A precise understanding of the spec

A precise understanding of the specificity of effects displayed by different snake venom PLA2s requires the identification of their molecular targets in tissues. At the time when this study was published, a model had already been hypothesized, whereby the specificity of effects was predicted to depend on the strong binding of PLA2s to particular proteins on the cell surface (see summary on Kini and Evans, 1989) and the high affinity interaction of some venom PLA2s with membrane preparations of various sorts had been described (Kini and Evans, 1989, and references therein). However, identifying and characterizing such protein “receptors” or “acceptors” for PLA2s has proven to be an extremely challenging task. Lambeau and colleagues at the Institut de Pharmacologie Moléculaire et Cellulaire of Sophia Antipolis, performed a series of outstanding studies in which membrane proteins having a very high affinity toward toxic PLA2s from the venom of Oxyuranus scutellatus (taipan), OS1 and OS2, were clearly identified. One of these proteins had been found on neuronal cells in a previous study of this series.
A second protein, characterized in this particular article, was shown to be present on rabbit myogenic cells. Such proteins were later on named “N-type” and “M-type” PLA2s receptors, respectively, on the basis of their cellular origins. In this work, by applying a combination of classical and state-of-the-art methods, the general properties of the muscle receptor were revealed, which specifically bound the PLA2 toxins with dissociation constants in the low picomolar range. Moreover, the newly identified “M-type” protein was successfully purified to homogeneity by a combination of affinity chromatography steps, and reconstituted into liposomes, which consequently acquired a high specific binding capacity for the PLA2s. Although a number of important aspects on the functional roles of membrane PLA2 receptors still remain to be elucidated, the findings of Lambeau and coauthors provided a direct experimental demonstration for the proposed model on the specificity of toxic PLA2s, a principle having broad implications to understand their diverse mechanisms of action. Furthermore, subsequent observations on the strong binding of some mammalian PLA2s to the receptors first discovered using snake venom PLA2s have oriented the exploration of novel physiological functions of the former enzymes, independently of their catalytic activity.
The following is a personal account of this work by Gérard Lambeau: “In the late 80s’, it was already known that snake venoms contain a large diversity of PLA2 enzymes. Amazingly, only a subset of these enzymes can induce a wide variety of pathological symptoms in animals, despite the fact that they all share common catalytic properties and similar structural features. A hypothetical model was then presented by Kini and Evans (1989) trying to explain how the specific pharmacological effects, such as presynaptic neurotoxicity, cardiotoxicity, myotoxicity, anticoagulant and platelet effects are exhibited by venom PLA2 enzymes. This model was predicting the specific tar- geting of toxic and pharmacologically active PLA2 enzymes to the specific tissue or cell due to their high affinity toward specific proteins. On our side, we were looking for binding sites for some novel toxic venom PLA2s including OS2 (Lambeau et al., 1989). Our biochemical studies using the snake venom PLA2s OS1 and OS2 from the Australian Taipan snake (Oxyuranus scutellatus scutellatus) was bringing the first experimental demonstration for this model. Indeed, using radio-labeled OS1 and OS2, we could demonstrate for the first time the presence of very high affinity binding sites for venom sPLA2s in skeletal muscle that we then called the M-type (M for muscle) receptor (Lambeau et al., 1990). We could purify the binding protein and demonstrated that it has a molecular mass of 180 kDa. Binding experiments with the purified protein recon- stituted into liposomes (Lambeau et al., 1990), and then the cloning and recombinant expression of the receptor (Lambeau et al., 1994) provided the unambiguous
demonstration that certain venom PLA2s can indeed bind to proteins, in addition to their known binding properties to phospholipid membranes. I believe these experiments brought to the venom PLA2 field the general idea that PLA2 proteins can exert their multiple effects by acting at the molecular level not only as enzymes acting on lipids, but also as ligands, interacting with proteins. The subsequent work performed in our laboratory and others has now shown that sPLA2s can bind to multiple membrane-bound and soluble proteins. The molecular diversity of venom PLA2s and the discovery of binding proteins for these latter were also paving the way for the discovery of structurally homologous mammalian sPLA2s which now comprise a family of enzymes that likely exert their functions as both enzymes and ligands (Lambeau and Gelb, 2008; Murakami et al., 2010).”

