Therefore, it is possible to determine the cancer disease by the intensity of
surface enhanced Raman scattering (SERS).
[0015] The cancer related substances in serum include DNA wound around
ฮิสโตน derived from cancer cells (referred to as the free DNA in the present
การประดิษฐ์), a nucleosome of unit structure (1 set) and a chromatin (fibers) which is a string-like structure of nucleosome. Although the serum includes globulin having a positive charge, the increase of globulin is at largest up to two times or less and, since the cancer procession may result in the increase of the
cancer-related substances detected by the biochip of the present ivnention
reaching up to 100 times or more, it shows the detection of the increase of the substance (cancer cell originating free DNA). Furthermore, DNA leaving from the normal cells, DNA leaving from ฮิสโตน by กระบวนการอะเซทิเลชัน and albumin
altogether account for approximately 60% of serum, however, in order to take
on a negative charge, they will not be trapped in the practice of the การประดิษฐ์นี้. Therefore, it is advantageous for quantitative examination of the cancer related substances.
[0016] Moreover, the needle-like nano-crystals used in the practice of the
การประดิษฐ์นี้ (ผลึกเมโสs of ซิลเวอร์ออกไซด์ containing peroxide of ซิลเวอร์) tend to be easily negatively charged in an สารละลายเอเควียส and, therefore, it appears that the ผลึกเมโส according to the การประดิษฐ์นี้may form a charge transfer complex in contact with the target molecules such as cancer related substances. Furthermore, the ซิลเวอร์ออกไซด์ is reduced upon receipt of the light energy to thereby being changed into a metallic ซิลเวอร์and, therefore, the surface plasmon resonance enhancement effect peculiar to the regularly
arranged metallic nano-particles may occurs on the ผลึกเมโส. Thus, the acicular nanocrystals (ผลึกเมโส) of the การประดิษฐ์นี้, although being a non-metal compound, is provided with metal properties and ionization properties concurrently and, therefore, the การประดิษฐ์นี้ can provide a suitable
biochips for measurement of surface enhanced Raman scattering (SERS).
[0017] Metal complex to form a quantum crystal is selected to have a complex stability constant (log/3) of the formula (I) to correlate the electrode potential E of the supported metal.
Formula (1): E ° = (RT / I Z F) In (A)
Where E °is the standard electrode potential, R is the gas constant, T is absolute temperature, Z is the ion valence, F represents the Faraday constant.)
In case that the metal complexes is selected from the group consisting of
plasmon metals such as Au, Ag, Pt and Pd, the plasmon metals have a function of localized surface plasmon resonance enhancement effect for the Raman light. In particular, when the metal complex is a ซิลเวอร์ complex, the complex may be formed by reaction of ซิลเวอร์ complexing agent having a stability constant
(formation constant) (log ,8i) of 8 or more with a ซิลเวอร์ เฮไลด์, where a ซิลเวอร์ เฮไลด์ may be preferably selected as the เฮไลด์ and the complexing agent may be
preferably selected from the group consisting of ไธโอซัลเฟต salt, thiocyanate salt, sulfite salt, thiourea salt, potassium iodide salt, thiosalicylic acid salt, and
thiocyanuric acid salt. In case of the ซิลเวอร์ complex, the resulting quantum
crystal has quantum dots made of nano-cluster having average diameter of 5 20nm, so that the size of the quantum crystal will be in a range of 100 — 200nm.
[0021] The concentration of the metal complex in the สารละลายเอเควียส should be determined depending on the size of the quantum crystals mainly, and, where a dispersing agent is used, the concentration of the dispersing agent should be considered correspondingly. Typically, although the metal complex in the
สารละลายเอเควียส can be used in the range of 100ppm to 5000ppm, the
concentration in the range of 500 to 2000ppm is rather preferred where
nano-sized particles called as the nano-cluster is desired to be prepared
depending on the functionality of the ligand.
[0022] The quantum crystals formed on a metal substrate or metal particles are believed likely tohave a positive polarity in an สารละลายเอเควียส as a metal
complex crystalsand, in order to allow the protein in a biological sample to be adsorbed, the polarity is preferably adjusted by means of an alkali treatment n
12
the presence of เฮไลด์ ions, for example, by dropping sodium hypochlorite solution of pH11 or higher thereon. By so doing, the quantum crystals is re-crystallized not only to have a negative polarity in an สารละลายเอเควียส but also to form the composite needle nano-crystalline ซึ่งประกอบรวมด้วย ซิลเวอร์ออกไซด์ ที่รวมถึง peroxides, โดยที่ a sample of cancer related substances derived from the cancer cells with a positively charged is possible to facilitate the immobilization of the free DNA.
