2.2. Experimental designA greenhous

2.2. Experimental design
A greenhouse experiment utilizing a full factorial randomized
block design was implemented. It included two soil types, three
inocula and two ecotypes of two different species of plants. The
entire experiment was replicated ten times for a total of 240 plants,
which were seeded directly into DeepotsTM (Stewe & Sons). Pots
were model D40, type H, which were 25cm deep, with a diameter
of 6.4cm and a total volume of 656 ml.
The two soil types were mine soil (MS) and non-mine soil (NS).
Mine soil was composed of coal tailings from the mine mixed with
sand in a 50:50 ratio. Non-mine soil was composed of low-nutrient
clay soil mixed with sand in a 50:50 ratio. Both media were passed
through a 1-in. wire mesh to remove large clumps and turned in a
cement mixer to assure thorough mixing of sand and soil/coal. The
media were steam pasteurized for three days in a flatbed steamer.
This method had previously been tested and verified by our laboratory
as sufficient to kill AM fungi.
Fungal treatments were fungi collected from the mine (FM),
fungi collected from the control site or non-mine fungi (FN), and
a microbial wash (F0). Plant ecotypes for each species were designated
mine plants (PM) and non-mine plants (PN). Five blocks were
established, each consisting of two full replicates of the experiment
and randomized within each block, for a total of 240 pots and 10
complete replicates of the experiment. Analysis of variance found
no block effects.
Plants were grown for four months in a greenhouse, with a
sixteen-hour day. Each pot received 50 ml of Peterson’s 15-0-15
fertilizer, diluted to 5.5 g/L, on a weekly basis. Plants were watered
daily. At harvest, plants were cut even with the soil, then dried for
3 days in a 60 ◦C oven and weighed for above-ground biomass. The
remaining roots and soil were removed intact from the deepots,
weighed, and then divided roughly in half lengthwise. Each half was
then weighed. Roots were extracted from one half of the divided
sample, dried for three days in a 60 ◦C oven and weighed again.
Total root biomass was extrapolated based on the fraction of soil.
The other half of the roots and soil were reserved as inoculum for a
subsequent experiment. Root samples from every pot were stained
and checked for absence or presence of AM fungi. All inoculated
plants were found to harbor AM fungi and none of the F0 controls
were colonized by AM fungi.
Inoculum potential was evaluated using sorghum that was
planted in each inoculum type (FM and FN). Two dilutions were
prepared, pure inoculum and inoculum diluted 1:10 by volume
with sterile sand. The latter represents the same dilution level used
for the experiment. Five replicates of each treatment were planted
and harvested after 40 days. Roots were stained in trypan blue and
mounted on slides. Arbuscules, vesicles and hyphae were counted
and scored per McGonigle et al. (1990). No significant differences