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความเข้าใจที่แม่นยำของ specificity ลักษณะพิเศษที่แสดง โดยพิษงูต่าง ๆ PLA2s ต้องการระบุเป้าหมายของโมเลกุลในเนื้อเยื่อ ในเวลาเมื่อมีการเผยแพร่การศึกษานี้ แบบจำลองได้ถูกตั้งสมมติฐานว่า โดย specificity ผลคาดว่า จะขึ้นอยู่กับการรวมแรงของ PLA2s ให้โปรตีนพิเศษบนเซลล์ผิว (ดูสรุปในกินีและอีวานส์ 1989) และการโต้ตอบที่ยุ่งของพิษบาง PLA2s กับเตรียมเยื่อต่าง ๆ นานาเคยอธิบายไว้ (กินีและอีวานส์, 1989 และอ้างอิง therein) อย่างไรก็ตาม ระบุ และกำหนดลักษณะเช่นโปรตีน "receptors" หรือ "acceptors" สำหรับ PLA2s ได้พิสูจน์ให้เป็นงานท้าทายอย่างมาก Lambeau และเพื่อนร่วมงานที่ Moléculaire สถาบัน de Pharmacologie et Cellulaire โซเฟียของ Antipolis ดำเนินการชุดของการศึกษาที่โดดเด่นในโปรตีนเมมเบรนที่มีความสัมพันธ์สูงต่อ PLA2s พิษจากพิษของงูไท scutellatus (ไทปัน), OS1 และ OS2 ชัดเจนระบุ โปรตีนเหล่านี้อย่างใดอย่างหนึ่งได้ถูกพบบนเซลล์ neuronal ในการศึกษาก่อนหน้านี้ของชุดนี้โปรตีนสอง ลักษณะในบทความนี้เฉพาะ ที่แสดงจะปรากฏในเซลล์ myogenic กระต่าย โปรตีนดังกล่าวได้ในภายหลังชื่อ "N ชนิด" และ "M ชนิด" PLA2s receptors ตามลำดับ ตามจุดเริ่มต้นของโทรศัพท์มือถือ ในงานนี้ โดยใช้การรวมกันของวิธีการ ทันสมัย และคลาสสิก คุณสมบัติทั่วไปของตัวรับกล้ามเนื้อถูกเปิดเผย ซึ่งผูกไว้โดยเฉพาะสารพิษ PLA2 กับ dissociation คงในช่วง picomolar ต่ำ นอกจากนี้ โปรตีนใหม่ระบุ "M-ชนิด" ถูกเรียบร้อยบริสุทธิ์เพื่อ homogeneity โดยการขั้นตอนความสัมพันธ์ chromatography และ reconstituted เป็น liposomes ซึ่งดัง มาผูกสูงเฉพาะจุ PLA2s แม้ว่าตัวเลขด้านความสำคัญในบทบาทหน้าที่ของเมมเบรน PLA2 receptors ยังคงยังคงเป็น elucidated ผลการวิจัยของ Lambeau และ coauthors ให้การสาธิตทดลองโดยตรงสำหรับรูปแบบการนำเสนอบน specificity ของพิษ PLA2s หลักการมีนัยกว้างเข้าใจกลไกความหลากหลายของการดำเนินการ นอกจากนี้ สังเกตต่อมาในการรวมแรงของบาง PLA2s mammalian กับ receptors ที่ค้นพบครั้งแรก โดยใช้พิษงู PLA2s ได้เน้นสำรวจฟังก์ชันนวนิยายสรีรวิทยาของเอนไซม์อดีต เป็นอิสระจากกิจกรรมของตัวเร่งปฏิกิริยาต่อไปนี้เป็นบัญชีส่วนบุคคลขึ้นโดย Gérard Lambeau: "ในปลาย 80s' ถูกแล้วเรียกว่า งูดีประกอบด้วยหลากหลายขนาดใหญ่ของ PLA2 เอนไซม์ น่าอัศจรรย์ เฉพาะชุดย่อยของเอนไซม์เหล่านี้สามารถก่อให้เกิดความหลากหลายของอาการทางพยาธิวิทยาในสัตว์ แม้ว่า พวกเขาทั้งหมดใช้คุณสมบัติทั่วไปตัวเร่งปฏิกิริยาและลักษณะโครงสร้างคล้ายกัน แบบสมมุตินั้นได้ถูกนำเสนอ โดยกินีและอีแวนส์ (1989) พยายามอธิบายวิธีระบุผล pharmacological, presynaptic neurotoxicity, cardiotoxicity, myotoxicity, anticoagulant และผลเกล็ดเลือดจะจัดแสดง โดยเอนไซม์ PLA2 พิษ รุ่นนี้ถูกคาดการณ์ระบุทาร์-เลี่ยงการเป็นพิษ และ pharmacologically ใช้งานเอนไซม์ PLA2 เฉพาะเนื้อเยื่อหรือเซลล์เนื่องจากความสัมพันธ์ของพวกเขาสูงต่อโปรตีนเฉพาะ ทางด้านของเรา เรากำลังมองหาการผูกสำหรับบางนวนิยายพิษพิษ PLA2s รวม OS2 (Lambeau et al., 1989) ใช้งูพิษ PLA2s OS1 จบชีวเคมี และ OS2 จากงูไทปันออสเตรเลีย (งูไท scutellatus scutellatus) ได้นำการสาธิตทดลองแรกสำหรับรูปแบบนี้ จริง ใช้วิทยุป้าย OS1 OS2 เราสามารถแสดงครั้งแรกของไซต์ผูกความสัมพันธ์สูงมาก sPLA2s พิษในกล้ามเนื้ออีกที่ที่เรานั้นเรียกว่าตัวรับชนิด M (M สำหรับกล้ามเนื้อ) (Lambeau และ al., 1990) เราสามารถบริสุทธิ์โปรตีนรวม และแสดงว่า มีมวลโมเลกุลของ 180 kDa ทดลองรวมกับโปรตีนบริสุทธิ์กระทบ-stituted เป็น liposomes (Lambeau และ al., 1990), แล้ว โคลน และ recombinant นิพจน์ของตัวรับ (Lambeau et al., 1994) ให้บริการที่ชัดเจนสาธิตที่พิษบาง PLA2s แน่นอนสามารถผูกกับโปรตีน นอกจากคุณสมบัติรวมรู้จักกับสารฟอสโฟลิพิด ผมเชื่อว่า การทดลองเหล่านี้นำไปฟิลด์ PLA2 พิษความคิดทั่วไปว่า โปรตีน PLA2 สามารถสำแดงผลของพวกเขาหลาย โดยทำหน้าที่ในระดับโมเลกุลไม่เพียง เป็นเอนไซม์ที่ทำหน้าที่ในโครงการ แต่ยัง เป็น ligands โต้ตอบกับโปรตีน ดำเนินการในห้องปฏิบัติการของเราและอื่น ๆ งานต่อมาได้ตอนนี้แสดงว่า sPLA2s สามารถผูกกับโปรตีนเมมเบรนแบบผูก และละลายน้ำได้หลาย หลากหลายพิษ PLA2s โมเลกุลและการค้นพบโปรตีนสำหรับเหล่านี้หลังผูกได้ยังปูทางสำหรับการค้นพบ sPLA2s mammalian structurally homologous ซึ่งตอนนี้ มีครอบครัวของเอนไซม์ที่มีแนวโน้มแรงหน้าที่เป็นเอนไซม์และ ligands (Lambeau และ Gelb, 2008 มุราคามิและ al., 2010) "