[0023] Determination of the total protein concentration in a biological sample can be measured by obtaining the Raman spectrum resulting from irradiation ofthe laser beam of a specific wavelength. รูป 3 is a Raman spectrum โดยที่ a serum sample of colon cancer patients is diluted 10-fold, 100-fold, 500-fold, 1000-fold and10000-fold with pure water and measured by 633nm laser (30mW), to obtain peak rising value (PSV) and peak integration value, which change with concentration. Therefore, it will readily be understood that the quantitative
analysis of the total protein in the serum can be accomplished. In the Raman spectrum, particular peaks are observed in carbon-specific G band(1300
1400cm -1 vicinity) and D band (in the vicinity of 1550 — 1600cm -1)' and a peak can also be observed in the vicinity of -1 specific 2900cm to methyl group. The observation of the peaks in the Raman spectrum as discussed above appears to suggest that the methylation state of to DNA wound around ฮิสโตน could have been detected as a cancer related substances.
[0024] Therefore, it is possible to analyze the identification and progress of cancer from information such as the peak height, the peak integral values and
13
the peak onset time of the resulting Raman spectrum. รูป 1 shows a peak calculation method of Raman waveform, โดยที่ from the spectrum of Raman scattering by 633nm laser of human serum samples it is confirmed to form the peak of the scattering intensity in the vicinity of 1350cm -1 vicinity and 1550cm -1' Thus, on the basis of average value (m) between 800cm -1 (a) and 2000cm (b) of scattering intensity, the (p-m) peak rising value was defined as (Shifting Peak Value PSV) . The entire area of the peak was as the integral value. These peaks rise value and peak integral value are important in view of the cancer
related substances in human serum, it is possible to be an indicator of the
identification and progression of cancer in conjunction with peak onset time.
Brief Description of Drawings
[0025] รูป1 shows a method of calculating peaks in the Raman wave, in which spectra of the Raman scattering by 633nm laser of human serum samples
indicates the formation of a peak of scattering intensity in the vicinity of 1350cm
-1 and around 1550cm -1*
รูป2A is a Raman spectral diagram of a sample by adjusting the sera obtained from 12 cases of stomach cancer patients.
รูป2B is a Raman spectral diagram of a sample by adjusting the sera obtained from 12 cases of colorectal cancer patients.
รูป2C is a Raman spectral diagram of a sample by adjusting the sera obtained from 12 cases of benign disease patients.
14
รูป2D is a graph showing a comparison of Raman scattering peak rising value of stomach cancer, colorectal cancer, and benign disease sample.
รูป3 is the Raman spectrum showing the relationship between diluted samples and the Raman scattering intensity where the diluted samples are obtained from
12 cases of colon cancer patients, which shows that the scattering intensity peak rising value and the sample concentration are correlative each other.
รูป4 is an explanatory diagram showing a making procedure of the present inventive new SERS substrate shown in Example 1, โดยที่ an upper left photograph shows a substrate of Mytec Co. Ltd. with the SEM image.
รูป5 is a photograph showing various SEM images of the nano-particle aggregate (quantum crystal) prepared in Example 1.
รูป6 is a photograph showing an enlarged SEM image of a nano-particle.
รูป7 Is a photograph showing the relationship between quantum crystal shapes and standing times after dropping on the phosphor bronze substrate.
รูป8 is a graph showing a result of EDS spectra analysis of quantum crystals (elemental analysis).
รูป9 Is a photograph showing SEM image of quantum crystals alkali-treated in the presence of a halogen ion (Sodium hypochlorite treatment).
รูป10A is a photograph showing needle-like crystals of the alkali-treated quantum crystals.
15
รูป10B is a photograph showing a rugby ball-shaped mass in the .needle-like crystals.
รูป10C is a graph showing a result of EDS spectra of large mass (elemental analysis).
