Two 1.0 g samples of the lyophilize

Two 1.0 g samples of the lyophilized, powdered tissue were each extracted twice with 30 mL of MeOH-H2O, 4:1, for 30 min using a magnetic stir bar in a 50 mL screw-cap tube that was sealed after flushing with N2. After centrifugation for 5 min at 1500g , the supernatant was vacuum filtered through a sintered glass funnel fitted with a glass fiber disk. The combined extracts were reduced to 20 mL by N2 evaporation at 40°C, and two 10 mL portions were fractionated on 500 mg Strata X polymeric solid-phase extraction (SPE) tubes (Phenomenex, Torrance, CA,USA) with a step gradient of 25%, 40%, and 60% aqueous MeOH(10 mL each).11 Analysis of aliquots by C18-HPLC-DAD showed the 40% MeOH SPE fraction was enriched in compounds 1and 2. This fraction was processed to yield two 1.2 mL samples in 10% aqueous MeOH plus 0.02% H3PO4, which were injected in 80μL portions onto a Phenomenex Luna C18(2) column (5μm particle size,250 mm long, 4.6 mm i.d.) for isolation of compounds 1and2 using an HP 1100 Series HPLC system (Agilent Technologies) and a binary gradient consisting of 0.02% H3PO4 in H2O and MeOH as previously described by Ma et al

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แต่ละที่สอง 1.0 กรัมตัวอย่างเนื้อเยื่อ lyophilized ผงสกัดสองเท่ากับ 30 มล. MeOH-H2O, 4:1, 30 นาทีโดยใช้แถบแม่เหล็กกวนในหลอดฝาเกลียวขนาด 50 มล.ที่ถูกปิดผนึกหลังจากล้างด้วย N2 หลังจากหมุน 5 นาทีที่ 1500 กรัม supernatant เป็นสุญญากาศที่ถูกกรองผ่านปล่องเผาแก้วประกอบ ด้วยดิสก์แบบใยแก้ว สารสกัดรวมได้ลดลงถึง 20 mL โดย N2 ระเหยที่อุณหภูมิ 40° C และสองส่วน 10 มล.ถูกแบ่งใน 500 มิลลิกรัม X ชั้นเมอร์แข็งเฟสท่อการสกัด (SPE) (Phenomenex รันซ์ CA สหรัฐอเมริกา) กับการไล่ระดับขั้นตอน ของ 25%, 40%, 60% ละลาย MeOH(10 mL each) aliquots โดย C18-HPLC-พ่อ.11 วิเคราะห์พบว่า 40% เศษ MeOH SPE มีอุดมในสารประกอบ 1and 2 ส่วนนี้การประมวลผลเพื่อให้ตัวอย่าง 1.2 mL สองใน 10% สารละลาย MeOH บวก 0.02% H3PO4 ซึ่งถูกฉีดในส่วน 80μL ลงในคอลัมน์ Phenomenex Luna C18(2) (ขนาดอนุภาค 5μm ยาว 250 มม. ประชาชน 4.6 มม.) การแยกของสาร 1and2 ที่ใช้กับระบบ HPLC ชุด HP 1100 (Agilent เทคโนโลยี) และการไล่ระดับสีแบบไบนารีที่ประกอบด้วย 0.02% H3PO4 ใน H2O และ MeOH ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดย Ma et al

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สองตัวอย่าง 1.0 กรัมของแห้งเนื้อเยื่อผงสกัดแต่ละครั้งที่สองกับ 30 มลเมธานอล-H2O, 4: 1 เป็นเวลา 30 นาทีโดยใช้แถบแม่เหล็กปั่นป่วนในมลหลอดเกลียวฝา 50 ที่ถูกปิดผนึกไว้หลังจากล้างด้วย N2 หลังจากการหมุนเหวี่ยงเวลา 5 นาทีที่ 1500g ใสสูญญากาศที่ถูกกรองผ่านช่องทางแก้วเผาพอดีกับดิสก์ใยแก้ว สารสกัดรวมกันถูกลดลงไป 20 มลโดย N2 ระเหยที่ 40 ° C, และสอง 10 ส่วนมลถูก fractionated 500 มิลลิกรัมชั้น X พอลิเมอสกัดเฟสของแข็ง (SPE) ท่อ (Phenomenex, Torrance, CA, USA) ที่มีการไล่ระดับสีขั้นตอน 25%, 40% และ 60% น้ำเมธานอล (10 มลแต่ละคน) 0.11 การวิเคราะห์ aliquots โดย C18-HPLC-DAD แสดงให้เห็นว่า 40% เมธานอล SPE ส่วนผสานสาร 1 และ 2 ส่วนนี้ได้รับการประมวลผลให้ผลผลิตสอง 1.2 ตัวอย่างมิลลิลิตรในเมธานอลน้ำ 10% บวก H3PO4 0.02% ซึ่งถูกฉีดในส่วน80μLบน Phenomenex Luna C18 (2) (ขนาด5μmอนุภาค 250 มิลลิเมตรยาว 4.6 มม ID) คอลัมน์การแยกสารประกอบ 1and2 ใช้ HP 1100 ซีรีส์ ระบบ HPLC (Agilent Technologies) และการไล่ระดับสีไบนารีประกอบด้วย H3PO4 0.02% ใน H2O และเมธานอลตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดย Ma, et al

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สองตัวอย่าง 1.0 กรัมของโปรตีนผงสกัด , เนื้อเยื่อเป็น 2 ครั้งละ 30 มล. meoh-h2o 1 , 30 นาที , การใช้แถบกวนแม่เหล็กใน 50 มิลลิลิตร สกรูฝาท่อที่ถูกผนึก หลังจากล้างด้วย 2 . หลังการปั่นเหวี่ยงสำหรับ 5 นาทีที่ 1500g , น่านเป็นสุญญากาศที่กรองผ่านการเผาแก้วกรวยพอดีกับกระจกไฟเบอร์ดิสก์ สารสกัดรวมลดลงร้อยละ 20 มิลลิลิตร โดยการระเหยที่ 40 ° C N2 และสอง 10 ml ส่วนถูกพบบนชั้น x 500 มิลลิกรัม ส่วนสารสกัด ( SPE ) หลอด ( phenomenex Torrance , CA , USA ) กับขั้นตอนการไล่ระดับสี 25% , 40% และ 60% โดยปริมาณ 10 ml ( แต่ละ 11 ) . การวิเคราะห์เฉยๆ โดยมีปริมาณสาร c18-hplc-dad 40% ส่วนคืออุดมในสารประกอบและ 2 ส่วนนี้คือแปรรูปผลผลิตสองตัวอย่าง 1.2 ml ในสารละลาย 10% ปริมาณบวก 0.02% H3PO4 ซึ่งถูกฉีด 80 μ L ส่วนบน phenomenex ลูน่า c18 ( 2 ) คอลัมน์ ( 5 μ M ขนาด ยาว 4.6 มม. บัตร 250 มม. ) สำหรับการแยกสารประกอบ 1and2 ใช้ HP 1100 ชุดโดยระบบ ( Agilent Technologies ) และไล่ระดับไบนารีประกอบด้วย H3PO4 0.02 % ปริมาณ h2o และอธิบายโดย ma et al ก่อนหน้านี้เป็น