For both isolation and culture of t

For both isolation and culture of the microspores, a filter sterilized
Nitsch and Nitsch (1967) medium, as modified by Lichter (1981) and
by Takahata and Keller (1991) with 9% sucrose (NLN-9), at pH 5.8 was
used. After heat treatment for seven days, the swollen anthers were
chosen, mixed with NLN-9 medium and immediately extrusion
with glass rod to isolate microspores. Microspores suspension was
obtained by filtration through 150 μm nylon screens. This suspension was centrifuged 3 times at 500 rpm for 5 min and resuspended in NLN-
9 medium. The microspore density was adjusted to 8 × 104–10 × 104
per ml. Isolated microspores were cultured in 60 mm Petri dishes containing
2 ml microspore suspension.
The cultures were incubated at 28 °C with 80% air humidity and
maintained in the dark for three weeks, and then transferred to a gyratory
shaker agitating at 60 rpm in darkness at 28 °C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกและวัฒนธรรมของการ microspores ตัวกรอง sterilizedNitsch และ Nitsch (1967) กลาง แก้ไข โดย Lichter (1981) และโดย Takahata และเคลเลอร์ (1991) กับ 9% ซูโครส (NLN-9), ที่ค่า pH 5.8 ได้ใช้ หลังจากชุบ 7 วัน เหมือนบวมได้เลือก ผสมกับกลาง NLN-9 และทันทีผงมีรอดแก้วจะแยก microspores Microspores ระงับได้ได้ โดยการกรองผ่านหน้าจอ 150 μm ไนล่อน ระบบกันสะเทือนนี้ centrifuged 3 ครั้งที่ 500 รอบต่อนาทีในนาทีที่ 5 และ resuspended ใน NLNปานกลาง 9 ความหนาแน่น microspore ถูกปรับ 8 × 104-10 × 104ต่อ ml. Isolated microspores มีอ่างในจาน Petri 60 มม.ประกอบด้วย2 ml microspore ระงับวัฒนธรรมถูก incubated ที่ 28 ° C มีความชื้นในอากาศ 80% และเก็บในมืดในช่วงสามสัปดาห์ แล้ว โอนย้ายไปที่ gyratoryเชคเกอร์ agitating ที่ 60 รอบต่อนาทีในความมืดที่ 28 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทั้งการแยกและวัฒนธรรมของ microspores ตัวกรองฆ่าเชื้อ
Nitsch และ Nitsch (1967) ขนาดกลางเช่นการแก้ไขโดย Lichter (1981) และ
โดยทาคาฮาทาและเคลเลอร์ (1991) กับ 9% ซูโครส (NLN-9) ที่ pH 5.8 ที่ถูก
นำมาใช้ . หลังจากการรักษาความร้อนเป็นเวลาเจ็ดวัน, อับเรณูบวมถูก
เลือกผสมกับสื่อ NLN-9 และทันทีที่การอัดขึ้นรูป
ด้วยไม้แก้วเพื่อแยก microspores ระงับ microspores ถูก
ได้รับโดยการกรองผ่าน 150 ไมโครเมตรหน้าจอไนลอน ระงับนี้ถูกปั่น 3 ครั้งที่ 500 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาทีและ resuspended ใน NLN-
9 กลาง ความหนาแน่น microspore ได้รับการปรับให้ 8 × 104-10 × 104
ต่อมิลลิลิตร microspores แยกมาเพาะเลี้ยงใน 60 มิลลิเมตรจานเลี้ยงเชื้อที่มี
2 มิลลิลิตรระงับ microspore.
วัฒนธรรมได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 28 ° C 80% ความชื้นในอากาศและ
เก็บรักษาไว้ในที่มืดเป็นเวลาสามสัปดาห์และจากนั้นก็ย้ายไปเป็นแบบหมุน
ปั่นก่อกวนที่ 60 รอบต่อนาทีในความมืด วันที่ 28 ° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สำหรับการแยกและการเพาะเลี้ยงของละอองเกสร กรองและฆ่าเชื้อ
nitsch nitsch ( 1967 ) กลาง เช่น การ lichter ( 1981 ) และ
โดย ทาคาฮาตะ และเคลเลอร์ ( 1991 ) 9 % ซูโครส ( nln-9 ) ที่ pH 5.8 คือ
ใช้ . หลังการรักษาความร้อนสำหรับเจ็ดวัน อับเรณูบวมอยู่
เลือกผสมกับ nln-9 ขนาดกลางและทันทีรีด
ด้วยแท่งแก้วเพื่อแยกข้าว . ถูกระงับ
ข้าวที่ได้จากการกรองผ่าน 150 μ M ไนลอนหน้าจอ นี้ถูกระงับระดับ 3 ครั้ง 500 รอบต่อนาที เป็นเวลา 5 นาที และ resuspended ใน nln -
9 ) การเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่นปรับ 8 × 104 – 10 × 104
ต่อมิลลิลิตรแยกละอองเกสรเพาะเลี้ยงในจานเลี้ยงเชื้อที่มี 60 mm
2 ml ละอองเกสรช่วงล่าง
วัฒนธรรมอุณหภูมิ 28 องศาองศาเซลเซียส ความชื้นในอากาศและ
80%รักษาในที่มืดเป็นเวลา 3 สัปดาห์ และจากนั้นย้ายไป gyratory
เขย่าก่อกวนที่ 60 รอบต่อนาทีในความมืดที่ 28 องศา