B. mallei strains Bogor, Zagreb and

B. mallei strains Bogor, Zagreb and Mukteswar were grown on blood agar plates over night at 37°C under aerobic conditions. Details on the strains are given in Table 1. For LPS purification, a 10-microliter loop full of bacterial colony material was re-suspended thoroughly in 6 ml saline (0.9% NaCl, pH 7.0) up to a density comparable to McFarland scale 4.0. A volume of 3 ml of 37% formaldehyde was added to achieve a final formaldehyde concentration of 12.3%. The suspension was rigorously vortexed and subsequently swayed using an orbital shaker (Polymax 1040, Heidolph Instruments GmbH, Schwabach, Germany) over night at room temperature. Controls for sterility confirmed inactivation of
bacteria. Cells were pelletized by centrifugation at 3.500× g for 15 min and the supernatant was discarded. Soluble components were removed by 3 consecutive centri-
fugation and washing steps with 9 ml phosphate
buffered saline (PBS, pH 7.0) shaking at 15 rpm for 10
minutes. The LPS-containing pellet was re-suspended in

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สายพันธุ์เกิด mallei กอร์ ซาเกร็บ และ Mukteswar ถูกปลูกในแผ่นเลือด agar ข้ามคืนที่ 37° C ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก รายละเอียดเกี่ยวกับสายพันธุ์แสดงไว้ในตารางที่ 1 สำหรับฟอก LPS วน 10 ไมโครลิตรของโคโลนีแบคทีเรียวัสดุถูกเลื่อนออกไปอีกครั้งอย่างละเอียดใน 6 ml น้ำเกลือ (0.9% NaCl ค่า pH 7.0) ขึ้นอยู่กับความหนาแน่นเทียบได้กับ McFarland ขนาด 4.0 ปริมาตรของ 3 ml ของฟอร์มาลดีไฮด์ 37% ถูกเพิ่มเพื่อให้ได้ความเข้มข้นสุดท้ายฟอร์มาลดีไฮด์% 12.3 บาท การระงับได้ทดสอบ vortexed และต่อมา swayed โดยใช้เชคเกอร์การโคจร (Polymax 1040 เครื่องมือ GmbH Heidolph, Schwabach เยอรมนี) ข้ามคืนที่อุณหภูมิห้อง การควบคุม sterility ยืนยันยกเลิกการเรียกของแบคทีเรีย เซลล์ถูก pelletized โดย centrifugation ที่ 3.500 × g สำหรับ 15 นาที และ supernatant ถูกละทิ้ง ส่วนประกอบที่ละลายน้ำได้ถูกเอาออก โดย 3 ติดกัน centri-ตอน fugation และซักผ้า ด้วยฟอสเฟต 9 mlน้ำเกลือถูกบัฟเฟอร์ (PBS ค่า pH 7.0) สั่นที่รอบต่อนาที 15 10นาที เม็ดประกอบด้วย LPS ถูกเลื่อนออกไปอีกใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บี mallei สายพันธุ์โบกอร์, ซาเกร็บและ Mukteswar ปลูกบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อในเลือดข้ามคืนที่ 37 ° C ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก รายละเอียดเกี่ยวกับสายพันธุ์ที่จะได้รับใน 1 ตารางสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ LPS, วง 10 ไมโครลิตรเต็มรูปแบบของวัสดุอาณานิคมของแบคทีเรียเป็นอีกครั้งที่ถูกระงับอย่างทั่วถึงใน 6 มล. น้ำเกลือ (0.9% โซเดียมคลอไรด์มีค่า pH 7.0) ขึ้นอยู่กับความหนาแน่นเทียบได้กับขนาด 4.0 McFarland . ปริมาณ 3 มิลลิลิตรไฮด์ 37% ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้บรรลุความเข้มข้นของไฮด์สุดท้ายของ 12.3% ถูกระงับการ vortex อย่างจริงจังและต่อมาแกว่งโดยใช้เครื่องปั่นวงโคจร (PolyMax 1040 Heidolph เครื่องมือ GmbH, Schwabach, เยอรมนี) ข้ามคืนที่อุณหภูมิห้อง ควบคุมสำหรับการเป็นหมันได้รับการยืนยันการใช้งานของ
แบคทีเรีย เซลล์ที่ถูก pelletized โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 3.500 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาทีและใสทิ้ง ส่วนประกอบที่ละลายน้ำได้ถูกถอดออกโดย centri- ติดต่อกัน 3
fugation และขั้นตอนการซักผ้าที่มีฟอสเฟต 9 มล.
น้ำเกลือบัฟเฟอร์ (พีบีเอสพีเอช 7.0) เขย่าที่ 15 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 10
นาที LPS เม็ดที่มีส่วนผสมเป็นอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

B . mallei สายพันธุ์ Bogor , ซาเกร็บ mukteswar และปลูกในเลือดวุ้นแผ่นผ่านคืนที่ 37 ° C ภายใต้สภาวะแอโรบิก . รายละเอียดสายพันธุ์จะได้รับในตารางที่ 1 สำหรับสเปรย์ฟอก 10 ไมโครลิตรห่วงเต็มวัสดุโคโลนีแบคทีเรียถูกระงับอีกครั้งอย่างละเอียดในน้ำเกลือ ( 0.9% โซเดียมคลอไรด์ 6 มิลลิลิตรพีเอช 7.0 ) ถึงความหนาแน่นเทียบกับแมคฟาร์แลนด์ ขนาด 4.0ปริมาณ 3 ml 37% ฟอร์มัลดีไฮด์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้บรรลุความเข้มข้นของฟอร์มาลดีไฮด์สุดท้ายร้อยละ 12.3 ถูกระงับ vortexed อย่างจริงจังและต่อมาเปลี่ยนใจใช้เครื่องปั่นเบ้าตา ( polymax 1040 , เครื่องมือ heidolph GmbH , Schwabach , เยอรมนี ) ค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง การควบคุมการเป็นหมันของ
ยืนยันการยับยั้งแบคทีเรีย เซลล์ที่ถูกอัดโดยการเหวี่ยงแยกที่ 3500 กรัม× 15 นาทีและนำมันทิ้ง ปริมาณส่วนประกอบที่ถูกกำจัดโดย ติดต่อกัน 3 centri -
fugation และล้างขั้นตอนที่ 9 มล. เกลือฟอสเฟต
2 ( PBS , pH 7.0 ) สั่นที่ 15 รอบต่อนาที 10
นาที มีสเปรย์หล่อลื่นผสมเม็ดถูกระงับในอีกครั้ง