Algae sample and preparation of the

Algae sample and preparation of the extract
Fresh G. changii sample was collected from Pantai Morib,
Selangor Malaysia in January 2003 and authenticated by Prof.
Phang Siew Moi (Institute of Biological Sciences, Faculty of
Science University Malaya, Malaysia). The fresh algae sample
was rinsed with seawater to remove debris and epiphyte before
further washed in fresh water and brushed with soft brush and sun
dried. Approximately, 100 g of dried algae sample was added to
200 ml of methanol and let soaked for 4 days. Removal of dried
algae sample from extract by filtration through cheesecloth, and
the filtrate was further concentrated using a rotary evaporator.
The dried fractions were then re-dissolved in 80% methanol (v/
v) to yield solution containing 1.0, 2.5, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 and
25.0 mg of extract per ml.
Free-radical Scavenging Activity
Quantitative measurement of radical scavenging properties
was carried out in a universal bottle. The reaction mixture
contained 50 μl of test samples (or 80% MeOH as a blank) and
5 ml of a 0.04% (w/v) solution of DPPH in methanol. Different
known antioxidants, vitamin E, and butylated hydroxytoluene
(BHT, Sigma) were used for comparison or as a positive
control.
Discoloration was measured at 517 nm after incubation
for 30 min. Measurements was performed at least in triplicate.
DPPH radical’s concentration was calculated using the
following equation:
DPPH scavenging effect (%) = Ao
– A1
/ Ao
X100
Where Ao
was the absorbance of the control and A1
was the
absorbance in the presence of the sample [9] (crude extract of
G. changii). The actual decrease in absorption induced by the
International Journal of Natural and Engineering Sciences 1 (3): 115-117, 2007
116 S. Sreenivasan et al / IJNES, 1 (3): 115-117, 2007
test compounds was compared with the positive controls. IC50
value was calculated use the dose inhibition curve.
TLC-DPPH separation and determination of radical
scavenging activity
Crude extract of G. changi was subjected to thin layer
chromatography study. The solvent system optimized for G.
changii crude extract was methanol and: Chloroform (85:15
v/v). The plates were developed in an unsaturated chamber to
the distance of 75 mm. After 15 min air-drying, the plates were
sprayed by 0.04% DPPH solution for 5 seconds and images were
observed under visible light at exactly 2 min after spraying. The
area of bright yellow bands against the purple background then
determined radical scavenging activity.
Total phenolic compound analysis
The amount of total phenolics in G. changii extracts was
determined with the Folin-Ciocalteu reagent using the method
of Spanos and Wrolstad [10], as modified by Lister and Wilson
[11]. To 50 ml of each sample (three replicates), 2.5 ml 1/10
dilution of Folin-Ciocalteau’s reagent and 2 ml of Na2CO3
(7.5%, w/v) were added and incubated at 45 o
C for 15 min.
The absorbance of all samples was measured at 765 nm
using a UV–vis spectrophotometer (GAT UV-9100). Results
were expressed as milligrammes of gallic acid (20-50µg/ml;
R2