รูป11 is functional illustration views showing a state of the methylated free DNA
ดังนั้น จึงเป็นไปได้ว่าเป็นโรคมะเร็ง โดยความเข้มของผิวเพิ่มรามันกระจัดกระจาย (
sers )
[ 0 , 015 ] มะเร็งสารที่เกี่ยวข้องในซีรั่มรวมดีเอ็นเอแผลรอบ
ฮิสโตนมาจากเซลล์มะเร็ง ( เรียกว่าดีเอ็นเอฟรีในการประดิษฐ์ปัจจุบัน
)เป็นโครงสร้างหน่วยนิวคลีโอโซม ( 1 ชุด ) และเซลล์ ( เส้นใย ) ซึ่งเป็นสตริงเช่นโครงสร้างของนิวคลีโอโซม . แม้ว่าเซรั่มรวมถึงโกลมีประจุบวก , เพิ่มขึ้นจากเมืองน้ำหอมที่ใหญ่ที่สุดถึง 2 เท่า หรือน้อยกว่า และเนื่องจากโรคมะเร็งขบวนอาจส่งผลในการเพิ่มขึ้นของโรคมะเร็งที่เกี่ยวข้องกับสารที่ตรวจพบโดย
ivnention ไบโอชิปของปัจจุบันถึงถึง 100 ครั้งหรือมากกว่า มันแสดงให้เห็นการเพิ่มขึ้นของสารเสพติด ( เซลล์มะเร็งสร้างดีเอ็นเอฟรี ) นอกจากนี้ ดีเอ็นเอออกจากเซลล์ปกติ ดีเอ็นเอ ออกจากฮิสโตนโดยกระบวนการอะเซทิเลชันและบัญชีอัลบูมิน
ทั้งหมดประมาณ 60% ของเซรั่ม , อย่างไรก็ตาม , เพื่อที่จะเอา
ในทางลบแล้วพวกเขาจะไม่ติดอยู่ในการปฏิบัติของการประดิษฐ์นี้ . ดังนั้น จึงเป็นประโยชน์สำหรับการตรวจสอบเชิงปริมาณของมะเร็งสารที่เกี่ยวข้อง
[ 0016 ] นอกจากนี้ เข็มชอบนาโนคริสตัลที่ใช้ในการปฏิบัติของ
การประดิษฐ์นี้ ( ผลึกเมโสของซิลเวอร์ออกไซด์ประกอบด้วยเปอร์ออกไซด์ของซิลเวอร์ ) มีแนวโน้มที่จะได้อย่างง่ายดายลบค่าใช้จ่ายในการสารละลายเอเควียสและ ดังนั้นปรากฏว่าผลึกเมโสตามการการประดิษฐ์นี้อาจเป็นค่าธรรมเนียมการโอนที่ติดต่อกับเป้าหมายโมเลกุลเช่นสารมะเร็งที่เกี่ยวข้อง นอกจากนี้ ซิลเวอร์ออกไซด์จะลดลงเมื่อได้รับพลังงานแสงจึงถูกเปลี่ยนเป็นซิลเวอร์โลหะและ ดังนั้นพื้นผิว PLASMON แนนซ์เพิ่มผลแปลกไปเป็นประจำ
จัดโลหะอนุภาคนาโนอาจเกิดขึ้นบนผลึกเมโส . ดังนั้น nanocrystals เข็ม ( ผลึกเมโส ) ของการประดิษฐ์นี้ แม้ว่าเป็นสารอโลหะ , มาพร้อมกับคุณสมบัติและคุณสมบัติของไอโลหะอื่นๆ และ ดังนั้นการการประดิษฐ์นี้สามารถให้ biochips เหมาะ
สำหรับการวัดพื้นผิวเพิ่มรามันกระจัดกระจาย ( sers )
[ ] 0017 โลหะที่ซับซ้อนในรูปแบบควอนตัมคริสตัลที่มีความซับซ้อนเสถียรภาพคงที่ ( เข้าสู่ระบบ / 3 ) ของสูตรที่ ( ผม ) เพื่อหาความสัมพันธ์และสนับสนุนศักยภาพขั้วโลหะ
สูตร ( 1 ) : E / = ( RT / i z F ) e /
( ) ซึ่งเป็นศักย์ขั้วไฟฟ้ามาตรฐานR เป็นแก๊สคงที่ , T คืออุณหภูมิสัมบูรณ์ , Z เป็นไอออนความจุ F หมายถึง ฟาราเดย์ อย่างต่อเนื่อง )
ในกรณีที่โลหะเชิงซ้อน คือ เลือกจากกลุ่มประกอบด้วย
