Simple, fast and highly sensitive detection of certain DNA sequences has become increasingly important in the field of drug development, clinical diagnosis and environmental science (Daar and Thorsteinsdottir, 2002; Rosi and Giljohann, 2006; Duan and Liu, 2010). Much effort has been made to develop sensitive and selective DNA assay. Among them, traditional techniques, includ- ing fluorescence, colorimetry, electrochemistry, surface enhanced Raman scattering (SERS), surface plasmon and light scattering and force, are employed (Stoeva and Lee, 2006; Fabris and Dante, 2007; Nakayama and Yan, 2008; Hong and Zhou, 2009; Nakayama and Sintim, 2009; Zhang and Wang, 2009; Barhoumi and Halas, 2010; Li and Deng, 2010; Xia and White, 2010; Wu and Wang, 2011; Zhu and Liu, 2011). The detection of limit is low enough for routine detection. However, most of the traditional techniques are expensive, which is not easily available to the public. What is more, sophisticated instrument and operations are required in those methods, which have limited its application. Some fluores- cent and colorimetric methods have been developed for DNA detection by using only naked eyes. However, only qualitative or
n Corresponding author.
E-mail address: xuxuetao201405@163.com (X. Xue-tao).
http://dx.doi.org/10.1016/j.bios.2014.09.094
0956-5663/& 2014 Elsevier B.V. All rights reserved.
abstract
A portable and sensitive quantitative DNA detection method based on personal glucose meters and isothermal circular strand-displacement polymerization reaction was developed. The target DNA triggered target recycling process, which opened capture DNA. The released target then found another capture DNA to trigger another polymerization cycle, which was repeated for many rounds, resulting in the multiplication of the DNA–invertase conjugation on the surface of Streptavidin-MNBs. The DNA– invertase was used to catalyze the hydrolysis of sucrose into glucose for PGM readout. There was a liner relationship between the signal of PGM and the concentration of target DNA in the range of 5.0 to 1000 fM, which is lower than some DNA detection method. In addition, the method exhibited excellent sequence selectivity and there was almost no effect of biological complex to the detection performance, which suggested our method can be successfully applied to DNA detection in real biological samples.
& 2014 Elsevier B.V. All rights reserved.
semi-quantitative detections can be conducted and the color observation may be affected by many conditions, such as tem- perature, humidity, the laboratory technicians and light contrast of the surroundings, which have limited its wider application. In order to obtain portable and quantitative DNA detection methods by using naked eyes, expensive or customized portable spectro- meters are still needed. Therefore, it is still a great challenge to develop portable and quantitative DNA detection method which is easily available to the public and with accessible resources at home.