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความเข้าใจที่ถูกต้องของความจำเพาะของผลกระทบที่แสดงโดย PLA2s พิษงูที่แตกต่างกันต้องมีบัตรประจำตัวของโมเลกุลเป้าหมายของพวกเขาในเนื้อเยื่อ ในช่วงเวลาที่การศึกษาครั้งนี้ได้รับการตีพิมพ์เป็นรูปแบบที่ได้รับการตั้งสมมติฐานอยู่แล้วโดยเฉพาะเจาะจงของผลกระทบที่คาดว่าจะได้รับขึ้นอยู่กับความผูกพันของ PLA2s กับโปรตีนโดยเฉพาะอย่างยิ่งบนผิวเซลล์ที่แข็งแกร่ง (ดูสรุป Kini และอีแวนส์, 1989) และ การทำงานร่วมกันความสัมพันธ์กันสูงของบาง PLA2s พิษที่มีการเตรียมการของเมมเบรนชนิดต่าง ๆ ได้รับการอธิบาย (Kini และอีแวนส์ปี 1989 และการอ้างอิงนั้น) อย่างไรก็ตามการระบุและการพัฒนาการโปรตีนดังกล่าว "รับ" หรือ "ผู้รับ" สำหรับ PLA2s ได้พิสูจน์ให้เป็นงานที่ท้าทายมาก แลมโบและเพื่อนร่วมงานที่ Institut de Pharmacologie moléculaireและ Cellulaire ของ Sophia Antipolis ดำเนินการชุดของการศึกษาที่โดดเด่นในซึ่งโปรตีนเมมเบรนที่มีความสัมพันธ์กันสูงมากต่อการ PLA2s สารพิษจากพิษของ Oxyuranus scutellatus (Taipan) OS1 และ OS2 ถูกระบุไว้อย่างชัดเจน . หนึ่งในโปรตีนเหล่านี้ได้รับการพบในเซลล์ประสาทในการศึกษาก่อนหน้านี้ของชุดนี้.
โปรตีนที่สองโดดเด่นในบทความนี้โดยเฉพาะอย่างยิ่งได้รับการแสดงที่จะมีอยู่ในเซลล์ myogenic กระต่าย โปรตีนดังกล่าวในภายหลังชื่อ "N-พิมพ์" และ "M-พิมพ์" รับ PLA2s ตามลำดับบนพื้นฐานของการกำเนิดของเซลล์ของพวกเขา ในงานนี้โดยใช้การรวมกันของวิธีการคลาสสิกและรัฐของศิลปะคุณสมบัติทั่วไปของรับของกล้ามเนื้อได้รับการเปิดเผยซึ่งผูกพันเฉพาะสารพิษ PLA2 กับค่าคงที่แยกออกจากกันในช่วง picomolar ต่ำ นอกจากนี้ใหม่ระบุ "M-พิมพ์" โปรตีนบริสุทธิ์ประสบความสำเร็จในความเป็นเนื้อเดียวกันด้วยการผสมผสานขั้นตอนโคสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดและสร้างเป็นไลโปโซมซึ่งส่งผลให้กำลังการผลิตที่ได้มามีผลผูกพันเฉพาะเจาะจงสูงสำหรับ PLA2s แม้ว่าจำนวนของด้านที่สำคัญในบทบาทการทำงานของเมมเบรนรับ PLA2 ยังคงที่จะอธิบายผลการวิจัยของแลมโบและ coauthors ให้การสาธิตการทดลองโดยตรงสำหรับรูปแบบที่นำเสนอเกี่ยวกับความจำเพาะของ PLA2s พิษหลักการที่มีผลกระทบในวงกว้างต่อการทำความเข้าใจของพวกเขา กลไกที่มีความหลากหลายของการดำเนินการ นอกจากนี้ข้อสังเกตต่อมาในวันที่มีผลผูกพันที่แข็งแกร่งของบาง PLA2s เลี้ยงลูกด้วยนมที่จะรับค้นพบครั้งแรกโดยใช้ PLA2s พิษงูได้มุ่งเน้นการตรวจสอบข้อเท็จจริงของการทำงานทางสรีรวิทยานวนิยายของเอนไซม์อดีตเป็นอิสระจากการเร่งปฏิกิริยาของพวกเขา.
