ABSTRACT : This study was carried o

ABSTRACT : This study was carried out to investigate in vitro fertilization and development of in vitro matured pig oocytes inseminated with the Duroc boar sperm by different sperm washing media after thawing of the 5 ml frozen straws. Immature follicular oocytes (30-40) were transferred into each well of a Nunc 4-well multidish containing 500 μl mTCM199 maturation medium. The sperm rich portion of ejaculates was collected into a 250 ml insulated vacuum bottle and gradually cooled 22 to 24°C over a 2 h period. Semen was centrifuged at 800 g for 10 min and the seminal plasma discarded. Sperm were resuspended in a lactose-egg yolk and N-acetyl-D- glucosamine (LEN) diluent to contain 1×109 sperm/ml and cooled to 5°C over a 2 h period. Immediately before freezing, semen was rediluted with an equal volume of LEN+4% glycerol and packed into 5 ml straws. After thawing of the 5 ml straw, the 5 ml semen was diluted with 20 ml Beltsville thawing solution (BTS) at room temperature. Oocytes were inseminated with untreated (unwashed and nonpreincubated) or treated sperm (washed two times in BTS, mTLP-PVA and mTBM media, respectively and nonpreincubated) with 2×107 sperm concentration. Oocytes were coincubated for 6 h in 500 μl mTBM fertilization. At 6 h after IVF, oocytes were transferred into 500 μl NCSU-23 culture medium for further culture of 6 h. Sperm penetration, polyspermy and male pronuclear formation of oocytes at 12 h after IVF and developmental ability of oocytes at 48 h after IVF were evaluated. Sperm penetration rate, male pronuclear formation and rate of cleaved embryos were higher in the BTS, mTLP-PVA and mTBM treatments than the unwashed treatment (p

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อ: การศึกษานี้ดำเนินการตรวจสอบการปฏิสนธิในหลอดทดลองและการพัฒนาของเซลล์ไข่หมูสกระท่อมในหลอดทดลองที่มีชู้กับอสุจ๊ากหมู Duroc โดยล้างสื่อหลังจากการละลายของ 5 มล.หลอดแช่แข็งอสุจิแตกต่างกัน เซลล์ไข่เจาะอ่อน (30-40) ถูกถ่ายโอนลงในแต่ละดีของ multidish มี 4 ดี Nunc ประกอบด้วย 500 μl mTCM199 เจริญเติบโตปานกลาง อสุจิที่อุดมไปด้วยส่วนของปีที่ถูกรวบรวมลง ในขวดเป็นสูญญากาศ 250 มล.ฉนวน และค่อย ๆ เย็น 22-24° C เป็นเวลา 2 ชม น้ำเชื้อถูกจากที่ 800 กรัมสำหรับ 10 นาทีและพลาสม่าบรรลุละทิ้ง สเปิร์มถูก resuspended ในแลคโตสไข่แดงและจ่าย N-acetyl-D-กลูโคซา (LEN) มี 1 × 109 สเปิร์ม/ml และเย็นที่ 5° C เป็นเวลา 2 ชม ก่อนแช่แข็ง น้ำเชื้อ rediluted ด้วยปริมาณเท่ากับ LEN + 4% กลีเซอรอล และบรรจุลงในหลอด 5 ml หลังจากการละลายของฟาง 5 มล. น้ำเชื้อ 5 มล.