ตรวจง่าย รวดเร็ว และมีความไวสูงบางลำดับดีเอ็นเอได้กลายเป็นสิ่งสำคัญมากในด้านการพัฒนายาเสพติด การวินิจฉัยทางคลินิก และวิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม (สนพ.ดารและ Thorsteinsdottir, 2002 Rosi และ Giljohann, 2006 ด้วนแล้วหลิว 2010) ได้ข้อมูลพัฒนาวิเคราะห์ดีเอ็นเอที่สำคัญ และใช้ความพยายามมาก ระหว่างเทคนิคดั้งเดิม พวกเขา รวมกำลัง fluorescence, colorimetry ไฟฟ้าเคมี พื้นผิวเพิ่มรามัน scattering (แคมป์ส์อีลีสซี), plasmon พื้นผิว และแสงที่ไปกระทบ และแรง มีเจ้าของ (Stoeva Lee, 2006 Fabris และ Dante, 2007 นะกะยะมะและยาน 2008 Hong และโจว 2009 นะกะยะมะและ Sintim, 2009 จางและวัง 2009 Barhoumi และ Halas, 2010 หลี่และเต็ง 2010 เซียะและขาว 2010 วูและวัง 2011 ซูแล้วหลิว 2011) การตรวจพบขีดจำกัดต่ำสุดเพียงพอสำหรับการตรวจสอบประจำได้ อย่างไรก็ตาม เทคนิคแบบดั้งเดิมส่วนใหญ่มีราคาแพง ซึ่งไม่ใช่เพื่อประชาชน เครื่องมือทันสมัย เพิ่มเติมและการดำเนินงานจำเป็นในวิธีเหล่านั้น ซึ่งได้รับการจำกัดโปรแกรมประยุกต์ของ ร้อยละ fluores และวิธีการเทียบเคียงบางอย่างได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจหาดีเอ็นเอ โดยใช้ตาเปล่า อย่างไรก็ตาม เชิงคุณภาพเท่านั้น หรือn ผู้ Correspondingที่อยู่อีเมล์: xuxuetao201405@163.com (x. อัพไลท์ซิวเต่า)http://dx.doi.org/10.1016/j.bios.2014.09.0940956-5663 / และ 2014 Elsevier b.v สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมดบทคัดย่อแบบพกพา และมีความสำคัญเชิงปริมาณดีเอ็นเอตรวจสอบวิธีการใช้กลูโคสส่วนบุคคลเมตร และปฏิกิริยา polymerization isothermal กลมสาระปริมาณกระบอกสูบได้รับการพัฒนา ดีเอ็นเอเป้าหมายทริกเกอร์เป้าหมายกระบวนการ ซึ่งเปิดจับดีเอ็นเอรีไซเคิล เป้าหมายออกแล้วพบดีเอ็นเอจับอื่นเพื่อทริกเกอร์อื่น polymerization วงจร ซึ่งไม่ซ้ำกันในรอบหลาย เป็นผลคูณของ conjugation DNA – invertase บนพื้นผิวของ Streptavidin MNBs ดีเอ็นเอ – invertase ที่ใช้สถาบันไฮโตรไลซ์ของซูโครสเป็นน้ำตาลกลูโคสสำหรับ PGM readout มีความสัมพันธ์ที่ซับระหว่างสัญญาณของ PGM และความเข้มข้นของดีเอ็นเอเป้าหมายในช่วง 5.0-1000 fM ซึ่งจะต่ำกว่าวิธีการตรวจหาดีเอ็นเอบาง วิธีการจัดแสดงวิธีลำดับดี และมีเกือบจะไม่มีผลเชิงชีวภาพเพื่อตรวจสอบประสิทธิภาพการทำงาน ที่แนะนำวิธีการของเราสำเร็จใช้ตรวจดีเอ็นเอในตัวอย่างชีวภาพอย่างแท้จริงและปี 2014 Elsevier b.v สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมดสามารถดำเนินการเชิงกึ่งปริมาณ detections และสังเกตสีอาจได้รับผลกระทบจากเงื่อนไข perature ยการ ความชื้น ช่างเทคนิคห้องปฏิบัติการ และความเปรียบต่างแสงของสภาพแวดล้อม ซึ่งมีจำกัดความกว้าง เพื่อให้ได้วิธีตรวจหาดีเอ็นเอแบบพกพา และเชิงปริมาณ โดยใช้ตาเปล่า แพง หรือที่กำหนดเองแบบพกพา spectro-เมตรก็เพิ่ม ดังนั้น ก็ยังคงท้าทายสำหรับพัฒนาแบบพกพา และเชิงปริมาณดีเอ็นเอตรวจสอบวิธีซึ่งใช้ได้ง่าย สู่สาธารณะ และสามารถเข้าถึงทรัพยากรที่บ้าน
การแปล กรุณารอสักครู่..

ง่ายรวดเร็วและการตรวจสอบความไวสูงของลำดับดีเอ็นเอบางอย่างได้กลายเป็นความสำคัญมากขึ้นในด้านการพัฒนายาเสพติด, การวินิจฉัยทางคลินิกและวิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม (Daar และ Thorsteinsdottir 2002; โรซีและ Giljohann 2006; ด้วนและหลิว, 2010) ความพยายามมากได้รับการทำในการพัฒนาการทดสอบดีเอ็นเอที่มีความสำคัญและเลือก ในหมู่พวกเขาเทคนิคแบบดั้งเดิมรวมทั้งในการเรืองแสง, colorimetry ไฟฟ้าพื้นผิวเพิ่มกระเจิงรามัน (SERS) plasmon พื้นผิวและการกระเจิงแสงและแรง, มีการจ้างงาน (Stoeva และลี, 2006; แฟบและ Dante, 2007 และยามายัน 2008; ฮ่องกงและโจว 2009; ยาและ Sintim 2009; Zhang และวัง 2009; Barhoumi และ Halas 2010; Li และเติ้ 2010; Xia และสีขาว, 2010; Wu และวัง, 2011; จู้และหลิว, 2011) . การตรวจสอบของวงเงินต่ำพอสำหรับการตรวจสอบตามปกติ แต่ส่วนใหญ่ของเทคนิคแบบดั้งเดิมมีราคาแพงที่ไม่สามารถใช้งานได้ง่ายเพื่อประชาชน อะไรคือสิ่งที่มีความซับซ้อนและเครื่องมือที่ใช้ในการดำเนินงานที่จำเป็นในวิธีการเหล่านั้นซึ่งมีการ จำกัด การประยุกต์ใช้ บางร้อย fluores- และวิธีการสีได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจหาดีเอ็นเอโดยใช้เพียงตาเปล่า แต่เพียงคุณภาพหรือ
n ผู้รับผิดชอบ.