ต่อไปนี้เป็นบัญชีส่วนบุคคลของงานนี้โดย Gérardแลมโบ "ในช่วงปลายยุค 80 'มันเป็นที่รู้จักอยู่แล้วว่าพิษงูมีความหลากหลายขนาดใหญ่ของเอนไซม์ PLA2 น่าอัศจรรย์เพียงส่วนย่อยของเอนไซม์เหล่านี้สามารถทำให้เกิดความหลากหลายของอาการทางพยาธิวิทยาในสัตว์แม้จะมีความจริงที่ว่าพวกเขาทั้งหมดร่วมกันคุณสมบัติการเร่งปฏิกิริยาทั่วไปและลักษณะโครงสร้างที่คล้ายกัน รูปแบบสมมุติที่ถูกนำเสนอแล้วโดย Kini และอีแวนส์ (1989) พยายามที่จะอธิบายว่าผลทางเภสัชวิทยาที่เฉพาะเจาะจงเช่นพิษต่อระบบประสาท presynaptic, cardiotoxicity, myotoxicity, ยาต้านการแข็งตัวของเกล็ดเลือดและผลกระทบที่จะมีการแสดงโดยพิษเอนไซม์ PLA2 รุ่นนี้ได้รับการทำนาย tar- เฉพาะ Geting ของเอนไซม์ PLA2 เป็นพิษและการใช้งาน pharmacologically กับเนื้อเยื่อหรือเซลล์ที่เฉพาะเจาะจงเนื่องจากความสัมพันธ์ที่สูงของพวกเขาที่มีต่อโปรตีนที่เฉพาะเจาะจง ในด้านของเรา, เรากำลังมองหาผลผูกพันเว็บไซต์สำหรับ PLA2s พิษสารพิษบางนวนิยายรวมถึง OS2 (แลมโบ et al., 1989) การศึกษาทางชีวเคมีของเราโดยใช้พิษงู PLA2s OS1 และ OS2 จากงูไทปันออสเตรเลีย (Oxyuranus scutellatus scutellatus) ถูกนำการสาธิตการทดลองครั้งแรกสำหรับรุ่นนี้ อันที่จริงการใช้ OS1 วิทยุที่ติดฉลากและ OS2 เราสามารถแสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกปรากฏตัวของความสัมพันธ์กันสูงมากมีผลผูกพันเว็บไซต์สำหรับ sPLA2s พิษในกล้ามเนื้อโครงร่างที่เรานั้นเรียกว่า M-ชนิด (M สำหรับกล้ามเนื้อ) รับ (แลมโบและคณะ , 1990) เราสามารถชำระโปรตีนและแสดงให้เห็นว่ามันมีมวลโมเลกุล 180 กิโลดาลตัน ผูกทดลองกับโปรตีน recon- stituted เป็นไลโปโซมบริสุทธิ์ (แลมโบ et al., 1990) และจากนั้นการโคลนและการแสดงออกของตัวรับ recombinant (แลมโบ et al., 1994) ให้ชัดเจน