PLASMON โลหะเช่น Au , Ag , Pt และ PD , PLASMON โลหะมีฟังก์ชันของพื้นผิว PLASMON ถิ่น เพื่อเพิ่มผลแสงรามัน . โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อซับซ้อนโลหะเป็นซิลเวอร์ซับซ้อน ที่ซับซ้อนอาจจะเกิดขึ้นจากปฏิกิริยาของซิลเวอร์ในตัวแทนมีเสถียรภาพคงที่
( คงรูปแบบ ) ( บันทึก 8i ) จาก 8 หรือมากกว่า ด้วยซิลเวอร์เฮไลด์ที่ซิลเวอร์เฮไลด์อาจจะควรเลือกเป็นเฮไลด์และซับซ้อน เจ้าหน้าที่อาจ
ควรเลือกจากกลุ่มประกอบด้วยไธโอซัลเฟตเกลือไทโอไซยาเนต เกลือ เกลือ น้ำเชื่อม เกลือซัลไฟต์ , เกลือโพแทสเซียมไอโอไดด์ เกลือของกรดและเกลือของกรด thiosalicylic
, thiocyanuric . ในกรณีของซิลเวอร์ซับซ้อน ส่งผลให้มีจำนวนจุดควอนตัม
คริสตัลทำจากนาโนคลัสเตอร์มีขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางเฉลี่ยของ 20nm 5 ,เพื่อให้ขนาดของควอนตัมคริสตัลจะอยู่ในช่วง 100 - 200nm .
[ ] ที่ รูปภาพ ความเข้มข้นของโลหะที่ซับซ้อนในสารละลายเอเควียสควรกำหนดขึ้นอยู่กับขนาดของควอนตัมผลึกส่วนใหญ่ และที่ตัวแทนกระจายใช้ ความเข้มข้นของการสลายสารควรพิจารณาต้องกัน โดยทั่วไปแล้วแม้ว่าโลหะที่ซับซ้อนใน
สารละลายเอเควียสสามารถใช้ได้ในช่วงของการ 5000ppm
ความเข้มข้น 100 ppm , ในช่วง 500 2000ppm ค่อนข้างชอบที่
ผลิตอนุภาคนาโนเรียกว่า นาโน กลุ่มที่ต้องการเตรียมตัว
ขึ้นอยู่กับการทำงานของลิแกนด์ .
[ 0022 ] ควอนตัมผลึกที่เกิดขึ้นบนพื้นผิวโลหะหรือโลหะอนุภาคเชื่อว่าน่าจะมีเป็นขั้วบวกในสารละลายเอเควียสเป็นโลหะ crystalsand
ที่ซับซ้อน เพื่อให้โปรตีนในตัวอย่างทางชีวภาพเพื่อดูดซับ , ขั้วคือ ควรปรับวิธีการรักษาด่าง n
12 การปรากฏตัวของเฮไลด์ไอออน , ตัวอย่างเช่นโดยวางสารละลายโซเดียมไฮโปคลอไรต์ ph11 หรือสูงกว่านั้น โดยให้ทำ , ควอนตัมผลึกเป็นเป็นก้อนไม่เพียง แต่จะมีขั้วลงในสารละลายเอเควียสแต่ยังรูปแบบนาโนคอมโพสิตเข็มผลึกซึ่งประกอบรวมด้วยซิลเวอร์ออกไซด์ peroxides ที่รวมถึง ,โดยที่ตัวอย่างของโรคมะเร็งที่เกี่ยวข้องกับสารสกัดจากเซลล์มะเร็งที่มีประจุบวกได้ เพื่อความสะดวกในการตรึงดีเอ็นเอฟรี 0023
[ ] การหาผลรวมโปรตีนในตัวอย่างทางชีวภาพ สามารถวัดได้โดยการสเปกตรัมที่เกิดจากการฉายรังสีของรามันเลเซอร์แสงเฉพาะความยาวคลื่นรูป 3 เป็นสเปกตรัมรามันโดยที่ซีรั่มของผู้ป่วยมะเร็งลําไส้ใหญ่คือตัวอย่างเจือจาง 10 เท่า 100 เท่า 1000 , 500 พับ , พับ and10000 พับกับน้ำบริสุทธิ์และวัด โดย 633nm เลเซอร์ ( 30MW ) เพื่อให้ได้ยอดเพิ่มขึ้นค่า ( PSV ) และยอดรวมมูลค่าที่เปลี่ยนแปลงกับสมาธิ ดังนั้น จึงพร้อมจะเข้าใจว่าปริมาณ
การแปล กรุณารอสักครู่..