E-mail address:. xuxuetao201405@163.com (เอ็กซ์ Xue-tao)
http://dx.doi.org/10.1016/j.bios.2014.09.094
0956-5663 / และเอลส์ 2014 BV สงวนลิขสิทธิ์.
นามธรรม
แบบพกพาและที่สำคัญวิธีการตรวจสอบดีเอ็นเอปริมาณขึ้นอยู่กับกลูโคสเมตรส่วนบุคคลและ isothermal วงกลมปฏิกิริยาพอลิเมอสาระแทนที่ได้รับการพัฒนา ดีเอ็นเอเป้าหมายเรียกกระบวนการรีไซเคิลเป้าหมายซึ่งเปิดจับดีเอ็นเอ เป้าหมายการปล่อยตัวออกมาแล้วก็พบว่าดีเอ็นเอจับอื่นที่จะเรียกรอบพอลิเมออื่นซึ่งถูกทำซ้ำหลายรอบผลในการคูณของผันดีเอ็นเออินเวอร์บนพื้นผิวของ Streptavidin-MNBs อินเวอร์ DNA- ถูกใช้ในการกระตุ้นการย่อยสลายน้ำตาลซูโครสเป็นน้ำตาลกลูโคสสำหรับกม PGM มีความสัมพันธ์ระหว่างซับสัญญาณของ PGM และความเข้มข้นของดีเอ็นเอเป้าหมายในช่วง 5.0-1000 เอฟเอ็มซึ่งต่ำกว่าวิธีการตรวจสอบดีเอ็นเอบางส่วน นอกจากนี้วิธีการแสดงการเลือกลำดับที่ดีเยี่ยมและมีเกือบจะไม่มีผลกระทบของความซับซ้อนทางชีวภาพเพื่อการตรวจสอบประสิทธิภาพการทำงานซึ่งชี้ให้เห็นวิธีการของเราสามารถนำมาใช้ประสบความสำเร็จในการตรวจสอบดีเอ็นเอในตัวอย่างทางชีวภาพจริง.
 & 2014 Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์
การตรวจจับกึ่งเชิงปริมาณสามารถดำเนินการและการสังเกตสีอาจได้รับผลกระทบจากสภาพเป็นจำนวนมากเช่น perature tem- ความชื้นช่างเทคนิคในห้องปฏิบัติการและความคมชัดความสว่างของสภาพแวดล้อมที่มีการ จำกัด การประยุกต์กว้าง เพื่อให้ได้แบบพกพาและวิธีการตรวจสอบปริมาณดีเอ็นเอโดยใช้ตาเปล่า, มีราคาแพงหรือที่กำหนดเองเมตร spectro- แบบพกพายังคงมีความจำเป็น ดังนั้นจึงยังคงเป็นความท้าทายที่ดีในการพัฒนาวิธีการตรวจสอบดีเอ็นเอแบบพกพาและเชิงปริมาณซึ่งเป็นอย่างที่มีอยู่ให้ประชาชนและมีทรัพยากรที่สามารถเข้าถึงได้ที่บ้าน
การแปล กรุณารอสักครู่..

