2.2.2. Biochemical analyses
Nearly 100 mg of gut tissue was homogenized in sodium phosphate buffer (glycerol v/v in 20 mM sodium phosphate buffer and 10 mM Tris, pH 7.0) with a Potter-Elvehjem homogenizer. The homogenate was centrifuged 13,400 ×g for 3 min at 4 °C, and the supernatant was used as the enzyme extract.
Amylase activity was photometrically assayed with the com- mercial kit for Amylase CNPG Liquiform (LABTEST, Lagoa Santa, MG, Brazil). Basically, amylase converted α-(2-chloro-4-nitrophe- nyl)-β-1,4-galactopyranosylmaltosid (Gal-G2-α-CNP) into 1,4- galactopyranosylmaltose and posteriorly into 2-chloro-4-nitrophenol, which was measured at 405 m. Amylase specific activity was expressed in μmoles of hydrolyzed glucose per min per mg protein (U mg− 1 protein).
2.2.2 วิเคราะห์ทางชีวเคมี
เกือบ 100 มิลลิกรัมของเนื้อเยื่อลำไส้ทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในบัฟเฟอร์โซเดียมฟอสเฟต (กลีเซอรอล v / v ใน 20 มมฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซเดียมและ 10 มิลลิ Tris ค่า pH 7.0) กับพอตเตอร์โฮโมจีไน Elvehjem homogenate ถูกปั่น 13,400 ×กรัมเป็นเวลา 3 นาทีที่ 4 ° C และสารละลายที่ใช้เป็นสารสกัดจากเอนไซม์.
กิจกรรมอะไมเลสได้รับการวิเคราะห์ photometrically กับชุดงานพาณิชย์สำหรับอะไมเลส CNPG Liquiform (Labtest, Lagoa ซานตา, MG, บราซิล) . โดยทั่วไปอะไมเลสแปลงα- (2-chloro-4-nitrophe- Nyl) -β-1,4-galactopyranosylmaltosid (Gal-G2-α-CNP) ลง 1,4- galactopyranosylmaltose และปลายทางเป็น 2-chloro-4-nitrophenol ซึ่งเป็นวัดที่ 405 เมตร อะไมเลสเฉพาะเจาะจงกิจกรรมคได้แสดงออกในμmolesของกลูโคสไฮโดรไลซ์ต่อนาทีต่อมิลลิกรัมโปรตีน (U mg- โปรตีน 1)
การแปล กรุณารอสักครู่..