ถูกเจือจาง ด้วย 20 ml ละลาย Beltsville โซลูชัน (BTS) ที่อุณหภูมิห้อง เซลล์ไข่มีชู้กับไม่ถูกรักษา (ผด และ nonpreincubated) หรือรักษาสเปิร์ม (ล้างสองครั้งในบีทีเอส mTLP PVA และ mTBM สื่อ ตามลำดับ และ nonpreincubated) ที่ความเข้มข้นอสุจิ× 107 2 เซลล์ไข่มี coincubated สำหรับ 6 h ในปฏิสนธิ mTBM μl 500 เวลา 6 ชม.หลังจากปฏิสนธิ เซลล์ไข่ถูกโอนเข้า 500 μl NCSU-23 วัฒนธรรมสื่อวัฒนธรรมเพิ่มเติม 6 h. สเปิร์มเจาะ polyspermy และก่อ pronuclear ชายของเซลล์ไข่ที่ 12 ชั่วโมงหลังจากประเมินทำเด็กหลอดแก้วและสามารถพัฒนาการของเซลล์ไข่ใน 48 ชั่วโมงหลังการปฏิสนธิ สเปิร์มเจาะ ก่อ pronuclear ชาย และแหวกตอนที่มีมากกว่าในบีทีเอส mTLP PVA และ mTBM บำบัดรักษาผด (p < 0.05) อัตรา blastocysts จากเส้น cleaved (ขั้นที่ 2-4 เซลล์) ได้สูงในการรักษา mTLP-PVA กว่าในการรักษาผด บีทีเอส และ mTBM ในบทสรุป เราขอแนะนำซักผ้าของสเปิร์มแช่แข็งเตรียมด้วย mTLP PVA ปานกลางก่อนการปฏิสนธิในหลอดทดลองของเซลล์ไข่ใน mTBM ปานกลาง (เอเชีย Aust. J. Anim. วิทย์. 2004 ฉบับที่ 17 ฉบับที่ 2:164-167)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ: การศึกษาครั้งนี้ได้ดำเนินการในการตรวจสอบการปฏิสนธิในหลอดทดลองและพัฒนาในหลอดทดลองครบกำหนดเซลล์ไข่หมูผสมเทียมกับหมูป่าอสุจิ Duroc โดยสื่ออสุจิซักผ้าที่แตกต่างกันหลังจากที่ละลายใน 5 มล. หลอดแช่แข็ง เซลล์ไข่อ่อน follicular (30-40) ได้รับการโอนเข้ากันของ Nunc 4 ดี multidish แต่ละที่มี 500 ไมโครลิตรกลาง mTCM199 การเจริญเติบโต ส่วนที่อุดมไปด้วยสเปิร์มของ ejaculates ถูกเก็บรวบรวมลงในขวดสูญญากาศฉนวน 250 มล. และค่อยๆระบายความร้อน 22-24 องศาเซลเซียสเป็นระยะเวลากว่า 2 ชั่วโมง น้ำอสุจิถูกหมุนเหวี่ยงที่ 800 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีและพลาสม่าน้ำเชื้อทิ้ง สเปิร์ม resuspended ในไข่แดงไข่แลคโตสและกลูโคซา N-acetyl-D-(LEN) เจือจางจะมี 1 × 109 สเปิร์ม / ml และเย็นถึง 5 องศาเซลเซียสเป็นระยะเวลากว่า 2 ชั่วโมง ทันทีก่อนที่จะแช่แข็งน้ำเชื้อถูก rediluted กับปริมาตรที่เท่ากันของ LEN + 4% กลีเซอรอลและบรรจุลงในหลอดขนาด 5 ml หลังจากการละลายของฟาง 5 มล., 5 มล. น้ำอสุจิถูกเจือจางด้วย 20 มล. วิธีการแก้ปัญหาการละลาย Beltsville (BTS) ที่อุณหภูมิห้อง การพัฒนาของไข่ที่ได้รับการผสมเทียมกับได้รับการรักษา (ไม่เคยอาบน้ำและ nonpreincubated) หรือสเปิร์มได้รับการรักษา (ล้างสองครั้งในรถไฟฟ้า mTLP-PVA และ mTBM สื่อตามลำดับและ nonpreincubated) ที่มีความเข้มข้นของตัวอสุจิ 2 × 107 เซลล์ไข่ถูก coincubated เวลา 6 ชั่วโมงใน 500 ปฏิสนธิ mTBM ไมโครลิตร 6 ชั่วโมงหลังจากผสมเทียมเซลล์ไข่ถูกโอนเข้าไป 500 ไมโครลิตร NCSU-23 กลางวัฒนธรรมวัฒนธรรมต่อไปของ 6 ชั่วโมง