PCR conditions are summarized in Table 2. PCR amplifications
were conducted in a 20 ml reaction containing 2 ml of DNA sample,
1.8 ml of the primer working mix (10 pmol RB87 and RB88 primers
and 40 pmol RB89, RB90, RB110 and RB111 primers), 10 ml2 fast-
cycling PCR master mix (Qiagen) and 2 ml10 Qiagen CoralLoad
dye. Amplification conditions were 5 min at 95 C, 30 cycles of 5 s
at 96 C, 10 s at 57 C, 20 s at 68 C, and a final extension of 1 min
at 72 C, resulting in about an hour run on the DNA engine Tetrad
from MJ Research (Bio-Rad). As recommended by the PCR enzyme
manufacturer, PCR amplifications were also attempted on the fast-
cycling Eppendorf Mastercycler ep gradient S thermal cycler
(Eppendorf AG, Hamburg, Germany) using 98 C as the denatur-
ation temperature for three-step cycling, resulting in a 32e44 min
run, depending on annealing and extension conditions. When PCR
amplification was performed using regular HotStarTaq Plus DNA
polymerase (Qiagen) or the Qiagen Multiplex PCR kit, amplifica-
tion was 5 or 15 min at 95 C, respectively, followed by 30 cycles of
30 s at 94 C, 30 s or 90 s at 57 C, respectively, 45 s at 72 C, and a
final extension of 1 min at 72 C. PCR amplifications in the DNA
engine Tetrad from MJ Research lasted 1 h 40 min with the Hot-
StarTaq Plus Master Mix kit and 2 h 15 min with the Qiagen
Multiplex kit.
เงื่อนไข PCR จะถูกสรุปในตารางที่ 2 PCR amplificationsได้ดำเนินการในปฏิกิริยาปริมาณ 20 ml ที่ประกอบด้วย 2 มล.ของตัวอย่างดีเอ็นเอ1.8 ml ของส่วนผสมการทำสีรองพื้น (10 pmol RB87 และ RB88 ไพรเมอร์และ 40 pmol RB89, RB90, RB110 และ RB111 ไพรเมอร์), 10 ml2 รวดเร็ว -ขี่จักรยานหลักผสม PCR (Qiagen) และ CoralLoad Qiagen 2 ml10ย้อม Amplification เงื่อนไขได้ 5 นาทีที่ 95 C, 30 รอบ 5 sที่ 96 C, 10 s ที่ 57 C, 20 s ที่ 68 C และส่วนขยายเป็น final 1 นาทีที่ 72 C ผลเกี่ยวกับชั่วโมงทำงานในเครื่องยนต์ดีเอ็นเอ Tetradจาก MJ วิจัย (ไบ-Rad) แนะนำ โดยเอนไซม์ PCRผู้ผลิต PCR amplifications ได้ยังพยายามบนอย่างรวดเร็ว -ขี่จักรยาน Eppendorf Mastercycler ep ไล่ระดับ S ร้อน cycler(Eppendorf AG ฮัมบูร์ก เยอรมนี) ใช้ 98 C เป็น denatur -อุณหภูมิ ation สำหรับจักรยานสามขั้น การเกิดขึ้นในนาที 32e44รัน ขึ้นอยู่กับเงื่อนไขการอบเหนียวและส่วนขยาย เมื่อ PCRทำ amplification ใช้ปกติ HotStarTaq บวกกับดีเอ็นเอพอลิเมอเรส (Qiagen) หรือ Qiagen Multiplex PCR kit, amplifica-สเตรชันเป็น 5 หรือ 15 นาทีที่ 95 C ตามลำดับ ตามรอบ 30 ของ30 s ที่ 94 C, 30 s หรือ 90 s ที่ 57 C ตามลำดับ 45 s ที่ 72 C และขยาย final 1 นาทีที่ 72 C. amplifications PCR ในดีเอ็นเอเครื่องยนต์ Tetrad จาก MJ วิจัยกินเวลานาที 40 h 1 กับร้อน -ชุด StarTaq บวกหลักผสมและ 2 h 15 นาทีกับการ Qiagenชุด multiplex
การแปล กรุณารอสักครู่..

เงื่อนไข PCR ได้สรุปไว้ในตารางที่ 2 PCR ampli
ไพเพอร์ไฟได้ดำเนินการใน20 มล. ปฏิกิริยาที่มี 2 มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่างดีเอ็นเอ
1.8 มล. ของไพรเมอร์ผสมการทำงาน (10 pmol RB87 และไพรเมอร์ RB88
และ 40 pmol RB89, RB90, RB110 และไพรเมอร์ RB111) 10 ML2? อย่างรวดเร็วการขี่จักรยานต้นแบบผสม PCR (Qiagen) และ 2 ml10?
