2.4. Isothermal titration calorimet

2.4. Isothermal titration calorimetry (ITC)
Isothermal Titration Calorimetry (ITC) experiments were carried
out at 25 _C on the Nano-ITC II Instruments (TA Instrument).
Prior to analysis, GA, MEGA and PCA were dissolved in 30 mM of
Hepes buffer (containing 100 mM citrate) at pH 7.40, respectively.
The Fe(III)–citrate solution was also in the same buffer. Before each
titration, all solutions were degassed thoroughly under vacuum
with stirring. The solution in the sample cell was stirred at
300 rpm to ensure rapid mixing of the titrant upon injection. Titrations
were performed by an automated sequence of 32 injections,
each of 1.5 ll Fe(III)–citrate titrate into the sample cell containing
190 ll GA/MEGA/PCA, spaced at 360 s intervals to ensure complete
equilibration. A background titration, consisting of the same titrate
solution but only the buffer solution in the sample cell, was subtracted
from each experimental titration to account for heat of
dilution. Three titrations were carried out for each measurement,
and the reported experimental values are the average of individual
best-fit values, fitting with independent binding model in the Nano
Analyze software provided by TA Instruments. Raw data were processed
using the Origin 8.0 software.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การการไทเทรต isothermal calorimetry (ซี)ได้ดำเนินการทดลองการไทเทรต Calorimetry (ซี) isothermalออกที่ _C 25 บนเครื่องมือ II ซีนาโน (TA มือ)ก่อนวิเคราะห์ GA ร็อค และ PCA ได้ละลายใน 30 มม.ของHepes มีบัฟเฟอร์ (มี 100 มม.ซิเตรต) ที่ pH 7.40 ตามลำดับFe (III) -โซลูชันซิเตรตเป็นบัฟเฟอร์เดียวกันยัง ก่อนละการไทเทรต โซลูชั่นทั้งหมดถูก degassed อย่างละเอียดภายใต้สุญญากาศมีกวนด้วย การแก้ไขในเซลล์ตัวอย่างที่กวนที่รอบต่อนาทีที่ 300 ให้ผสมของ titrant เมื่อฉีดอย่างรวดเร็ว Titrationsได้ดำเนินการ โดยการฉีด 32 ลำดับอัตโนมัติละ 1.5 จะ Fe (III) – titrate ซิเตรตเป็นตัวอย่างเซลล์ประกอบด้วย190 จะ GA/ร็อค/PCA ระยะห่างที่ 360 s ช่วงให้เสร็จสมบูรณ์equilibration เป็นการไทเทรตพื้นหลัง titrate เดียวกันประกอบด้วยแก้ปัญหาแต่เฉพาะโซลูชันบัฟเฟอร์ในเซลล์ตัวอย่าง ถูกลบจากการไทเทรตแต่ละทดลองให้ความร้อนของเจือจาง Titrations สามได้ดำเนินการสำหรับแต่ละการประเมินและค่าทดลองรายงาน ค่าเฉลี่ยของแต่ละบุคคลค่าที่ดีที่สุดพอดี เหมาะสมกับรูปแบบอิสระผูกในนาโนวิเคราะห์โดยเครื่องมือ TA ซอฟต์แวร์ มีการประมวลผลข้อมูลดิบใช้ซอฟต์แวร์กำเนิด 8.0