ง่ายรวดเร็วและตรวจจับความไวสูงบางลำดับ DNA ได้กลายเป็นสิ่งสำคัญมากขึ้นในด้านของการพัฒนายา การวินิจฉัยทางคลินิกและวิทยาศาสตร์สิ่งแวดล้อม ( นะ และ thorsteinsdottir , 2002 ; โรซี่ และ giljohann , 2006 ; ด้วนและหลิว , 2010 ) ความพยายามมากได้รับการทำเพื่อพัฒนาอารมณ์และการทดสอบดีเอ็นเอที่เลือก ในหมู่พวกเขาดั้งเดิมเทคนิค includ ไอเอ็นจี - การเรืองแสงชีส ไฟฟ้าเคมี พื้นผิวเพิ่มรามันกระจัดกระจาย ( sers ) PLASMON พื้นผิวและการกระจายแสงและการบังคับใช้ ( stoeva และลี , 2006 ; แฟบและดันเต้ , 2007 และ 2008 ; ยัน ; นากายาม่า , ฮง และ โจว , 2009 ; และนากายาม่า sintim , 2009 ; จางและหวัง , 2009 ; และ barhoumi ฮอเลิส , 2010 ; ลี้ และเติ้ง , 2010 ; เซียและสีขาว , 2010 ; Wu และวัง , 2011 ; จูและหลิว , 2011 )การตรวจสอบวงเงินต่ำเพียงพอสำหรับการตรวจสอบตามปกติ แต่ส่วนใหญ่ของเทคนิคแบบดั้งเดิมที่มีราคาแพง ซึ่งไม่ได้เป็นอย่างง่ายดายสามารถใช้ได้ต่อสาธารณชน สิ่งที่เพิ่มเติมคือ การใช้เครื่องมือที่ซับซ้อน และในวิธีการเหล่านั้นซึ่งจะ จำกัด การประยุกต์ใช้ บาง fluores - ร้อยละ 7.4 และได้พัฒนาวิธีการตรวจหาดีเอ็นเอโดยใช้ตาเปล่าแต่ เพียง คุณภาพ หรือที่ผู้เขียน
n .
e - mail address : xuxuetao201405@163.com ( X . Xue เต๋า ) .
http : / / DX ดอย . org / 10.1016 / j.bios . 2014.09.094
0956-5663 / & 2014 นอกจากนี้เท่าสงวนลิขสิทธิ์ นามธรรม
แบบพกพาและปริมาณดีเอ็นเอที่มีวิธีการตรวจยึดเมตรกลูโคสส่วนบุคคล คำนวณเส้นและวงกลมการเกิดปฏิกิริยาคือการพัฒนาดีเอ็นเอเป้าหมาย ทำให้เป้าหมายกระบวนการรีไซเคิล ซึ่งเปิดตัวจับ DNA ออกหมายแล้วเจออีกจับดีเอ็นเอที่จะเรียกอีกแบบวงจรที่ซ้ำสำหรับหลายรอบ เป็นผลคูณของดีเอ็นเอ–เย็น ) บนพื้นผิวของ streptavidin mnbs .ดีเอ็นเอ–เย็นถูกใช้เพื่อเร่งการย่อยสลายของน้ำตาลซูโครส กลูโคส สำหรับการอ่านข้อมูลในการจำแนก . มีซับความสัมพันธ์ระหว่างสัญญาณของ PGM และปริมาณของดีเอ็นเอเป้าหมายในช่วง 5.0 1000 FM ซึ่งน้อยกว่าบางการตรวจดีเอ็นเอวิธี นอกจากนี้วิธีการแสดงการลำดับที่ยอดเยี่ยมและเกือบจะไม่มีผลทางชีวภาพที่ซับซ้อนเพื่อประสิทธิภาพการตรวจหา ซึ่งชี้ให้เห็นวิธีการของเราสามารถใช้เรียบร้อยแล้วเพื่อการตรวจดีเอ็นเอในตัวอย่างชีวภาพจริง
& 2014 นอกจากนี้เท่าสงวนลิขสิทธิ์ .
กึ่งปริมาณการตรวจจับสามารถดำเนินการและสีสังเกตอาจได้รับผลกระทบจากเงื่อนไขหลายเช่น เต็ม - perature , ความชื้น , ห้องปฏิบัติการช่างเทคนิคและความคมชัดความสว่างของสภาพแวดล้อมที่ จำกัด ของมันกว้างใบสมัคร เพื่อให้ได้ปริมาณดีเอ็นเอแบบพกพาและวิธีการตรวจสอบด้วยตาเปล่า แพง หรือ ปรับแต่ง Spectro - พกพาเมตร ยังคงต้องการ ดังนั้นมันยังคงเป็นความท้าทายที่ดีในการพัฒนาแบบพกพาและปริมาณการตรวจดีเอ็นเอวิธี ที่สามารถใช้ได้กับประชาชนและทรัพยากรที่สามารถเข้าถึงได้ในบ้าน
การแปล กรุณารอสักครู่..
