Abstract1H NMR spectroscopy was use

Abstract
1H NMR spectroscopy was used to follow the cleavage of sucrose by invertase. The parameters of the enzyme's kinetics, Km and Vmax, were directly determined from progress curves at only one concentration of the substrate. For comparison with the classical Michaelis–Menten analysis, the reaction progress was also monitored at various initial concentrations of 3.5 to 41.8 mM. Using the Lambert W function the parameters Km and Vmax were fitted to obtain the experimental progress curve and resulted in Km = 28 mM and Vmax = 13 μM/s. The result is almost identical to an initial rate analysis that, however, costs much more time and experimental effort. The effect of product inhibition was also investigated. Furthermore, we analyzed a much more complex reaction, the conversion of farnesyl diphosphate into (+)-germacrene D by the enzyme germacrene D synthase, yielding Km = 379 μM and kcat = 0.04 s− 1. The reaction involves an amphiphilic substrate forming micelles and a water insoluble product; using proper controls, the conversion can well be analyzed by the progress curve approach using the Lambert W function.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อก 1H NMR ใช้ตามปริของซูโครส โดย invertase พารามิเตอร์ของจลนพลศาสตร์ของเอนไซม์ Km และ Vmax ถูกกำหนดจากเส้นโค้งความคืบหน้าที่ความเข้มข้นเดียวของพื้นผิวโดยตรง สำหรับการเปรียบเทียบกับการวิเคราะห์ขั้น – Menten คลาสสิก ความคืบหน้าของปฏิกิริยาถูกตรวจสอบที่ความเข้มข้นเริ่มต้นต่าง ๆ ของ mM 3.5-41.8 ยัง Lambert W ใช้งานพารามิเตอร์ Km และ Vmax ถูกติดตั้งเพื่อให้ได้เส้นโค้งความคืบหน้าการทดลอง และผลใน Km = 28 มม.และ Vmax = 13 μM s ผลคือเกือบจะเหมือนกับการวิเคราะห์อัตราเริ่มต้นที่ อย่างไรก็ตาม ต้นทุนเวลาและความพยายามทดลองมากขึ้น นอกจากนี้ยังมีสอบสวนผลของการยับยั้งการเปลี่ยนผลิตภัณฑ์ นอกจากนี้ เราวิเคราะห์ปฏิกิริยาซับซ้อนมากขึ้น การแปลง farnesyl diphosphate เป็น (+) -germacrene D โดย synthase germacrene D เอนไซม์ ผลผลิต Km = 379 μM และ kcat = 0.04 s− 1 ปฏิกิริยาที่เกี่ยวข้องกับพื้นผิว amphiphilic เป็น micelles และผลิตภัณฑ์แบบละลายน้ำ ใช้ตัวควบคุมที่เหมาะสม การแปลงสามารถดีทำวิเคราะห์ โดยวิธีโค้งความคืบหน้าการใช้ฟังก์ชัน Lambert W

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อสเปกโทรสโก 1H NMR ถูกใช้ในการปฏิบัติตามความแตกแยกของน้ำตาลซูโครสโดย invertase
พารามิเตอร์ของจลนศาสตร์ของเอนไซม์กม Vmax และถูกกำหนดโดยตรงจากเส้นโค้งความคืบหน้าเพียงคนเดียวที่มีความเข้มข้นของสารตั้งต้น สำหรับการเปรียบเทียบกับคลาสสิกการวิเคราะห์ Michaelis-Menten ความคืบหน้าการเกิดปฏิกิริยาได้รับการตรวจสอบยังที่ความเข้มข้นเริ่มต้นต่างๆของ 3.5-41.8 มม ฟังก์ชั่นการใช้แลมเบิร์ W พารามิเตอร์กิโลเมตรและ Vmax กำลังพอดีที่จะได้รับโค้งความคืบหน้าและผลการทดลองในกม = 28 มิลลิและ Vmax = 13 ไมครอน / s ผลที่ได้คือเกือบจะเหมือนกับการวิเคราะห์อัตราการเริ่มต้นนั้น แต่ค่าใช้จ่ายเวลามากขึ้นและความพยายามในการทดลอง ผลของการยับยั้งสินค้าที่ถูกตรวจสอบยัง นอกจากนี้เราวิเคราะห์ปฏิกิริยาที่ซับซ้อนมากขึ้นการเปลี่ยนแปลงของเพท farnesyl ลงไป (+) - germacrene D โดยเทสเอนไซม์ germacrene D ยอมกม = 379 ไมครอนและ kcat = 0.04 s- 1. ปฏิกิริยาที่เกี่ยวข้องกับการสร้างพื้นผิว amphiphilic micelles และสินค้าน้ำไม่ละลายน้ำ; โดยใช้การควบคุมที่เหมาะสมการแปลงเดียวสามารถวิเคราะห์โดยวิธีเส้นโค้งความคืบหน้าการใช้ฟังก์ชั่นแลมเบิร์ W

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

บทคัดย่อ 1H NMR สเปกโทรสโกปี
ใช้ไปตามร่องอกของซูโครสโดยเปรียบเทียบ . พารามิเตอร์ของเอนไซม์จลนศาสตร์ของ Km และ Vmax ได้โดยตรง พิจารณาจากความก้าวหน้าที่โค้งเดียว ความเข้มข้นของสารอาหาร . เปรียบเทียบกับคลาสสิกมาก– menten การวิเคราะห์ปฏิกิริยาความคืบหน้ายังตรวจสอบที่เข้มข้นขนาด 3.5 41.8 มิลลิเมตรการใช้ฟังก์ชันพารามิเตอร์ Km และ Vmax Lambert W ถูกติดตั้งเพื่อให้ได้กราฟความคืบหน้าการทดลองและผลใน km = 28 มม. และ Vmax = 13 μ m / s ผลที่ได้คือเกือบจะเหมือนกันกับการวิเคราะห์อัตราเริ่มต้นที่ อย่างไรก็ตาม ค่าใช้จ่ายมากเวลาและความพยายามในการทดลอง ผลของการยับยั้งผลิตภัณฑ์มีลักษณะ นอกจากนี้ เราวิเคราะห์ปฏิกิริยาที่ซับซ้อนมากการแปลง farnesyl พุ่งหลาวลงใน ( ) - germacrene D โดยเอนไซม์ germacrene D และ หยุ่น km = 379 μ M และ kcat = 0.04 s − 1 ปฏิกิริยาที่เกี่ยวข้องกับการใช้ amphiphilic สร้างไมเซลล์และไม่ละลายน้ำ ผลิตภัณฑ์ โดยใช้การควบคุมที่เหมาะสม การเปลี่ยนแปลงจะถูกวิเคราะห์โดยวิธีโค้งความคืบหน้าการใช้ฟังก์ชัน Lambert W .