Qiagen CoralLoad
สีย้อม เงื่อนไขไอออนบวกสาย Ampli 5 นาทีที่ 95 องศาเซลเซียส 30 รอบ 5 s
ที่ 96 องศาเซลเซียส, 10 วินาทีที่ 57 องศาเซลเซียส 20 วินาทีที่ 68 องศาเซลเซียสและไฟขยาย NAL 1
นาทีที่72 องศาเซลเซียสส่งผลให้การเกี่ยวกับ ชั่วโมงในการทำงานของเครื่องยนต์ดีเอ็นเอ Tetrad
จาก MJ วิจัย (Bio-Rad) ตามคำแนะนำของเอนไซม์ PCR
ผู้ผลิต PCR ampli ไพเพอร์ไฟถูกพยายามที่ยังอยู่ในอย่างรวดเร็วการขี่จักรยาน Eppendorf Mastercycler อีลาด S Cycler ความร้อน (Eppendorf AG, ฮัมบูร์ก, เยอรมนี) ใช้ 98 องศาเซลเซียสเป็น denatur- อุณหภูมิ ation สำหรับการขี่จักรยานสามขั้นตอนส่งผลให้ ในนาที 32e44 ทำงานขึ้นอยู่กับการหลอมและเงื่อนไขขยาย เมื่อ PCR ไอออนบวกสาย ampli ได้รับการดำเนินการโดยใช้ HotStarTaq ปกติดีเอ็นเอพลัสโพลิเมอร์(Qiagen) หรือชุด Multiplex Qiagen PCR, CA- ampli สายการ5 หรือ 15 นาทีที่ 95 องศาเซลเซียสตามลำดับตามด้วย 30 รอบของ30 วินาทีที่ 94 องศาเซลเซียส, 30 วินาที หรือ 90 วินาทีที่ 57 องศาเซลเซียสตามลำดับ 45 s ที่ 72 องศาเซลเซียสและส่วนขยายของสายเอ็น1 นาทีที่ 72 องศาเซลเซียส PCR ไพเพอร์ ampli ไฟในดีเอ็นเอเครื่องยนต์Tetrad จาก MJ วิจัยกินเวลานาน 1 ชั่วโมง 40 นาทีกับ hot-ชุดStarTaq พลัสโทผสมและ 2 ชั่วโมง 15 นาทีกับ Qiagen ชุด Multiplex
การแปล กรุณารอสักครู่..

เงื่อนไขสามารถสรุปได้ในตารางที่ 2 PCR จึงทำให้ ampli
จำนวน 20 มิลลิลิตร ในปฏิกิริยาที่มี 2 ml ของตัวอย่าง DNA
1.8 มิลลิลิตรของการทำงานผสมรองพื้น ( rb87 10 pmol rb88 และไพรเมอร์
40 pmol rb89 rb90 rb110 , และ , rb111 ไพรเมอร์ ) , 10 ml2 อย่างรวดเร็ว -
จักรยาน PCR Master Mix ( เพิ่ม ) และ 2 ml10 QIAGEN coralload
ย้อม ampli จึงบวกเงื่อนไข 5 นาทีที่ 95 C 30 รอบ 5 S
ที่ 96 C10 ที่ 57 C 20 s 68 C และนาลจึงขยาย 1 นาทีที่ 72
C ส่งผลเกี่ยวกับวิ่งชั่วโมงบนดีเอ็นเอเครื่องยนต์เตแตรด
จากการวิจัย MJ ( ไบโอ ราด ) ตามที่แนะนำโดย PCR เอ็นไซม์
ผู้ผลิต , PCR ampli จึงทำให้ยังพยายามที่รวดเร็ว -
จักรยานเพนดอร์ฟ mastercycler EP ไล่ระดับของความร้อนรอบ
( เพนดอร์ฟ AG , ฮัมบูร์ก , เยอรมนี ) ใช้ 98 C เป็น denatur -
อุณหภูมิ ation สำหรับจักรยานสามขั้นตอน ส่งผล 32e44 มิน
วิ่ง ขึ้นอยู่กับขนาดและสภาพการ เมื่อ PCR
ampli จึงได้ดําเนินการโดยใช้ประจุบวก hotstartaq ปกติดีเอ็นเอพอลิเมอเรส
( เพิ่ม ) หรือเพิ่ม multiplex PCR Kit , ampli จึง CA -
tion 5 หรือ 15 นาทีที่ 95 องศาเซลเซียส ตามลำดับ ตามด้วย 30 รอบ
30 s ที่ 94 C 30 หรือ 90 s ที่ 57 C ตามลำดับ , 45 S ที่ 72 และ
Cนาลจึงนามสกุล 1 นาทีที่ 72 ค PCR จึง ampli ไอออนในดีเอ็นเอ
เครื่องยนต์เตแตรดจาก MJ วิจัยนาน 1 ชั่วโมง 40 นาที ร้อน
startaq บวกหลักผสมชุดและ 2 ชั่วโมง 15 นาทีกับ QIAGEN
multiplex kit
การแปล กรุณารอสักครู่..
