดาห์ การติดเชื้อโพสต์ ) ในทางตรงกันข้าม การแสดงออก
7 ออกจากแปดยีน IVI ( mga_1199 ลา 0338 , , ,0042 0654 0712 , , ,
downregulated 0928 ) ในเซลล์เพาะเลี้ยง mrc-5 ทั้ง 2 และ 4 H ปี่ ; mga_0241 คือ upregulated 2 H
pi ข้อมูลแนะนำว่าระบุ IVI และอาจมีบทบาทสำคัญในพยาธิกำเนิดของการติดเชื้อ
gallisepticum โดยม.