=0.963) equivalent per gram of dry weight (mg GAE/g dw).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างสาหร่ายและเตรียมการดึงข้อมูลตัวอย่าง changii กรัมสดรวบรวมจากไต Moribมาเลเซีย Selangor ในเดือน 2003 มกราคม และรับรองความถูกต้อง โดยศาสตราจารย์พังงาซิวอย (สถาบันชีวภาพวิทยาศาสตร์ คณะวิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยมาลายา มาเลเซีย) ตัวอย่างสาหร่ายสดมี rinsed ด้วยทะเลเอาเศษและ epiphyte ก่อนหินในน้ำ และขึ้น ด้วยแปรงที่อ่อนนุ่มและอาทิตย์ต่อไปแห้ง ประมาณ 100 กรัมของตัวอย่างสาหร่ายแห้งถูกเพิ่มเข้าไป200 ml ของเมทานอลและให้เปี่ยมล้นไปด้วย 4 วัน เอาของแห้งตัวอย่างสาหร่ายสกัดโดยการกรองผ่าน cheesecloth และสารกรองมีเพิ่มเติม เข้มข้นใช้ evaporator โรตารี่แยกส่วนแห้งได้แล้วใหม่ละลายในเมทานอล 80% (v /v) ให้ผลผลิตโซลูชันที่ประกอบด้วย 1.0, 2.5, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0 และ25.0 มก.สารสกัดต่อมลกิจกรรม Scavenging อนุมูลอิสระวัดเชิงปริมาณของคุณสมบัติ scavenging รุนแรงได้ดำเนินการในขวดสากล ส่วนผสมของปฏิกิริยาประกอบด้วย μl 50 ของตัวอย่างทดสอบ (หรือ 80% ทานอเป็นว่างเปล่า) และml 5 ของโซลูชัน 0.04% (w/v) ของ DPPH ในเมทานอล แตกต่างกันรู้จักสารต้านอนุมูลอิสระ วิตามินอี และ butylated hydroxytoluene(บาท ซิก) ใช้ สำหรับเปรียบเทียบ หรือเป็นค่าบวกควบคุมกระถูกวัดที่ 517 nm หลังจากบ่มสำหรับ 30 นาทีวัดที่ดำเนินการน้อยใน triplicateความเข้มข้นของอนุมูล DPPH ถูกคำนวณโดยใช้การสมการต่อไปนี้:DPPH scavenging ผล (%) =อ่าว -A1 / อ่าว X 100ที่อ่าว มี absorbance ของตัวควบคุมและ A1 ถูกabsorbance ในต่อหน้าของตัวอย่าง [9] (ดิบสารสกัดของกรัม changii) ลดจริงในการดูดซึมเกิดจากการสมุดรายวันสากลของธรรมชาติและวิศวกรรมศาสตร์ 1 (3): 115-117, 2007116 S. Sreenivasan et al / IJNES, 1 (3): 115-117, 2007สารทดสอบถูกเปรียบเทียบกับตัวควบคุมบวก IC50ค่าใช้คำนวณยายับยั้งการโค้งแยก TLC DPPH และกำหนดรัศมีกิจกรรม scavengingสารสกัดหยาบของชางงีกรัมถูกต้องบางชั้นศึกษา chromatography ระบบตัวทำละลายที่เหมาะกรัมสารสกัดหยาบ changii มีเมทานอล และ: คลอโรฟอร์ม (85:15v/v) แผ่นได้รับการพัฒนาในการหอการค้าในระดับที่สมกับระยะทาง 75 มม. หลังจาก 15 นาที air-drying แผ่นได้ฉีดพ่น ด้วย 0.04% DPPH โซลูชัน 5 วินาทีและรูปภาพได้สังเกตภายใต้แสงที่มองเห็นที่ว่า 2 นาทีหลังจากฉีดพ่น ที่พื้นที่ของแถบสีเหลืองสดใสกับพื้นหลังสีม่วงแล้วกำหนดกิจกรรมรุนแรง scavengingวิเคราะห์ผสมฟีนอรวมมีจำนวนรวม phenolics ในสารสกัดจาก changii กรัมกำหนด ด้วยรีเอเจนต์ Folin-Ciocalteu ที่ใช้วิธีการSpanos Wrolstad [10], แก้ไขตามลิสเตอร์ และ Wilson[11] ไป 50 ml ของแต่ละอย่าง (สามเหมือนกับ), 2.5 ml 1/10เจือจาง Folin-Ciocalteau รีเอเจนต์และ 2 ml ของ Na2CO3(7.5%, w/v) เพิ่ม และ incubated ที่ 45 oC สำหรับ 15 นาทีมีวัด absorbance ของตัวอย่างทั้งหมดที่ 765 nmใช้แบบ UV – vis เครื่องทดสอบกรดด่าง (แกทพ้อยท์ UV-9100) ผลลัพธ์ถูกแสดงเป็น milligrammes ของกรด gallic (20-50µg/mlR2= 0.963) ต่อกรัมของน้ำหนักแห้ง (mg GAE/g dw) เท่านั้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างสาหร่ายและการเตรียมสารสกัดสดตัวอย่างกรัม changii ถูกเก็บรวบรวมจาก Pantai Morib, ลังงอร์ประเทศมาเลเซียในเดือนมกราคม 2003 และรับรองความถูกต้องโดยศพังงาซิวม่อย(สถาบันชีววิทยาคณะวิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยมลายามาเลเซีย) ตัวอย่างสาหร่ายสดได้รับการล้างด้วยน้ำทะเลที่จะเอาเศษและกล้วยไม้ก่อนที่จะล้างต่อไปในน้ำจืดและแปรงด้วยแปรงที่อ่อนนุ่มและดวงอาทิตย์แห้ง