สาธิตที่ PLA2s พิษบางอย่างแน่นอนสามารถผูกกับ โปรตีนที่นอกเหนือไปจากคุณสมบัติในการจับที่รู้จักกันของพวกเขาที่จะเรียมเยื่อ ผมเชื่อว่าการทดลองเหล่านี้นำมาให้ข้อมูล PLA2 พิษคิดทั่วไปว่าโปรตีน PLA2 สามารถออกแรงผลกระทบหลายของพวกเขาโดยทำหน้าที่ในระดับโมเลกุลไม่เพียง แต่เป็นเอนไซม์ที่ทำหน้าที่เกี่ยวกับไขมัน แต่ยังเป็นแกนด์มีปฏิสัมพันธ์กับโปรตีน ทำงานภายหลังดำเนินการในห้องปฏิบัติการและอื่น ๆ ของเราได้แสดงให้เห็นว่าตอนนี้ sPLA2s สามารถผูกกับหลายผูกพันเยื่อและโปรตีนที่ละลายน้ำได้ ความหลากหลายทางโมเลกุลของ PLA2s พิษและการค้นพบของโปรตีนสำหรับหลังเหล่านี้ก็ยังปูทางสำหรับการค้นพบของ sPLA2s เลี้ยงลูกด้วยนมโครงสร้างคล้ายคลึงกันซึ่งขณะนี้รวมถึงครอบครัวของเอนไซม์ที่อาจออกแรงฟังก์ชั่นของพวกเขาเป็นเอนไซม์และแกนด์ (แลมโบและสีเหลือง, 2008; Murakami et al, 2010) "..

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความเข้าใจที่ชัดเจนของชนิดของผลที่ปรากฏขึ้นโดยแตกต่างกันพิษงู pla2s ต้องกำหนดเป้าหมายของโมเลกุลในเนื้อเยื่อ ในเวลาเมื่อการศึกษานี้ถูกตีพิมพ์ , รูปแบบได้รับการตั้งสมมติฐาน ,โดยเฉพาะผลพบว่าขึ้นอยู่กับความแข็งแรงของ pla2s ผูกพันโปรตีนโดยเฉพาะบนผิวเซลล์ ( ดูรุปในขณะนี้และอีแวนส์ , 1989 ) และสูงจากปฏิสัมพันธ์ของพิษ pla2s กับการเตรียมเยื่อประเภทต่างๆที่ได้อธิบายไว้ ( ปัจจุบัน และอีแวนส์ 1989 อ้างอิง ) อย่างไรก็ตามการระบุและลักษณะโปรตีน " ตัวรับ " หรือ " เปรียบเทียบ " เพื่อ pla2s ได้พิสูจน์แล้วจะเป็นงานที่ท้าทายมาก . แลมบิวและเพื่อนร่วมงานที่ Institut de pharmacologie ไฝ́ culaire et cellulaire antipolis โซเฟีย ,ดำเนินการชุดของการศึกษาที่โดดเด่นที่เมมเบรนโปรตีนมีสูงมาก pla2s affinity ต่อพิษจากพิษของ oxyuranus scutellatus ( ไทปัน ) , os1 os2 และถูกระบุไว้อย่างชัดเจน หนึ่งของโปรตีนเหล่านี้ได้ถูกพบในลักษณะเซลล์ในการศึกษาก่อนหน้าของชุดนี้ .
โปรตีนสองลักษณะในบทความนี้โดยเฉพาะแสดงเป็นปัจจุบันในเซลล์ myogenic กระต่าย โปรตีนดังกล่าวต่อมาในชื่อ " ทั่วไป " และ " ประเภท " pla2s receptors ) บนพื้นฐานของกำเนิดเซลล์ ในงานนี้ โดยการใช้การรวมกันของวิธีการคลาสสิกและทันสมัย คุณสมบัติทั่วไปของกล้ามเนื้อรับถูกเปิดเผยโดยเฉพาะผูก pla2 สารพิษกับค่าคงที่การแตกตัวในช่วง picomolar ต่ำ นอกจากนี้ ระบุ " ใหม่ประเภท " โปรตีนบริสุทธิ์วิธีการประสบความสำเร็จโดยการรวมกันของขี้รังแคขั้นตอน และสร้างในไลโปโซมซึ่งจึงได้รับการจับสำหรับ pla2s ความจุสูงที่เฉพาะเจาะจง .แม้ว่าจำนวนของลักษณะที่สำคัญในบทบาทการทำงานของเยื่อหุ้ม pla2 ตัวรับยังคงต้องทำการผล Lambeau coauthors สาธิตทดลองและบริการโดยตรงสำหรับการนำเสนอรูปแบบเฉพาะของ pla2s เป็นพิษเป็นหลักที่มีความหมายคร่าว ๆเพื่อเข้าใจกลไกของพวกเขามีความหลากหลายของการกระทำ นอกจากนี้ข้อสังเกตที่ตามมาในบางเขต pla2s แข็งแรงผูกกับตัวรับค้นพบครั้งแรกโดยใช้พิษงู pla2s ได้มุ่งเน้นการสำรวจของนวนิยายทางสรีรวิทยาการทำงานของเอนไซม์อิสระ อดีตของฤทธิ์ของตน .
ต่อไปนี้เป็นบัญชีส่วนบุคคลของงานนี้ โดย GE ́ rard Lambeau : " ในช่วงปลายยุค 80 'มันเป็นที่รู้จักว่าพิษงูมีความหลากหลายขนาดใหญ่ของ pla2 เอนไซม์ น่าอัศจรรย์ เฉพาะชุดย่อยของเอนไซม์เหล่านี้สามารถก่อให้เกิดความหลากหลายของอาการโรคในสัตว์ แม้จะมีความจริงที่ว่าพวกเขาทั้งหมดร่วมกันทั่วไปคุณสมบัติการเร่งปฏิกิริยาและคุณสมบัติของโครงสร้างที่คล้ายคลึงกันรูปแบบสมมุติถูกนำเสนอโดยขณะนี้ และ Evans ( 1989 ) พยายามอธิบายวิธีการเฉพาะ ฤทธิ์ทางเภสัชวิทยา เช่น presynaptic ประ myotoxicity พิษต่อหัวใจ , , , และผลเลือด เกล็ดเลือดจะจัดแสดงด้วยพิษ pla2 เอนไซม์รุ่นนี้ใช้เฉพาะทาร์ - ได้ของสารพิษและเอนไซม์ที่ใช้งาน pla2 เภสัชศาสตร์เฉพาะเนื้อเยื่อหรือเซลล์เนื่องจากมีความสัมพันธ์สูงต่อโปรตีนที่เฉพาะเจาะจง ในด้านของเรา เรากำลังมองหาเว็บไซต์ผูกพันสำหรับนิยายพิษพิษ pla2s รวมทั้ง os2 ( Lambeau et al . , 1989 )การศึกษาทางชีวเคมีโดยใช้พิษงูและ pla2s os1 os2 จากงู Taipan ออสเตรเลีย ( oxyuranus scutellatus scutellatus ) คือนำการทดลองการสาธิตครั้งแรกสำหรับรุ่นนี้ แน่นอน ใช้ วิทยุ ป้าย และ os2 os1 ,เราสามารถแสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกมี affinity สูงมากผูกพันเว็บไซต์พิษ spla2s ในกล้ามเนื้อกระดูกที่เราเรียกว่าประเภท ( สำหรับกล้ามเนื้อ ) รีเซพเตอร์ ( Lambeau et al . , 1990 ) เราได้โปรตีนบริสุทธิ์ และแสดงให้เห็นว่ามันมีมวลโมเลกุล 180 กิโลดาลตัน การจับกับโปรตีนการทดลอง Recon - stituted ในไลโปโซม ( Lambeau et al . , 1990 )แล้วการโคลนและการแสดงออกของยีนตัวรับ ( Lambeau et al . , 1994 ) ให้ชัดเจน
สาธิตบางพิษ pla2s แน่นอนสามารถผูกกับโปรตีน นอกจากรู้ผูกคุณสมบัติของฟอสโฟลิปิดเยื่อ