were found between the two inocula, based on a two-way analysis
of variance.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. ทดลองออกแบบเรือนกระจกเป็นการทดลองใช้แฟกทอเรียลเต็ม randomizedออกแบบบล็อกถูกนำมาใช้ ได้รวมดินสองชนิด 3inocula และ ecotypes สองของพืชสองชนิดที่แตกต่างกัน ที่การทดลองทั้งหมดถูกจำลองแบบสิบครั้งสำหรับพืช 240ซึ่งถูก seeded ลง DeepotsTM (Stewe และบุตร) หม้อมีรุ่น D40 ชนิด H ซึ่งได้ลึก กับมีเส้นผ่าศูนย์กลาง 25 ซม.6.4 ซม.และปริมาตรรวมของมล 656สองดินชนิดมีเหมืองดิน (MS) และดินไม่ใช่ระเบิด (NS)ดินเหมืองประกอบด้วย tailings ถ่านหินจากเหมืองที่ผสมกับทรายในอัตราคนละครึ่ง ดินระเบิดไม่ได้ประกอบด้วยธาตุอาหารต่ำดินดินเหนียวผสมกับทรายในอัตราคนละครึ่ง สื่อทั้งสองถูกส่งผ่านผ่านตาข่ายลวด 1 ค่ะเอากระจุกใหญ่ และเกลียดในการเครื่องผสมปูนซีเมนต์เพื่อให้มั่นใจอย่างละเอียดผสมทรายและดิน/ถ่านหิน ที่สื่อ pasteurized สามวันในนึ่งแท่นไอน้ำได้วิธีการนี้ก่อนหน้านี้ได้ถูกทดสอบ และตรวจสอบ โดยห้องปฏิบัติการของเราเป็นเพียงพอที่จะฆ่าเป็นเชื้อรารักษาเชื้อราได้รวบรวมจากเหมือง (FM), เชื้อรารวบรวมจากเว็บไซต์ควบคุมหรือเชื้อราไม่ใช่เหมือง (FN), เชื้อรา และล้างจุลินทรีย์การ (F0) โรงงาน ecotypes สำหรับแต่ละชนิดถูกกำหนดเหมืองโรงงาน (PM) และพืชไม่เหมือง (PN) บล็อกห้าได้ก่อตั้งขึ้น ซึ่งทั้งสองเหมือนกับการทดลองและ randomized ภายในแต่ละบล็อค จำนวน 240 หม้อและ 10ทำเหมือนกับการทดลอง วิเคราะห์ผลต่างของพบno block effects.Plants were grown for four months in a greenhouse, with asixteen-hour day. Each pot received 50 ml of Peterson’s 15-0-15fertilizer, diluted to 5.5 g/L, on a weekly basis. Plants were watereddaily. At harvest, plants were cut even with the soil, then dried for3 days in a 60 ◦C oven and weighed for above-ground biomass. Theremaining roots and soil were removed intact from the deepots,weighed, and then divided roughly in half lengthwise. Each half wasthen weighed. Roots were extracted from one half of the dividedsample, dried for three days in a 60 ◦C oven and weighed again.Total root biomass was extrapolated based on the fraction of soil.The other half of the roots and soil were reserved as inoculum for asubsequent experiment. Root samples from every pot were stainedand checked for absence or presence of AM fungi. All inoculatedplants were found to harbor AM fungi and none of the F0 controlswere colonized by AM fungi.Inoculum potential was evaluated using sorghum that wasplanted in each inoculum type (FM and FN). Two dilutions wereprepared, pure inoculum and inoculum diluted 1:10 by volumewith sterile sand. The latter represents the same dilution level usedfor the experiment. Five replicates of each treatment were plantedand harvested after 40 days. Roots were stained in trypan blue andmounted on slides. Arbuscules, vesicles and hyphae were countedand scored per McGonigle et al. (1990). No significant differenceswere found between the two inocula, based on a two-way analysisof variance.