2.1. Treatments and experimental design
A total area of 6 ha of first-cut orchardgrass (Dactylis
glomerata) was cut on 1 June 2011 (at the early bloom
stage of maturity), spread to cover the total harvested area,
and wilted for 16 h. After wilting, the grass was chopped
to a length of 20 mm with a forage chopper. Three silage
treatments were used for the ensiling: untreated grass silage
(GS, control) without inoculants, treated grass inoculated
with the strain E. faecium EF2/3s (GS+EF2/3s), and
treated grass inoculated with the strain E. faecium EF26/42
(GS+EF26/42). Approximately 50 kg of grass was mixed in
a plastic container to consolidate the herbages. For each
silage treatment, approximately 15 kg of mixed grass was
used for ensiling. The diluted inoculants were sprayed at
10 mL kg grass–1. The control was sprayed with 10 mL of
distilled water kg grass–1. For ensiling, a fresh culture of
each inoculant strain was diluted with Ringer solution to
a population of at least 109 cfu mL–1. About 900 g of grass
was then pressed into 1-L polyethylene (PET) jars, with
36 PET jars divided into 3 × 12 sets per treatment. The
PET jars were sealed with lids, and the joints were filled
with paraffin to prevent the inlet of oxygen. Ensiling of
the grass took place at 17–21 °C for 111 days in a dark
room. Representative samples of grass were collected from
5 different places of 50 kg of grass, and average samples
(in triplicate) were used for microbiological and chemical
analyses before division into PET jars (days 0–1). In
addition, 2 PET jars per treatment were opened on days
7, 40, and 111 of ensiling for microbiological analyses (in
triplicate), and 2 other PET jars per treatment were opened
for nutritional analyses and fermentation parameters (in
triplicate) after ensiling. After sample collection, the jars
were discarded. Thus, from 12 jars per treatment the last
4 PET jars were stored and used for future in vitro rumen
experiments.
2.1 . การรักษาและทดลองออกแบบพื้นที่ทั้งหมด 6 ไร่ orchardgrass ( dactylis ก่อนตัดglomerata ) ถูกตัดบน 1 มิถุนายน 2011 ( ที่บานก่อนเวทีของวัย ) , แพร่กระจายครอบคลุมพื้นที่รวมเก็บเกี่ยว ,16 ชั่วโมง หลังจากเหี่ยวเหี่ยวและหญ้าถูกตัด ,ให้มีความยาว 20 มม. มีอาหารสัตว์ชอปเปอร์ สามหมักการรักษาที่ใช้ในการหมักและหมักหญ้า :( GS , การควบคุม ) โดยไม่ได้รับเชื้อหัวเชื้อหญ้า ,กับความเครียด เช่น จาก ef2 / 3s ( GS + ef2 / 3s )ที่ใส่หญ้ารักษาสายพันธุ์อีจาก ef26 / 42( GS + ef26 / 42 ) ประมาณ 50 กิโลกรัม หญ้าผสมในภาชนะพลาสติกรวม herbages . สำหรับแต่ละหมัก รักษา ประมาณ 15 กิโลกรัม ผสมหญ้าที่ใช้สำหรับการหมัก . เจือจางหัวเชื้อพ่นที่10 มิลลิลิตรต่อกิโลกรัม หญ้า– 1 การควบคุมถูกพ่นด้วย 10 มิลลิลิตรน้ำกกหญ้า– 1 สำหรับการหมัก , สดวัฒนธรรมของแต่ละสายพันธุ์ Inoculant เจือจางด้วยสารละลายสั่นประชากรอย่างน้อย 109 CFU ml ( 1 ประมาณ 900 กรัมของหญ้าแล้วกดเข้าไป 1-l พลาสติก ( PET ) ไห กับขวด 36 สัตว์เลี้ยงแบ่งออกเป็น 3 × 12 ชุด ต่อ การรักษา ที่ขวด PET ถูกผนึกด้วยฝา และข้อต่อที่เต็มไปด้วยพาราฟิน เพื่อป้องกันไม่ให้ท่อออกซิเจน การหมักของหญ้าเอาสถานที่ที่ 17 – 21 ° C 111 วันในที่มืดห้อง ตัวแทนจากการเก็บตัวอย่างของหญ้า5 สถานที่ที่แตกต่างกันจาก 50 กก หญ้า และตัวอย่างโดยเฉลี่ย( ทั้งสามใบ ) ใช้สำหรับทางจุลชีววิทยาและเคมีวิเคราะห์ก่อนแบ่งเป็นขวด PET ( วันที่ 0 – 1 ) ในทั้ง 2 ขวด ต่อ การรักษาสัตว์เลี้ยงที่ถูกเปิดวัน7 , 40 และ 111 ของการหมักโดยจุลินทรีย์ ( ในทำสำเนาสามฉบับ ) 2 ขวด ต่อ การรักษาสัตว์เลี้ยงอื่น ๆถูกเปิดการวิเคราะห์คุณค่าทางโภชนาการและพารามิเตอร์การหมัก ( ในทำสำเนาสามฉบับ ) หลังการหมัก . หลังจากตัวอย่างคอลเลกชัน , เหยือกถูกทิ้ง ดังนั้น จาก 12 ขวด ต่อ การรักษาล่าสุดขวด PET 4 ที่ถูกเก็บไว้เพื่อใช้ในอนาคต ทั้งหมดในหลอดทดลองการทดลอง
การแปล กรุณารอสักครู่..