3. Results3.1. Activation of ANGPTL

3. Results
3.1. Activation of ANGPTL4 by milk
To test whether the level of FFAs in milk affected its ability to induce ANGPTL4 gene expression in intestinal cells, we used the indigenous LPL in milk to produce milk with different levels of FFAs and tested these preparations with respect to ANGPTL4 gene expression.

Pasteurised milk contained 30 μm FFAs in total (Fig. 1A, treatment 1) and incubation of the raw milk overnight at RT did not significantly change the level of FFAs (Fig. 1A, treatment 2). Addition of 10% FBS before incubation overnight at RT resulted in a sevenfold increase in FFAs compared with the incubated milk and the pasteurised milk (Fig. 1A, treatment 3), and a tenfold increase in FFAs was achieved by homogenisation before pasteurisation, incubation or FBS addition (Fig. 1A, treatment 4). Homogenisation prior to either incubation (Fig. 1A, treatment 5) or FBS addition followed by incubation (Fig. 1A, treatment 6) resulted in similar FFA levels and increased FFAs by sevenfold and fourfold, respectively, compared with samples without homogenisation (Fig. 1A, treatment 2 and 3, respectively). The concentration of each FA in the treatment samples are shown in Fig. 3.

Full-size image (34 K)
Fig. 1.
The effect of different treatments on the level of free fatty acids in milk (A) and their effect on expression of the ANGPLT4 gene (B). See Table 1 for explanation of treatments. Results are shown as means ± SEM (n = 3); different letters indicate significant different values between treatments (P < 0.05).
Figure options
Full-size image (31 K)
Fig. 2.
ANGPTL4 protein secretion (A) after 6 h incubation with different milk samples and (B) following 18 h after pre-treatment with different milk samples. See Table 1 for explanation of treatments. Results are shown as means ± SEM (n = 3); different letters indicate significant different values between treatments (P < 0.05).
Figure options
Full-size image (42 K)
Fig. 3.
Free fatty acids in milk after different treatments, divided into (A) short chain fatty acids (SCFA), (B) medium chain fatty acids (MCFA), (C) long chain fatty acids (LCFA) and (D) unsaturated long chain fatty acids (ULCFA). The insert in (A) provides the key for all panels; see Table 1 for explanation of treatments 1–6. Results are shown as means ± SD (n = 3); different letters indicate significant different values between treatments (P < 0.05).
Figure options
Pasteurised milk elicited a fourfold up-regulation of ANGPTL4 gene expression in HCT 116 cells ( Fig. 1B, treatment 1), compared with that of the control treatment without milk ( Fig. 1B, treatment 0) and incubation of the raw milk overnight at RT did not significantly change ANGPTL4 gene expression ( Fig. 1B, treatment 2). Addition of 10% FBS before incubation overnight at RT led to a significantly higher expression of ANGPTL4 ( Fig. 1B, treatment 3) compared with that of pasteurised milk without incubation. Homogenisation of the milk before pasteurisation increased the gene expression ( Fig. 1B, treatment 4) further. Milk exposed to homogenisation followed by incubation with ( Fig. 1B, treatment 6) and without FBS ( Fig. 1B, treatment 5) exhibited the highest efficacy with a tenfold activation of ANGPTL4 gene expression.

Pasteurised milk had no effect on the protein secretion of ANGPTL4 (Fig. 2A and B, treatment 1), while the 6 h incubation with homogenised and pasteurised milk (Fig. 2A, treatment 2) showed a two-fold increase in ANGPTL4 secretion. The twofold increased secretion of ANGPTL4 was also observed after 18 h incubation in culture medium following the 6 h pre-incubation with milk (Fig. 2B, treatment 2). Milk, which had been pasteurised, added FBS and incubated overnight, showed an approximately 1.5-fold increase in ANGPTL4 protein secretion after 6 h (Fig. 2A, treatment 3), while after 18 h on culture medium following the 6 h pre-incubation a twofold increase in ANGPTL4 protein secretion was observed (Fig. 2B, treatment 3), equal to that of homogenised and pasteurised milk.