เจาะสเปิร์มและการก่อ polyspermy pronuclear ชายของเซลล์ไข่ใน 12 ชั่วโมงหลังจากผสมเทียมและการพัฒนาการความสามารถของเซลล์ไข่ใน 48 ชั่วโมงหลังจากผสมเทียมได้รับการประเมิน อัตราการซึมผ่านของตัวอสุจิ, การก่อ pronuclear ชายและอัตราของตัวอ่อนที่เกาะติดอยู่ที่สูงขึ้นในรถไฟฟ้า mTLP-PVA และ mTBM การรักษามากกว่าการรักษาที่ไม่เคยอาบน้ำ (p <0.05) อัตราของตัวอ่อนจากการพัฒนาของไข่เกาะติดข้อมูล (2-4 เวทีมือถือ) มีค่าสูงในการรักษา mTLP-PVA กว่าในไม่เคยอาบน้ำที่บีทีเอสและทรีทเม้น mTBM โดยสรุปเราขอแนะนำให้ซักผ้าของตัวอสุจิแช่แข็งละลายกับสื่อ mTLP-PVA ก่อนการปฏิสนธิในหลอดทดลองของเซลล์ไข่ในสื่อ mTBM (Asian-Aust เจ Anim วิทย์ปี 2004 ฉบับที่ 17, ฉบับที่ 2:... 164-167)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบพยานเอกสารและการพัฒนาของการผสมเทียมหมูสุกไข่กับสเปิร์มสเปิร์มโดยหมูป่าดีที่สุดแตกต่างกันสื่อซักหลังการละลายของน้ำแข็งหลอด 5 ml . ฮอร์โมนไข่อ่อน ( 30-40 ) ถูกย้ายเข้าไปในแต่ละอย่างดีของขณะนี้ 4-well multidish ที่มี 500 μผม mtcm199 สุกปานกลาง อสุจิ รวย ส่วนของ ejaculates ถูกเก็บลงใน 250 ml . ขวดสูญญากาศ และค่อยๆ ระบายความร้อนด้วยฉนวน 22 24 ° C เป็นระยะเวลากว่า 2 ชั่วโมง . เป็นระดับที่ 800 กรัมต่อ 10 นาทีและน้ำอสุจิที่ถูกทิ้ง อสุจิถูก resuspended ในนมไข่และ n-acetyl-d - กลู ( เลน ) เตรียมที่จะประกอบด้วย 1 × 109 อสุจิ / ml และเย็น 5 องศา C ตลอดระยะเวลา 2 ชั่วโมง . ทันทีก่อนที่จะแช่แข็งน้ำเชื้อถูก rediluted ที่มีขนาดเท่ากัน เลนส์ + 4% และกลีเซอรอล บรรจุลงในหลอด 5 ml . หลังการละลายของ 5 ml ฟาง 5 มิลลิลิตรน้ำเชื้อที่เจือจางด้วย 20 ml Beltsville ละลายสารละลาย ( BTS ) ที่อุณหภูมิห้อง ทำการผสมเทียมกับไข่ดิบ ( ไม่เคยอาบน้ำและ nonpreincubated ) หรือเลี้ยงอสุจิ ( ล้าง 2 ครั้งในราคาพิเศษ mtlp PVA และ mtbm สื่อ ตามลำดับ และ nonpreincubated ) กับ 2 × 107 ความเข้มข้นของอสุจิ . coincubated oocyte 6 H ใน 500 μผม mtbm การปฏิสนธิ . ที่ 6 ชั่วโมงหลังการปฏิสนธิเซลล์ไข่ถูกโอนเข้าไป 500 , μผม ncsu-23 สื่อวัฒนธรรมวัฒนธรรมต่อไป 6 . อสุจิสอดใส่ polyspermy และการพัฒนาโปรนิวเคลียร์ชายไข่ที่ 12 ชั่วโมงหลังการปฏิสนธิและความสามารถในการพัฒนาของไข่ 48 ชั่วโมงหลังจากการปฏิสนธิ ได้แก่ . อัตราการซึมผ่านของอสุจิ การสร้างโปรนิวเคลียร์ชายและอัตราของสารที่สูงในรถไฟฟ้า , mtlp PVA และ mtbm การรักษามากกว่าการรักษาผ่านอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( P < 0.05 ) อัตราการโตของไข่จากระยะที่ 2-4 เซลล์ ) สูงกว่าใน mtlp PVA การรักษามากกว่าใน unwashed , รถไฟฟ้าบีทีเอส และ mtbm บําบัด สรุป เราขอแนะนำการล้างอสุจิแช่แข็งละลายกับ PVA mtlp กลางก่อนผสมเทียมไข่ใน mtbm ปานกลาง เอเชียอื่นๆ เจ ทำให้มีชีวิตชีวา สภาวะโลกร้อน 2004 เล่มที่ 2 : 164-167 ) 17