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 การออกแบบการทดลองการทดลองใช้เรือนกระจกแบบสุ่มเต็มปัจจัยการออกแบบบล็อกถูกนำมาใช้ รวมทั้งสองประเภทดินสามinocula และสองของทั้งสองสายพันธุ์ที่แตกต่างกันชนิดของพืช ทดลองทั้งหมดถูกจำลองแบบสิบครั้งรวมเป็น 240 โรงงานซึ่งเป็นเมล็ดโดยตรงในDeepotsTM (Stewe & Sons) กระถางเป็น D40 รุ่น H ชนิดซึ่งเป็น 25 ซมลึกที่มีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางของ6.4cm และปริมาณรวมของ 656 มล. ทั้งสองประเภทดินเป็นดินเหมือง (MS) และดินที่ไม่ใช่เหมือง (NS). ดินเหมืองประกอบด้วยของแร่ถ่านหินจากเหมืองผสมกับทรายในอัตราส่วน 50:50 ดินที่ไม่ใช่เหมืองประกอบด้วยสารอาหารต่ำดินเหนียวผสมกับทรายในอัตราส่วน 50:50 สื่อทั้งสองถูกส่งผ่าน 1 ใน ลวดตาข่ายเพื่อเอาก้อนขนาดใหญ่และหันในเครื่องผสมปูนซีเมนต์ผสมเพื่อให้มั่นใจอย่างละเอียดของทรายและดิน / ถ่านหิน สื่อได้รับการอบไอน้ำพาสเจอร์ไรส์เป็นเวลาสามวันในเรือกลไฟกระบะ. วิธีการนี้ได้รับก่อนหน้านี้ได้รับการทดสอบและตรวจสอบโดยห้องปฏิบัติการของเราเป็นเพียงพอที่จะฆ่าเชื้อราน. การรักษาเชื้อราเป็นเชื้อราที่เก็บได้จากเหมือง (FM), เชื้อราที่เก็บรวบรวมจากเว็บไซต์ควบคุมหรือ เชื้อราที่ไม่ใช่เหมือง (FN) และล้างจุลินทรีย์(F0) พันธุ์พืชแต่ละชนิดถูกกำหนดให้โรงงานเหมือง (PM) และพืชที่ไม่ใช่เหมือง (PN) ห้าถูกบล็อกที่จัดตั้งขึ้นในแต่ละประกอบด้วยสองซ้ำเต็มรูปแบบของการทดลองและสุ่มภายในแต่ละบล็อกรวมทั้งหมด240 หม้อและ 10 ซ้ำที่สมบูรณ์ของการทดลอง การวิเคราะห์ความแปรปรวนพบผลกระทบบล็อกไม่มี. พืชที่ปลูกเป็นเวลาสี่เดือนในเรือนกระจกที่มีวันที่สิบหกชั่วโมง หม้อแต่ละคนได้รับ 50 มล. ของปีเตอร์สัน 15-0-15 ปุ๋ยลดลงเหลือ 5.5 กรัม / ลิตร, เป็นประจำทุกสัปดาห์ พืชที่ถูกรดน้ำทุกวัน ในการเก็บเกี่ยวพืชที่ถูกตัดแม้จะมีดินแห้งแล้ว3 วันในเตาอบ◦C 60 และชั่งน้ำหนักสำหรับพลังงานชีวมวลเหนือพื้นดิน รากที่เหลืออยู่และดินที่ถูกถอดออกจาก deepots เหมือนเดิมที่ชั่งน้ำหนักและแบ่งออกแล้วประมาณครึ่งตามยาว ครึ่งหนึ่งของแต่ละคนได้รับการชั่งน้ำหนักแล้ว รากถูกสกัดจากครึ่งหนึ่งของแบ่งตัวอย่างแห้งเป็นเวลาสามวันในเตาอบ◦C 60 และชั่งน้ำหนักอีกครั้ง. ชีวมวลรากทั้งหมดได้รับการประเมินขึ้นอยู่กับส่วนของดิน. อีกครึ่งหนึ่งของรากและดินถูกสงวนไว้สำหรับเป็นหัวเชื้อทดลองที่ตามมา ตัวอย่างรากจากหม้อทุกมีการย้อมและการขาดการตรวจสอบหรือการปรากฏตัวของเชื้อรา AM เชื้อทั้งหมดพืชพบว่าท่าเรือเชื้อรา AM และไม่มีการควบคุม F0 ถูกอาณานิคมโดยเชื้อราน. กล้าเชื้อที่อาจเกิดขึ้นได้รับการประเมินโดยใช้ข้าวฟ่างที่ปลูกในแต่ละประเภทหัวเชื้อ (FM และ FN) สองถูกเจือจางเตรียมหัวเชื้อบริสุทธิ์และหัวเชื้อเจือจาง 01:10 โดยปริมาตรด้วยทรายผ่านการฆ่าเชื้อ หลังแสดงให้เห็นถึงระดับการลดสัดส่วนเดียวกับที่ใช้ในการทดลอง ห้าซ้ำของการรักษาแต่ละถูกนำมาปลูกและเก็บเกี่ยวหลังจาก 40 วัน รากมีการย้อมสีฟ้า Trypan และติดตั้งอยู่บนสไลด์ Arbuscules, ถุงและเส้นใยนับคะแนนและต่อMcGonigle et al, (1990) ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญที่พบระหว่างสอง inocula บนพื้นฐานของการวิเคราะห์แบบสองทางความแปรปรวน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . ทดลองใช้ทดลอง
เรือนกระจกเต็มแบบ Randomized Block Design
ถูกนำมาใช้ มันรวมอยู่ในดิน 2 ประเภท 3
inocula และสองชุดสองสายพันธุ์ที่แตกต่างกันของพืช
ทดลองทั้งหมดจำนวน 10 ครั้งรวมเป็น 240 พืช
ซึ่งเมล็ดโดยตรงใน deepotstm ( stewe &บุตร ) หม้อ
เป็นรูปแบบ d40 ประเภท H ซึ่งเป็น 25 ซม. ลึกที่มีเส้นผ่านศูนย์กลาง
ของ 6.4cm และปริมาณรวม 656 มล.