ประมาณ 100 กรัมของตัวอย่างสาหร่ายแห้งถูกบันทึกอยู่ใน200 มล. ของเมทานอลและให้แช่เป็นเวลา 4 วัน การกำจัดของแห้งตัวอย่างสาหร่ายจากสารสกัดโดยการกรองผ่านผ้าและกรองเข้มข้นต่อไปโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุน. โดยเศษที่แห้งแล้วกลับละลายในเมทานอล 80% (v / V) เพื่อให้การแก้ปัญหาที่มี 1.0, 2.5, 5.0, 10.0 15.0, 20.0 และ25.0 มิลลิกรัมของสารสกัดต่อมล. ฟรีอนุมูลอิสระต้านการวัดเชิงปริมาณของคุณสมบัติต้านอนุมูลได้ดำเนินการในขวดสากล ผสมปฏิกิริยาที่มีอยู่ 50 ไมโครลิตรของตัวอย่างทดสอบ (หรือ 80% เมธานอลเป็นที่ว่างเปล่า) และ 5 มล. ของ 0.04% (w / v) การแก้ปัญหาของ DPPH ในเมทานอล ที่แตกต่างกันสารต้านอนุมูลอิสระที่รู้จักกัน, วิตามินอีและ butylated hydroxytoluene (BHT ซิก) ถูกนำมาใช้สำหรับการเปรียบเทียบหรือเป็นบวกควบคุม. เปลี่ยนสีวัดที่ 517 นาโนเมตรหลังจากบ่มเป็นเวลา30 นาที วัดได้ดำเนินการอย่างน้อยในเพิ่มขึ้นสามเท่า. ความเข้มข้น DPPH รุนแรงได้รับการคำนวณโดยใช้สมการดังต่อไปนี้: DPPH ผลขับ (%) = อ่าว- A1 / อ่าวX100 ที่ไหนอ่าวคือการดูดกลืนแสงของการควบคุมและ A1 เป็นการดูดกลืนแสงในการปรากฏตัวของกลุ่มตัวอย่าง[9] (สารสกัดหยาบของจีchangii) การลดลงที่เกิดขึ้นจริงในการดูดซึมที่เกิดจากวารสารนานาชาติของธรรมชาติและวิศวกรรมวิทยาศาสตร์ 1 (3): 115-117 2007 116 เอส Sreenivasan et al, / IJNES 1 (3): 115-117 2007 สารทดสอบเมื่อเทียบกับ การควบคุมในเชิงบวก IC50 ค่าที่คำนวณได้ใช้เส้นโค้งการยับยั้งยา. แยก TLC-DPPH และความมุ่งมั่นของอนุมูลอิสระต้านสารสกัดหยาบของจีชางงีได้ภายใต้การชั้นบางการศึกษาโค ระบบตัวทำละลายที่ดีที่สุดสำหรับกรัมchangii สารสกัดเมทานอลและเป็น: คลอโรฟอร์ม (85:15 v / v) แผ่นถูกพัฒนาขึ้นในห้องไม่อิ่มตัวจะเป็นระยะทาง 75 มม หลังจาก 15 นาทีอากาศแห้งแผ่นที่ถูกฉีดพ่นโดย0.04% วิธีการแก้ปัญหา DPPH เป็นเวลา 5 วินาทีและภาพที่ถูกตั้งข้อสังเกตภายใต้แสงที่มองเห็นที่ตรง2 นาทีหลังการฉีดพ่น พื้นที่ของวงสีเหลืองสดใสกับพื้นหลังสีม่วงแล้วว่ากิจกรรมต้านอนุมูล. รวมการวิเคราะห์สารฟีนอลปริมาณของฟีนอลรวมในสารสกัดจาก G. changii ถูกกำหนดด้วยสารFolin-Ciocalteu โดยใช้วิธีการของSpanos และ Wrolstad [10] ในขณะที่ แก้ไขโดย Lister และวิลสัน[11] 50 มล. ของแต่ละตัวอย่าง (สามซ้ำ) 2.5 มล. 1/10 ลดสัดส่วนของสาร Folin-Ciocalteau และ 2 มิลลิลิตร Na2CO3 (7.5% w / v) มีการเพิ่มและบ่มที่ 45 องศาเซลเซียสเป็นเวลา15 นาที. การดูดกลืนแสงของ ตัวอย่างทั้งหมดได้รับการวัดที่ 765 นาโนเมตรโดยใช้spectrophotometer UV-Vis (GAT UV-9100) ผลที่ได้รับแสดงเป็นมิลลิกรัมกรดฝรั่งเศส (20-50μg / ml; R2 = 0.963) เทียบเท่าต่อกรัมของน้ำหนักแห้ง (GAE mg / g DW)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่างของสาหร่ายและการเตรียมสารสกัดสด g
changii การเก็บตัวอย่างจากปัน morib
สลังงอร์มาเลเซีย , ในเดือนมกราคม 2003 และรับรองความถูกต้องโดยศ.
พัง ซิว มท. ( สถาบันวิทยาศาสตร์ ชีววิทยา คณะวิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยมาลายามาเลเซีย
, ) สาหร่ายสดตัวอย่าง
ถูกล้างด้วยน้ำทะเลเพื่อเอาเศษและพืชอาศัยก่อน
เพิ่มเติมซักในน้ำและแปรงด้วยแปรงขนอ่อนและดวงอาทิตย์
แห้ง ประมาณ 100 กรัม สาหร่ายแห้งตัวอย่างเพิ่ม
200 ml ของเมทานอลและปล่อยให้แช่เป็นเวลา 4 วัน การกำจัดสาหร่ายแห้ง
ตัวอย่างจากสารสกัดโดยกรองผ่านผ้าและ
เพิ่มเติมโดยใช้เครื่องระเหยสารแบบหมุน แห้งแล้วเป็นเศษส่วน
ละลาย 80% เมทานอล ( V /
5 ) เพื่อผลิตโซลูชั่นที่มี 1.0 , 2.5 , 5.0 และ 10.0 15.0 20.0 25.0 , มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรสกัด

กำจัดอนุมูลอิสระ
ปริมาณการวัดเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาคุณสมบัติ
ได้ดําเนินการในขวดสากล ปฏิกิริยาผสม
ที่มีอยู่ 50 μ l ตัวอย่างทดสอบ ( หรือ 80 % ปริมาณเป็นว่าง )
5 ml ของ 0.04 % ( w / v ) โซลูชั่นของ dpph เมทานอล สารต้านอนุมูลอิสระที่รู้จักกัน
,วิตามิน อี และบีเอชที
( BHT , Sigma ) ใช้สำหรับการเปรียบเทียบ หรือเป็นตัวควบคุมบวก
.
กระทำการที่ 517 nm หลังจากบ่ม
เป็นเวลา 30 นาที วัดได้น้อยทั้งสามใบ พยาบาล dpph รากความเข้มข้นคำนวณโดยใช้สมการต่อไปนี้ :

dpph scavenging effect ( % ) = ( A1
/ อ่าวอ่าว



ายที่อ่าวคือการดูดกลืนแสงของการควบคุมและ A1
คือ
การดูดกลืนแสงในการแสดงตนของตัวอย่าง [ 9 ] ( สารสกัด
G changii ) การลดลงที่เกิดขึ้นจริงในการดูดซึมเกิดจาก
วารสารธรรมชาติและวิศวกรรมวิทยาศาสตร์ 1 ( 3 ) : 115-117 2550
116 S . sreenivasan et al / ijnes , 1 ( 3 ) : 115-117 2550
ทดสอบสารเมื่อเทียบกับการควบคุมที่ดี ic50
ค่าคำนวณปริมาณการใช้เส้นโค้ง
การแยก tlc-dpph และการหาราก

การกิจกรรมสารสกัด กรัม ชางงี ถูกยัดเยียดให้บางๆ
เทคนิคศึกษา ระบบตัวทำละลายเหมาะสำหรับ G .
changii สกัดเป็นเมทานอล : คลอโรฟอร์ม ( 85:15
v / v ) จานถูกพัฒนาขึ้นในหอไม่อิ่มตัว

ระยะทาง 75 มิลลิเมตร หลัง 15 นาที อากาศแห้ง จานถูกฉีดพ่นด้วย
004 % โซลูชั่น dpph เป็นเวลา 5 วินาทีและภาพ
สังเกตภายใต้แสงที่ถูกต้อง 2 นาทีหลังการฉีดพ่น
พื้นที่แถบสีเหลืองสดใสกับพื้นหลังสีม่วงแล้ว

ตั้งใจเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาการวิเคราะห์สารประกอบฟีนอลิกทั้งหมดกิจกรรม
ปริมาณปริมาณ total phenolics ในกรัมสารสกัดเป็น changii
มุ่งมั่นกับ folin ciocalteu รีเอเจนต์โดยใช้วิธีของ wrolstad Spanos
และ [ 10 ]เป็นแบบลิสเตอร์และวิลสัน
[ 11 ] 50 ml ของแต่ละตัวอย่าง ( 3 แบบ ) 1 / 10
2 เป็น folin ciocalteau รีเอเจนต์ 2 มิลลิลิตร Na2CO3
2.5 ml ( 7.5 % W / V ) ได้เพิ่มและบ่มที่อุณหภูมิ 45 องศาเซลเซียส นาน 15 นาที
o
นตัวอย่างถูกวัดที่ 765 nm
ใช้ ยูวี ( วิสเตอร์ ( GAT uv-9100 ) ผลลัพธ์
ถูกแสดงเป็น milligrammes ของเพิ่มขึ้น ( 20-50 µ g / ml ;
2
= 0963 ) เท่ากับ 1 กรัม น้ำหนักแห้ง ( mg เก / กรัม แห้ง )