Fig. 3 shows how the different treatments affected the content of the most abundant FFA in milk. Pasteurised milk and incubated milk did not exhibit any difference in FFA concentrations, while the addition of FBS before incubation increased the amount of all FAs (Fig. 3, treatment 3). Homogenisation prior to any further treatments significantly increased the amount of FFA (Fig. 3, treatment 4, 5 and 6) in comparison with their non-homogenised counterparts (Fig. 3, treatment 1, 2, and 3, respectively). Addition of FBS before incubation of homogenised milk did not significantly increase the level of FFA compared with the one without FBS and hence only incubation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์3.1 การเรียกใช้การ ANGPTL4 ด้วยน้ำนมการทดสอบความสามารถในการ ANGPTL4 ยีนในเซลล์ลำไส้ก่อให้เกิดผลกระทบระดับ FFAs นม เราใช้เอสชนนมผลิตนม FFAs มีระดับแตกต่างกัน และทดสอบเหล่านี้เตรียมกับยีน ANGPTL4นม pasteurised อยู่ 30 μm FFAs รวม (Fig. 1A รักษา 1) และคณะทันตแพทยศาสตร์ของน้ำนมดิบที่ RT ค้างคืนได้ไม่มากเปลี่ยนระดับ FFAs (Fig. 1A, 2 การรักษา) เพิ่ม 10% FBS ก่อนบ่มที่ RT ค้างคืนส่งผลให้การเพิ่ม sevenfold FFAs เมื่อเทียบกับนม incubated และนม pasteurised (Fig. 1A, 3 การรักษา), และเพิ่ม tenfold ใน FFAs สำเร็จ โดย homogenisation ก่อน pasteurisation คณะทันตแพทยศาสตร์ หรือเพิ่ม FBS (Fig. 1A รักษา 4) Homogenisation ก่อนบ่ม (Fig. 1A รักษา 5) หรือตามคณะทันตแพทยศาสตร์ (Fig. 1A รักษา 6) นอกจากนี้ FBS ให้คล้าย FFA ระดับ และ FFAs เพิ่มโดย sevenfold และ fourfold ตามลำดับ เปรียบเทียบกับตัวอย่างโดย homogenisation (Fig. 1A, 2 และ 3 การรักษาตามลำดับ) ความเข้มข้นของ FA แต่ละในตัวอย่างการรักษาแสดงใน Fig. 3รูปภาพขนาดเต็ม (34 K)Fig. 1 ผลของการรักษาแตกต่างกันกับระดับของกรดไขมันอิสระในนม (A) และผลที่เกิดขึ้นในนิพจน์ของยีน ANGPLT4 (B) ดูตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา ผลลัพธ์จะแสดงเป็นหมายถึง ± SEM (n = 3); ค่าแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างการรักษาระบุว่า ตัวอักษรที่แตกต่างกัน (P < 0.05)ตัวเลือกรูปรูปภาพขนาดเต็ม (31 K)Fig. 2 หลั่งโปรตีน ANGPTL4 (A) หลังจากบ่ม 6 h ตัวอย่างนมที่แตกต่างกัน และ (ข) ต่อไป นี้ 18 h หลังการรักษาก่อนด้วยตัวอย่างนมที่แตกต่างกัน ดูตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา ผลลัพธ์จะแสดงเป็นหมายถึง ± SEM (n = 3); ค่าแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างการรักษาระบุว่า ตัวอักษรที่แตกต่างกัน (P < 0.05)ตัวเลือกรูปรูปภาพขนาดเต็ม (42 K)Fig. 3 กรดไขมันอิสระในนมหลังจากการรักษาแตกต่างกัน แบ่ง (A) สั้นโซ่ไขมันกรด (SCFA), กรดไขมันห่วงโซ่ (ข) ปานกลาง (MCFA), (C) นานกรดไขมันห่วงโซ่ (LCFA) และกรดไขมันโซ่ยาว (D) ในระดับที่สม (ULCFA) แทรกใน (A) แสดงคีย์การติดตั้งทั้งหมด ดูตารางที่ 1 สำหรับอธิบายรักษา 1 – 6 ผลลัพธ์จะแสดงเป็นหมายถึง ± SD (n = 3); ค่าแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างการรักษาระบุว่า ตัวอักษรที่แตกต่างกัน (P < 0.05)ตัวเลือกรูปนม pasteurised elicited การ fourfold สายระเบียบของยีน ANGPTL4 ในเซลล์ HCT 116 (Fig. 1B รักษา 1), เมื่อเทียบกับการรักษาควบคุมไม่มีนม (Fig. 1B รักษา 0) และบ่มของน้ำนมดิบที่ RT ค้างคืนได้ไม่มีเปลี่ยน ANGPTL4 ยีน (Fig. 1B รักษา 2) เพิ่ม 10% FBS ก่อนบ่มที่ RT ค้างคืนนำไปสู่ค่าอย่างมีนัยสำคัญของ ANGPTL4 (Fig. 1B รักษา 3) เปรียบเทียบกับนม pasteurised ไม่ฟักตัว Homogenisation นมก่อน pasteurisation เพิ่มยีน (Fig. 1B รักษา 4) เพิ่มเติม นมที่สัมผัสกับ homogenisation ตามบ่มกับ (Fig. 1B รักษา 6) และไม่ มี FBS (Fig. 1B รักษา 5) จัดแสดงประสิทธิภาพสูงสุดกับการเปิดใช้ยีน ANGPTL4 tenfoldPasteurised นมก็ไม่มีผลต่อการหลั่งโปรตีนของ ANGPTL4 (Fig. 2A และ B รักษา 1), ในขณะที่บ่ม 6 h มี pasteurised และ homogenised นม (Fig. 2A รักษา 2) แสดงให้เห็นว่าเพิ่มสองพับในหลั่ง ANGPTL4 หลั่งเพิ่มขึ้นสองเท่าของ ANGPTL4 ยังได้ถูกตรวจสอบหลังจาก 18 h คณะทันตแพทยศาสตร์ในวัฒนธรรมบ่มก่อน 6 h กับนม (Fig. 2B รักษา 2) ต่อไปนี้ นม ซึ่งมีการ pasteurised เพิ่ม FBS และ incubated ค้างคืน พบการเพิ่มประมาณ 1.5-fold ในหลั่งโปรตีน ANGPTL4 หลัง 6 h (Fig. 2A รักษา 3), ในขณะที่หลังจาก h 18 ในวัฒนธรรมกลางขั้นบ่มก่อน 6 h เพิ่มเป็นสองเท่าในหลั่งโปรตีน ANGPTL4 ถูกสังเกต (Fig. 2B รักษา 3), เท่ากับที่นม pasteurised และ homogenisedFig. 3 แสดงวิธีการรักษาแตกต่างกันได้รับผลกระทบของ FFA อุดมสมบูรณ์ที่สุดในน้ำนม นม pasteurised และนม incubated ได้แสดงความแตกต่างในความเข้มข้น FFA ในขณะที่การเพิ่มของ FBS ก่อนบ่มเพิ่มจำนวน Fa ที่ทั้งหมด (Fig. 3 รักษา 3) Homogenisation ก่อนรักษาใด ๆ เพิ่มเติมเพิ่มจำนวน FFA (Fig. 3, 4, 5 และ 6 การรักษา) เมื่อเปรียบเทียบกับคู่ของพวกเขาไม่ใช่ homogenised (Fig. 3, 1, 2, 3 และการรักษาตามลำดับ) แห่ง FBS ก่อนบ่มนม homogenised ได้ไม่เพิ่มระดับของ FFA ที่เปรียบเทียบ ด้วยไม่มี FBS และคณะทันตแพทยศาสตร์เท่านั้นดังนั้นอย่างมาก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผลการ
3.1 กระตุ้นการทำงานของ ANGPTL4 โดยนม
ต้องการทดสอบว่าระดับของ FFAs ในนมได้รับผลกระทบความสามารถในการก่อให้เกิดการแสดงออกของยีนในเซลล์ ANGPTL4 ลำไส้เราใช้ LPL พื้นเมืองในนมเพื่อผลิตนมที่มีระดับที่แตกต่างกันของ FFAs และทดสอบเตรียมการเหล่านี้ด้วยความเคารพต่อยีน ANGPTL4 การแสดงออก. นม Pasteurised มี 30 ไมโครเมตร FFAs รวม (รูป. 1A การรักษา 1) และบ่มของน้ำนมดิบค้างคืนที่ RT ไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญการเปลี่ยนแปลงระดับของ FFAs (รูป. 1A การรักษา 2) นอกเหนือจาก FBS 10% ก่อนที่จะบ่มค้างคืนที่ RT ผลในการเพิ่มขึ้นเจ็ดใน FFAs เมื่อเทียบกับนมบ่มและนมพาสเจอร์ไร (รูป. 1A รักษา 3) และสิบเท่าเพิ่มขึ้นใน FFAs ได้สำเร็จโดย homogenisation ก่อนที่จะฆ่าเชื้อฟักตัวหรือ นอกจาก FBS (รูป. 1A การรักษา 4) homogenisation ก่อนที่จะมีทั้งการบ่ม (รูป. 1A รักษา 5) หรือ FBS นอกจากนี้ตามด้วยการบ่ม (รูป. 1A การรักษา 6) ส่งผลให้ระดับ FFA ที่คล้ายกันและเพิ่มขึ้น FFAs โดยเจ็ดและสี่เท่าตามลำดับเมื่อเทียบกับกลุ่มตัวอย่างโดยไม่ต้อง homogenisation (รูปที่ 1A, การรักษาที่ 2 และ 3 ตามลำดับ) ความเข้มข้นของแต่ละเอฟเอในตัวอย่างการรักษาจะแสดงในรูป 3. ภาพขนาดเต็ม (34 K) รูป 1. ผลของการรักษาที่แตกต่างกันในระดับของกรดไขมันอิสระในนม (A) และผลกระทบของพวกเขาในการแสดงออกของยีน ANGPLT4 (B) ดูตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา ผลการค้นหาจะแสดงให้เห็นว่าหมายถึง± SEM (n = 3) ตัวอักษรที่แตกต่างกันบ่งบอกถึงความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญค่าระหว่างการรักษา (p <0.05). เลือกรูปภาพขนาดเต็ม (31 K) รูป 2. การหลั่งโปรตีน ANGPTL4 (A) หลังจากบ่ม 6 ชั่วโมงกับกลุ่มตัวอย่างนมที่แตกต่างกันและ (B) ดังต่อไปนี้ 18 ชั่วโมงหลังการรักษาก่อนมีตัวอย่างนมที่แตกต่างกัน ดูตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา ผลการค้นหาจะแสดงให้เห็นว่าหมายถึง± SEM (n = 3) ตัวอักษรที่แตกต่างกันบ่งบอกถึงความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญค่าระหว่างการรักษา (p <0.05). เลือกรูปภาพขนาดเต็ม (42 K) รูป 3. กรดไขมันอิสระในนมหลังจากการรักษาที่แตกต่างกันแบ่งออกเป็น (A) สายสั้นกรดไขมัน (SCFA), (B) กลางห่วงโซ่กรดไขมัน (MCFA) (C) สายยาวกรดไขมัน (LCFA) และ (D) ไม่อิ่มตัว ห่วงโซ่ยาวกรดไขมัน (ULCFA) แทรกใน () ให้ที่สำคัญสำหรับการติดตั้งทั้งหมด ดูตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา 1-6 ผลการค้นหาจะแสดงให้เห็นว่าหมายถึง± SD (n = 3) ตัวอักษรที่แตกต่างกันบ่งบอกถึงความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญค่าระหว่างการรักษา (p <0.05). เลือกรูปนม Pasteurised ออกมาเท่าขึ้นควบคุมการแสดงออกของยีนใน ANGPTL4 HCT 116 เซลล์ (รูป. 1B, การรักษา 1) เมื่อเทียบกับที่ของการควบคุมการรักษาโดยไม่ต้องนม (รูป. 1B, การรักษา 0) และบ่มของน้ำนมดิบค้างคืนที่ RT ไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของยีน ANGPTL4 (รูป. 1B, การรักษา 2) นอกจากนี้ 10% FBS ก่อนบ่มค้างคืนที่ RT นำไปสู่การแสดงออกที่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของ ANGPTL4 (รูป. 1B, การรักษา 3) เมื่อเทียบกับที่ของนมพาสเจอร์ไรส์โดยไม่ต้องบ่ม homogenisation ของนมพาสเจอร์ไรซ์ก่อนที่จะเพิ่มการแสดงออกของยีน (รูป. 1B, การรักษา 4) ต่อไป นมสัมผัสกับ homogenisation ตามด้วยการบ่มด้วย (รูป. 1B, การรักษา 6) และไม่มี FBS (รูป. 1B, การรักษา 5) การจัดแสดงประสิทธิภาพสูงสุดด้วยการเปิดใช้งานเป็นสิบเท่าของการแสดงออกของยีน ANGPTL4. นม Pasteurised ไม่มีผลต่อการหลั่งของโปรตีน ANGPTL4 (รูป. 2A และ B ทดลองที่ 1) ในขณะที่การบ่มชั่วโมง 6 กับนมปั่นและพาสเจอร์ไรส์ (รูป. 2A, การรักษา 2) แสดงให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นสองเท่าในการหลั่ง ANGPTL4 เพิ่มขึ้นสองเท่าการหลั่งของ ANGPTL4 ถูกพบหลังจากบ่ม 18 ชั่วโมงได้ในอาหารเลี้ยงเชื้อต่อไป 6 ชั่วโมงก่อนการบ่มด้วยนม (รูป. 2B, การรักษา 2) นมซึ่งได้รับการพาสเจอร์ไรซ์เพิ่ม FBS และบ่มข้ามคืนพบว่าเพิ่มขึ้นประมาณ 1.5 เท่าในการหลั่งโปรตีน ANGPTL4 หลังจาก 6 ชั่วโมง (รูป. 2A รักษา 3) ในขณะที่หลังจาก 18 ชั่วโมงในอาหารเลี้ยงเชื้อต่อไป 6 ชั่วโมงก่อนการบ่ม เพิ่มขึ้นสองเท่าในการหลั่งโปรตีน ANGPTL4 ก็สังเกตเห็น (รูป. 2B, การรักษาที่ 3) เท่ากับว่านมพาสเจอร์ไรส์และปั่น. รูป 3 แสดงให้เห็นว่าการรักษาที่แตกต่างกันได้รับผลกระทบของเนื้อหาที่มีมากที่สุด FFA ในนม Pasteurised นมและนมบ่มไม่ได้แสดงความแตกต่างในความเข้มข้นของ FFA ใด ๆ ในขณะที่การเพิ่มขึ้นของ FBS ก่อนที่จะฟักตัวเพิ่มจำนวนของ FAs ทั้งหมด (รูปที่ 3. การรักษา 3) homogenisation ก่อนที่จะมีการรักษาใด ๆ เพิ่มเติมอย่างมีนัยสำคัญเพิ่มปริมาณของ FFA (รูปที่ 3. การรักษา 4, 5 และ 6) ในการเปรียบเทียบกับคู่ที่ไม่เข้ากันของพวกเขา (รูปที่ 3. การรักษา 1, 2 และ 3 ตามลำดับ) นอกเหนือจาก FBS ก่อนบ่มของนมปั่นไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญเพิ่มระดับของ FFA เมื่อเทียบกับหนึ่งโดยไม่ต้อง FBS และด้วยเหตุนี้เท่านั้นบ่ม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลลัพธ์
