2.7. Apoptosis analysis with Annexi

2.7. Apoptosis analysis with Annexin V/PI staining
A FITC-labeled Annexin V/PI Apoptosis Detection Kit (BioVision,
Mountain View, CA) was used to evaluate apoptosis-mediated
death of tumor cells. Briefly, exponentially growing C26 cells were
treated at various concentrations of ZS for 24 h.

Untreated and treated C26 cells were harvested and washed with PBS and resuspended in 500 of binding buffer, and
then, 5 of annexin-v-fitc and 5 of PI were added. After supravital staining, the cells were immediately analyzed using flow cytometry

Furthermore, the cell-permeable cawpase inhibitor Z-VAD-FMK was used to study whether caspase family protein kinase were involved in ZS-induced apoptosis in C26 cells [21]
Briefly, after
treating with 0.5 lM and 0.8 lM ZS combined with or without
10 lM Z-VAD-FMK for 24 h, apoptosis was evaluated in C26 cells
using FCM.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7 การ Apoptosis วิเคราะห์ ด้วย Annexin V/PI ย้อมสี
ป้าย A FITC Annexin V/PI Apoptosis ตรวจชุด (BioVision,
ภูเขา CA) ใช้ในการประเมิน apoptosis mediated
ตายของเซลล์เนื้องอก ได้สร้างการเติบโตเซลล์ C26 Briefly
ถือว่าที่ความเข้มข้นต่าง ๆ ของ ZS ใน 24 ชม.

เซลล์ C26 ไม่ถูกรักษา และบำบัดถูกเก็บเกี่ยว และล้าง ด้วย PBS และ resuspended ใน 500 ผูกบัฟเฟอร์ และ
5 annexin v fitc และ 5 ของ PI ได้เพิ่มขึ้น หลังจากย้อมสี supravital เซลล์ได้ทันทีวิเคราะห์โดยใช้เซลล์กระแส < becton สัน USA >

Furthermore สารยับยั้งเซลล์ permeable cawpase Z-VAD-FMK ถูกใช้เพื่อศึกษาว่า caspase ครอบครัวโปรตีน kinase เกี่ยวข้องกับ ZS เกิด apoptosis ในเซลล์ C26 [21]
Briefly หลัง
รักษา ด้วย 0.5 lM และ 0.8 lM ZS รวม หรือไม่
10 lM Z-VAD-FMK ใน 24 h, apoptosis ได้ประเมินในเซลล์ C26
ใช้ FCM

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 การวิเคราะห์การตายของเซลล์ด้วย Annexin V / PI ย้อมสี
FITC ติดฉลาก Annexin V / PI Apoptosis ตรวจ Kit (BioVision,
Mountain View, CA) ถูกนำมาใช้ในการประเมินผลการตายของเซลล์พึ่ง
การตายของเซลล์มะเร็ง ชั่วครู่เติบโตชี้แจงเซลล์ C26 ได้
รับการรักษาที่มีความเข้มข้นต่างๆของ ZS เวลา 24 ชั่วโมงและได้รับการรักษาบำบัดเซลล์ C26 ถูกเก็บเกี่ยวและล้างด้วยพีบีเอสและ resuspended ใน 500 ของบัฟเฟอร์มีผลผูกพันและแล้ว 5 จาก Annexin-v-fitc และ 5 จาก PI ถูกเพิ่ม หลังจากการย้อมสี supravital เซลล์ได้ทันทีวิเคราะห์โดยใช้ภูมิคุ้มกันไหล




นอกจากนี้เซลล์ดูดซึม cawpase ยับยั้ง Z-VAD-FMK ถูกใช้ในการศึกษาไม่ว่าจะเป็นโปรตีนไคเนสเซ่ครอบครัวมีส่วนร่วมในการตายของเซลล์ ZS เกิดในเซลล์ C26 [21]
สั้น ๆ หลังจาก
การรักษาด้วย 0.5 และ 0.8 LM LM ZS ร่วมด้วยหรือไม่
10 LM Z-VAD-FMK เวลา 24 ชั่วโมง, การตายของเซลล์ได้รับการประเมินในเซลล์ C26
ใช้ FCM

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . การวิเคราะห์เซลล์ของเซลล์ V / PI staining
เป็น fitc ข้อความของเซลล์ v / ปี่ชุดตรวจหาเซลล์ ( biovision
, Mountain View , CA ) ประเมินผล (
( การตายของเซลล์มะเร็งได้ บรี fl Y , ชี้แจงการเติบโต c26 cells
ถือว่าความเข้มข้นต่างๆ

ZS 24 ชั่วโมงดิบและรักษา c26 เซลล์เก็บและล้างด้วย pbs resuspended ใน 500 รวมบัฟเฟอร์และ
แล้ว 5 annexin-v-fitc 5 ปี่ถูกเพิ่ม หลังจาก supravital การย้อมสีเซลล์ได้ทันที โดยใช้การไหล ( < เบคตอนดิกคินสันสหรัฐอเมริกา >

นอกจากนี้เซลล์สามารถดูดซึม cawpase ยับยั้ง z-vad-fmk จำนวนโปรตีนไคเนสว่าแคสเปสครอบครัวมีส่วนในการเกิด apoptosis ในเซลล์ c26 ZS [ 21 ]
y
flบรี หลังจากรักษาด้วย 0.5 และ 0.8 อิมอิม ZS ร่วมกับหรือโดย
10 LM z-vad-fmk 24 H (
c26 ทดลองในเซลล์ใช้ FCM