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 calorimetry ไทเทรต isothermal (ITC)
Isothermal Titration Calorimetry (ITC) ทดลองศึกษา
ออกที่ 25 _C ในนาโน ITC ครั้งที่สองเครื่องมือ (TA เครื่อง)
ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์, GA, MEGA และ PCA ถูกกลืนหายไปใน 30 มิลลิเมตรของ
บัฟเฟอร์ HEPES (ที่มี 100 มิลลิซิเตรต) ที่พีเอช 7.40 ตามลำดับ
Fe (III) การแก้ปัญหา -citrate ยังอยู่ในบัฟเฟอร์เดียวกัน ก่อนที่แต่ละ
การไตเตรทโซลูชั่นทั้งหมดถูกกำจัดก๊าซอย่างทั่วถึงภายใต้สูญญากาศ
ที่มีการกวน การแก้ปัญหาในเซลล์ตัวอย่างที่ได้รับการขยับที่
300 รอบต่อนาทีเพื่อให้แน่ใจว่าการผสมอย่างรวดเร็วของตัวไตเตรทเมื่อฉีด การไตเตรท
ได้ดำเนินการโดยลำดับอัตโนมัติของ 32 ฉีด
แต่ละ 1.5 LL Fe (III) -citrate ไทเทรตเข้าไปในเซลล์ตัวอย่างที่มี
190 LL GA / MEGA / PCA ระยะห่างที่ 360 S ช่วงเวลาเพื่อให้แน่ใจว่าสมบูรณ์
สมดุล การไตเตรทพื้นหลังประกอบด้วย TITRATE เดียวกัน
การแก้ปัญหา แต่เพียงสารละลายบัฟเฟอร์ในเซลล์ตัวอย่างมาหักออก
จากกันการไตเตรททดลองบัญชีสำหรับความร้อนของ
การลดสัดส่วน สามการไตเตรทได้ดำเนินการสำหรับแต่ละวัด
และค่านิยมของการทดลองที่มีการรายงานเป็นค่าเฉลี่ยของแต่ละ
ค่าที่ดีที่สุดพอดีเหมาะสมกับรูปแบบการเชื่อมโยงที่เป็นอิสระในนาโน
ซอฟแวร์วิเคราะห์โดย TA เครื่องมือ ข้อมูลดิบที่ถูกประมวลผล
โดยใช้แหล่งกำเนิด 8.0 ซอฟแวร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . อุปกรณ์ควบคุมอุณหภูมิ ( ITC ) การไทเทรตการไทเทรต
ความร้อนคงที่ ( ITC ) การทดลอง
ที่ 25 _c บนนาโน ITC 2 เครื่อง ( ตาเครื่องดนตรี ) .
ก่อนการวิเคราะห์ , GA , ร็อคและ PCA ถูกละลายใน 30 mm
ฮีเปสบัฟเฟอร์ ( ( 100 มม. ซิเตรต ) ที่พีเอช 7.40 ตามลำดับ
เหล็ก ( III ) และซิเตรทสารละลายอยู่ในบัฟเฟอร์เดียวกัน ก่อนการไทเทรตแต่ละ
,ทั้งหมดโซลูชั่น degassed อย่างละเอียดภายใต้สูญญากาศ
ด้วยความตื่นเต้น โซลูชั่นในตัวอย่างเซลล์จะกวน
300 รอบต่อนาที เพื่อให้แน่ใจว่า การกวนเร็วของไทแทรนต์เมื่อฉีด titrations
ถูกแสดงโดยอัตโนมัติลำดับ 32 injections
แต่ละ 1.5 จะ Fe ( III ) และซิเตรทไตเตรทในตัวอย่างเซลล์ที่ประกอบด้วย
190 จะ GA / ร็อค / PCA เว้นระยะที่ 360 ของช่วงเวลาเพื่อให้แน่ใจว่า equilibration สมบูรณ์

พื้นหลังไทเทรต ประกอบด้วย สารละลายไทเทรต
เดียวกันแต่สารละลายบัฟเฟอร์ในตัวอย่างเซลล์ถูกหักออกจากบัญชี
ทดลองแต่ละที่มีความร้อนของ
เจือจาง 3 titrations ทดลองแต่ละวัด
และรายงานการทดลองที่ค่าเฉลี่ยของแต่ละบุคคล
พอดีค่า เหมาะสมกับรูปแบบในนาโน
อิสระผูกวิเคราะห์ซอฟต์แวร์ให้ใช้ทา ข้อมูลที่ถูกประมวลผลโดยใช้ซอฟต์แวร์ของประเทศ

8.0 .