3.1 . การ angptl4 นม
เพื่อทดสอบว่าระดับของ ffas นมมีผลต่อความสามารถในการกระตุ้นการแสดงออกของยีน angptl4 ในเซลล์ลำไส้ เราใช้ lpl พื้นเมืองในนมผลิตนมที่มีระดับที่แตกต่างกันของ ffas และทดสอบการเตรียมเหล่านี้ด้วยความเคารพ angptl4 การแสดงออกของยีน

นมพาสเจอร์ไรซ์บรรจุ 30 μ M ffas ทั้งหมด ( รูปที่ 1A ,ทรีทเมนต์ที่ 1 ) และบ่มเพาะของน้ำนมดิบค้างคืนที่ RT ไม่พบการเปลี่ยนแปลงระดับของ ffas ( รูปที่ 1A , การรักษา 2 ) เพิ่ม 10% FBS ก่อนบ่มค้างคืนที่ ทีมีผลในการเพิ่มขึ้นใน ffas เจ็ดเท่าเทียบกับบ่มนมและนมพาสเจอร์ไรซ์ ( รูปที่ 1A , การรักษา 3 ) และเพิ่มขึ้นเป็นสิบเท่า ffas ก่อนปา ตอไรเซชั่นได้โดยโฮโมจีไนเซชั่น ,บ่มเพาะหรือ FBS ( รูปที่ 1A และกลุ่มที่ 4 ) โฮโมจีไนเซชั่น ก่อนให้บ่ม ( รูปที่ 1A , การรักษา 5 ) หรือ FBS นอกจากนี้ตามด้วยการบ่ม ( รูปที่ 1A , การรักษา 6 ) ผลในระดับใกล้เคียงกัน และ ffas FFA เพิ่มขึ้นโดยเจ็ดเท่า และจาตุรงค์ ตามลำดับ เทียบกับไม่ใช้โฮโมจีไนเซชั่น ( รูปที่ 1A , การรักษาที่ 2 และ 3 ตามลำดับ )ความเข้มข้นของเอฟเอ ในการรักษาแต่ละตัวอย่างที่แสดงในรูปที่ 3 .

ภาพขนาดเต็ม ( 34 K )
รูปที่ 1
ผลของการรักษาที่แตกต่างกันในระดับของกรดไขมันในน้ำนม ( ) และผลต่อการแสดงออกของยีน angplt4 ( B ) ดูจากตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา ผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM ( n = 3 )ตัวอักษรที่แตกต่างกันระบุค่าที่แตกต่างกัน ( P < 0.05 )

รูปตัวเลือกภาพขนาดเต็ม ( 31 K )
รูปที่ 2
angptl4 หลั่งโปรตีน ( ) หลังจาก 6 ชั่วโมงบ่มตัวอย่างนมที่แตกต่างกัน และ ( ข ) ต่อไปนี้ 18 H หลังก่อน มีตัวอย่างนมที่แตกต่างกัน ดูจากตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา ผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SEM ( n = 3 )ตัวอักษรที่แตกต่างกันระบุค่าที่แตกต่างกัน ( P < 0.05 )

รูปตัวเลือกภาพขนาดเต็ม ( 42 k )
รูปที่ 3
กรดไขมันอิสระในนมหลังจากการรักษาที่แตกต่างกันแบ่งออกเป็น ( 1 ) กรดไขมันโซ่สั้น ( scfa ) , ( B ) กรดไขมันขนาดกลาง ( MCFA ) , ( c ) กรดไขมันโซ่ยาว ( สาย ) และ ( d ) กรดไขมันไม่อิ่มตัวกรดไขมันโซ่ยาว ( ulcfa )แทรก ( ) ให้กุญแจทุกแผง เห็นตารางที่ 1 สำหรับคำอธิบายของการรักษา 1 – 6 ผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD ( n = 3 ) ; ตัวอักษรที่แตกต่างกันระบุค่าที่แตกต่างกัน ( P < 0.05 )

รูปตัวเลือกนมพาสเจอร์ไรซ์ได้มาสี่เท่าของของการแสดงออกของยีนในเซลล์ angptl4 Hct 116 ( รูป 1B , การรักษา ( 1 )เมื่อเทียบกับที่ของการรักษาควบคุมโดยไม่ต้องนม ( รูปที่ 1A , การรักษา 0 ) และบ่มเพาะของน้ำนมดิบค้างคืนที่ RT ไม่พบการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของยีน angptl4 ( รูปที่ 1A , การรักษา 2 ) เพิ่ม 10% FBS ก่อนบ่มค้างคืนที่ RT นำไปสู่การแสดงออกสูงกว่าของ angptl4 ( รูปที่ 1A , การรักษา 3 ) เมื่อเทียบกับที่ของนมพาสเจอร์ไรซ์ปราศจากการบ่มโฮโมจีไนเซชั่นของนมก่อนปา ตอไรเซชั่นเพิ่มการแสดงออกของยีน ( รูปที่ 1A , การรักษา 4 ) เพิ่มเติม นมโฮโมจีไนเซชั่น ตามด้วยโดนบ่มด้วย ( รูปที่ 1A , การรักษา 6 ) และไม่มี FBS ( รูป 1B , การรักษา 5 ) มี ประสิทธิภาพสูงสุด ด้วยเป็นสิบเท่า การกระตุ้นการแสดงออกของยีน angptl4

นมพาสเจอร์ไรซ์จึงไม่มีผลต่อการหลั่งของ angptl4 ( ภาพโปรตีน2A และบี ทรีทเมนต์ที่ 1 ) ในขณะที่ 6 ชั่วโมงและบ่มด้วย homogenised นมพาสเจอร์ไรซ์ ( รูปที่ 2A , การรักษา 2 ) พบว่ามีการแข่งขันเพิ่มขึ้นใน angptl4 การหลั่ง การทวีคูณเพิ่มการหลั่ง angptl4 พบว่าหลังจาก 18 H บ่มเพาะในอาหารเลี้ยงเชื้อต่อ 6 ชั่วโมงก่อนการบ่มด้วยนม ( รูปที่ 2B , การรักษา 2 ) นมพาสเจอร์ไรซ์ ซึ่งมีการเพิ่ม FBS และบ่มค้างคืนแสดงให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นประมาณ 1.5-fold ในการหลั่งโปรตีน angptl4 หลังจาก 6 ชั่วโมง ( รูปที่ 2A , การรักษา 3 ) ในขณะที่หลัง 18 H ในอาหารเลี้ยงเชื้อต่อ 6 ชั่วโมงก่อนการบ่มเพิ่มขึ้นสองเท่าในการหลั่งโปรตีน angptl4 พบ ( รูปที่ 2B , การรักษา 3 ) เท่ากับว่า homogenised และนมพาสเจอร์ไรซ์ .

ฟิค3 แสดงให้เห็นว่าการรักษาที่แตกต่างกันมีผลต่อเนื้อหาของภาชนะบรรจุที่มีมากที่สุดในน้ำนม นมพาสเจอร์ไรซ์และบ่มนมไม่ได้แสดงความแตกต่างใน FFA สูงสุดในขณะที่การเพิ่มขึ้นของ FBS ก่อนการบ่มเพิ่มปริมาณทั้งหมด ( รูปที่ 3 ) , การรักษา 3 ) โฮโมจีไนเซชั่น ก่อนการรักษาใด ๆ เพิ่มเติมอย่างมีนัยสำคัญเพิ่มปริมาณ FFA ( ภาพที่ 3 กลุ่มที่ 4 ,5 และ 6 ) ในการเปรียบเทียบกับองค์กรของพวกเขา homogenised คู่ ( ภาพที่ 3 ทรีทเมนต์ที่ 1 , 2 และ 3 ตามลำดับ ) เพิ่มของ FBS ก่อนบ่ม homogenised น้ำนมไม่เพิ่มขึ้น ระดับของ FFA เมื่อเทียบกับหนึ่งโดยที่ FBS และดังนั้นเพียงการบ่ม