สองชนิดคือ ดินดินเหมือง ( MS ) และไม่เหมืองดิน ( NS )
ดินเหมืองประกอบด้วยนักภาษาศาสตร์ถ่านหินจากเหมืองมาผสมกับทรายในอัตราส่วน 50 : 50
. ไม่ใช่เหมืองดินประกอบด้วยสารอาหาร
ดินเหนียวต่ำผสมกับทรายในอัตราส่วน 50 : 50 . ทั้งสื่อผ่าน
ผ่าน 1 ใน . ลวดตาข่ายเพื่อเอา clumps ขนาดใหญ่และเปิดใน
ผสมซีเมนต์เพื่อรับประกันการผสมดินและทราย / ถ่านหิน อย่างละเอียด
สื่อไอพาสเจอร์ไรส์เป็นเวลาสามวันในกระบะ . .
วิธีนี้ก่อนหน้านี้ได้ถูกทดสอบ และตรวจสอบ โดย
ห้องปฏิบัติการของเราเป็นเพียงพอที่จะฆ่าเป็นเชื้อรา รักษาเชื้อรา เป็นเชื้อรา
เก็บจากเหมือง ( FM ) ,
รารวบรวมจากการควบคุมเว็บไซต์หรือไม่เชื้อราของฉัน ( FN ) และ
ล้างจุลินทรีย์ ( ละ )พืชแต่ละชนิดมีชุดเขต
พืชของฉัน ( PM ) และพืชของฉันไม่ ( PN ) ห้าบล็อก
ก่อตั้งแต่ละประกอบด้วย 2 แบบเต็มรูปแบบของการทดลองแบบสุ่มในบล็อค
แล้ว รวมทั้งหมด 240 หม้อและ 10
ที่สมบูรณ์แบบของการทดลอง การวิเคราะห์ความแปรปรวนพบ

ไม่มีผล บล็อก ปลูก 4 เดือนในเรือนกระจกกับ
วันนี้เวลา 16 แต่ละหม้อได้รับ 50 มิลลิลิตร Peterson 15-0-15
ปุ๋ย ประมาณ 5.5 กรัม / ลิตร ในสัปดาห์ พืชรดน้ำ
ทุกวัน ในการเก็บเกี่ยวพืชที่ถูกตัดด้วยดินแห้งสำหรับ
3 วัน เป็น 60 ◦ C เตาอบและน้ำหนักมวลชีวภาพเหนือพื้นดิน .
เหลือรากและดินออกเหมือนเดิม จาก deepots
, ชั่งน้ำหนัก แล้วแบ่งครึ่งตามยาวแต่ละครึ่งคือ
แล้วชั่งน้ำหนัก รากสกัดจากครึ่งหนึ่งของแบ่ง
ตัวอย่างแห้ง 3 วัน เป็น 60 ◦ C เตาอบและชั่งน้ำหนักอีกครั้ง
ชีวมวลรากทั้งหมดคาดตามสัดส่วนของดิน .
อีกครึ่งหนึ่งของรากและดินที่ถูกสงวนไว้เป็นเชื้อสำหรับ
การทดลองที่ตามมา รากตัวอย่างจากทุกหม้อใช้ย้อม
และตรวจสอบสถานะของการขาด หรือเป็นเชื้อราปลูกพืชพบทั้งหมด
ท่าเรือเป็นเชื้อรา และไม่มีการควบคุมของละ
เป็นเมืองขึ้นเป็นเชื้อรา เชื้ออาจถูกประเมินโดยใช้

ข้าวฟ่างที่ปลูกเชื้อในแต่ละประเภท ( FM และ FN ) สองวิธีการคือ
เตรียมเชื้อบริสุทธิ์และเชื้อเจือจาง 1 : 10 โดยปริมาตร
ทรายปลอดเชื้อ หลังหมายถึงระดับการเจือจางเดียวกันใช้
สำหรับการทดลองห้านาทีของการรักษาแต่ละต้น
และเก็บเกี่ยวหลังจาก 40 วัน ราก ใช้ย้อมในไตรแพนสีฟ้า
ติดบนสไลด์ arbuscules เล็ก ) , และถูกนับ
และคะแนนต่อ mcgonigle et al . ( 1990 ) ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างสอง

inocula บนพื้นฐานของการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง