In the present work, a method for t

In the present work, a method for the quantification of milk
contamination in bakery products by mass spectrometry is
proposed. To validate this method, incurred cookies were spiked
with different amounts of skimmed powdered milk (SRM-1549)
and baked. The method was developed on baked cookies to take
into account any contamination occurring either before, during
or after processing and moreover in order to consider any allergens
modification occurring during processing to better simulate what
happens to the equivalent commercial products. Proteins were
extracted and digested by trypsin and finally the tryptic peptide
mixtures were analysed by LC–MS/MS (Fig. 1).
After a preliminary characterisation of milk test material (SRM-
1549) by auto-MS/MS analyses, the same experiment was set up
on contaminated cookies spiked with 150 ppm of milk (FC150ppm).
The MS/MS data were fed to the Mascot engine to screen the NCBI
database. Protein identification was achieved by setting ‘‘Other
mammalian” as the taxonomy parameter to force the system to
search among animal proteins. Milk proteins were easily identified
both in the test material and in the cookies at this level of contamination
(150 ppm). Surprisingly no peptides from the milk blactoglobulin,
the best candidate from the SRM-1549 analysis in
terms of peptide abundance (data not shown), were detected in
the spiked cookies. This evidence suggests that the heat treatment
could affect extraction and/or digestibility of the b-lactoglobulin,
resulting in the masking of its presence (Chevalier & Kelly, 2010).
Among the identified milk proteins, a-s1 casein gave the best
MS/MS signals, especially in terms of sensitivity, being the most
abundant protein in milk (32% of all caseins, a class counting 80%
of the total proteins in cow milk) (Wal, 2004). For this reason, as1
casein was selected as the target protein. Furthermore, a-s1
casein lacks cysteines, making the digest protocol extremely easy
because no reduction or alkylation steps are needed. Actually, the
alkylation step may reduce reproducibility and protein recovery
by increasing the peptide variability that could increase MS signal
scattering.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในงานนำเสนอ วิธีการนับของนมมีการปนเปื้อนในผลิตภัณฑ์เบเกอรี่โดยรเมทการนำเสนอ มี spiked คุกกี้ตกลงเพื่อตรวจสอบวิธีนี้มียอดเงินแตกต่างกันของเอานมผง (SRM-1549)และอบ วิธีการถูกพัฒนาบนคุกกี้อบจะเข้าบัญชีปนเปื้อนใด ๆ ที่เกิดขึ้นทั้งก่อน ระหว่างหรือหลัง จากการประมวลผล และนอกจากนี้การพิจารณาใด ๆ สารก่อภูมิแพ้จำลองการเปลี่ยนแปลงที่เกิดขึ้นระหว่างการประมวลผลเพื่ออะไรเกิดขึ้นกับผลิตภัณฑ์พาณิชย์เทียบเท่า โปรตีนได้แยก และย่อยทริปซินและสุดท้ายเพปไทด์ trypticน้ำยาผสมถูก analysed โดย LC – MS/MS (Fig. 1)ทดสอบวัสดุ (SRM-หลังจากตรวจลักษณะเฉพาะของเบื้องต้นของน้ำนม1549) โดยวิเคราะห์อัตโนมัติ-MS/MS ทดลองเดียวกันถูกตั้งค่าไว้ในคุกกี้ปนเปื้อน spiked กับ 150 ppm ของน้ำนม (FC150ppm)ข้อมูล MS/MS ได้ติดตามโปรแกรมแมสคอทกับหน้าจอ NCBIฐานข้อมูล สำเร็จ โดยการตั้งค่ารหัสโปรตีนนิ้วอื่น ๆmammalian"เป็นพารามิเตอร์ระบบจะบังคับให้ระบบค้นหาโปรตีนสัตว์ ได้ระบุโปรตีนนมทั้ง ในวัสดุทดสอบ และคุกกี้นี้ระดับการปนเปื้อน(150 ppm) จู่ ๆ ไม่เปปไทด์จากนม blactoglobulinผู้สมัครที่สุดจากการวิเคราะห์ SRM 1549 ในตรวจพบในเงื่อนไขของเพปไทด์ที่อุดมสมบูรณ์ (ข้อมูลไม่แสดง),คุกกี้ถูกแทง หลักฐานนี้แนะนำที่รักษาความร้อนอาจมีผลต่อการสกัดหรือ digestibility b-lactoglobulinเกิดในกระดาษกาวของบำรุง (เชวาเลียและเคลลี่ 2010)ระหว่างโปรตีนนมที่ระบุ เคซีนเป็น s1 ให้ราคาดีสุดMS/MS สัญญาณ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในด้านความไว ถูกที่สุดโปรตีนในนม (32% ของทั้งหมด caseins คลานับ 80% อุดมสมบูรณ์ของโปรตีนรวมในน้ำนมวัว) (หยั่นหวอหยุ่น 2004) ด้วยเหตุนี้ as1เลือกเคซีนเป็นโปรตีนเป้าหมาย นอกจากนี้ เป็น s1เคซีนขาด cysteines ทำให้โพรโทคอลแยกย่อยง่ายมากเนื่องจากขั้นตอนการลดหรือการ alkylation ไม่มีความจำเป็น จริง การขั้นตอนการ alkylation อาจลดกู้ reproducibility และโปรตีนโดยการเพิ่มความแปรผันของเพปไทด์ที่สามารถเพิ่ม MS สัญญาณโปรยไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการทำงานในปัจจุบันวิธีการปริมาณของนมปนเปื้อนในผลิตภัณฑ์เบเกอรี่โดยมวลสารจะเสนอ ในการตรวจสอบวิธีการนี้เกิดขึ้นคุกกี้ถูกแทงที่มีจำนวนแตกต่างกันของนมผงพร่องมันเนย (SRM-1549) และอบ วิธีการที่ได้รับการพัฒนาเกี่ยวกับคุกกี้อบที่จะนำเข้าบัญชีการปนเปื้อนใด ๆ ที่เกิดขึ้นทั้งก่อนระหว่างหรือหลังการประมวลผลและยิ่งกว่านั้นเพื่อพิจารณาสารก่อภูมิแพ้ใดๆการปรับเปลี่ยนที่เกิดขึ้นระหว่างการประมวลผลที่ดีกว่าการจำลองสิ่งที่เกิดขึ้นกับผลิตภัณฑ์ในเชิงพาณิชย์เทียบเท่า โปรตีนที่ถูกสกัดและย่อยโดย trypsin และในที่สุดก็เปปไทด์ tryptic ผสมวิเคราะห์ LC-MS / MS (รูปที่ 1).. หลังจากที่มีลักษณะเบื้องต้นของการทดสอบวัสดุนม (SRM- 1549) โดยอัตโนมัติ-MS / MS วิเคราะห์เดียวกัน การทดลองได้ถูกจัดตั้งขึ้นในคุกกี้ที่ปนเปื้อนถูกแทง150 ppm ของนม (FC150ppm). ข้อมูล MS / MS ถูกป้อนให้กับเครื่องยนต์มิ่งขวัญไปยังหน้าจอ NCBI ฐานข้อมูล การระบุโปรตีนก็ประสบความสำเร็จโดยการตั้งค่า '' อื่น ๆเลี้ยงลูกด้วยนม "เป็นพารามิเตอร์อนุกรมวิธานเพื่อบังคับให้ระบบที่จะค้นหาในหมู่โปรตีนจากสัตว์ โปรตีนนมถูกระบุได้อย่างง่ายดายทั้งในการทดสอบวัสดุและคุกกี้ที่ระดับการปนเปื้อนนี้(150 ppm) น่าแปลกที่เปปไทด์จาก blactoglobulin นมผู้สมัครที่ดีที่สุดจากการวิเคราะห์SRM-1549 ในแง่ของความอุดมสมบูรณ์เปปไทด์(ไม่ได้แสดงข้อมูล) ถูกตรวจพบในคุกกี้ได้ถูกแทง หลักฐานนี้แสดงให้เห็นว่าการรักษาความร้อนอาจมีผลต่อการสกัดและ / หรือการย่อยของ B-lactoglobulin, ผลในการกำบังจากการปรากฏตัวของมัน (อัศวินและเคลลี่, 2010). ท่ามกลางโปรตีนนมระบุเคซีน-s1 ให้ดีที่สุดMS / สัญญาณ MS โดยเฉพาะอย่างยิ่งในแง่ของความไวมากที่สุดเป็นโปรตีนที่อุดมสมบูรณ์ในนม(32% ของ caseins ทุกระดับนับ 80% ของโปรตีนรวมในนมวัว) (วอล, 2004) ด้วยเหตุนี้ AS1 เคซีนได้รับเลือกเป็นโปรตีนเป้าหมาย นอกจากนี้-s1 เคซีนขาด cysteines ทำให้โปรโตคอลย่อยง่ายมากเพราะไม่มีการลดขั้นตอนหรือalkylation ที่มีความจำเป็น ที่จริงขั้นตอน alkylation อาจลดการทำสำเนาและการกู้คืนโปรตีนโดยการเพิ่มความแปรปรวนเปปไทด์ที่สามารถเพิ่มสัญญาณMS กระเจิง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

พอแล้วสำหรับฉัน