Assessment ofmembrane damage by ATP

Assessment ofmembrane damage by ATP leakage
L. monocytogenes and S. aureus cells were obtained from overnight
cultures prepared as described above. The cells were harvested by
centrifugation at 6000 × g for 10 min and washed twice with PBS
adjusted to pH 7.4. Samples (10 mL) of the final cell suspensions
were transferred to glass test tubes containing 5 mL extract (5 g
mL−1) and 5 mL twice concentrated PBS. After 1 h incubation at
30 ◦C, 4mL were filtered by passage through 0.45 μmmembranes
(Fisher Scientific, Ottawa, Canada). Relative ATP concentrations
in the filtrates were measured using the NovaLum system from
Charm Sciences Inc. (St Lawrence, MA, USA). Leakage of ATP was
deduced from comparisons with positive and negative controls.
Experiments were performed three times with each species.
Statistical analyses
MIC and MBC data and results from chemical analyses were
subjected to analysis of variance (ANOVA) using SPSS Statistics
Standard software (IBM Corp, Sommers, NY, USA). Differences at
P ≤ 0.05 were considered significant. Data from optimization
experimentswere analyzed using the PROC GLM procedure of SAS
(SAS Institute, Cary, NC, USA). Plots were fitted with Sigma Plot
(SystatSoftware,SanJose, CA,USA)using the3-D plot interpolation
function for missing data.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประเมินความเสียหายของ ofmembrane โดย ATP รั่ว
L. monocytogenes และ S. หมอเทศข้างลายเซลล์ที่ได้รับจากแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์
วัฒนธรรมเตรียมตามที่อธิบายไว้ข้างต้น เซลล์ถูกเก็บเกี่ยวโดย
centrifugation ที่ 6000 × g สำหรับ 10 นาที และล้าง ด้วย PBS สอง
ปรับค่า pH 7.4 การ ตัวอย่าง (10 mL) บริการเซลล์สุดท้าย
ถูกโอนย้ายไปทดสอบหลอดประกอบด้วยสารสกัด 5 mL (5 g
mL−1) และ 5 mL เข้มข้น PBS ครั้ง หลังจากบ่ม 1 h ที่
30 ◦C, 4mL ถูกกรอง โดยเส้นทางผ่าน 0.45 μmmembranes
(Fisher วิทยาศาสตร์ ออตตาวา แคนาดา) ความเข้มข้นของ ATP ญาติ
ใน filtrates ถูกวัดโดยใช้ระบบ NovaLum จาก
เสน่ห์วิทยาศาสตร์ Inc. (เซนต์ลอว์เรนซ์ MA สหรัฐอเมริกา) รั่วไหลของ ATP ถูก
deduced จากเปรียบเทียบกับตัวควบคุมบวก และลบ
ทดลองดำเนินสามครั้ง ด้วยสายพันธุ์แต่ละ
วิเคราะห์สถิติ
ไมค์และช่อง MBC ข้อมูลและผลลัพธ์จากการวิเคราะห์ทางเคมี
การวิเคราะห์ความแปรปรวน (การวิเคราะห์ความแปรปรวน) โดยใช้โปรแกรมสถิติ
มาตรฐานซอฟต์แวร์ (IBM Corp, Sommers, NY, USA) ส่วนต่างที่
P ≤ 0.05 ได้ถืออย่างมีนัยสำคัญ ข้อมูลจากเพิ่มประสิทธิภาพ
experimentswere วิเคราะห์โดยใช้กระบวนการ PROC GLM ของ SAS
(SAS สถาบัน แครีแกรนต์ NC, USA) ผืนได้อาบพล็อตซิก
(SystatSoftware, SanJose, CA, USA) ใช้แทรกแทรงพล็อต the3 D
ฟังก์ชันสำหรับข้อมูลที่ขาดหายไป

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การประเมินความเสียหาย ofmembrane โดยเอทีพีรั่วไหล
ลิตร monocytogenes และ S. aureus เซลล์ที่ได้รับจากในชั่วข้ามคืน
วัฒนธรรมที่จัดทำตามที่อธิบายไว้ข้างต้น เซลล์ที่ได้รับการเก็บเกี่ยวโดย
การหมุนเหวี่ยงที่ 6000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีและล้างครั้งที่สองกับพีบีเอส
ปรับค่า pH 7.4 ตัวอย่าง (10 มิลลิลิตร) สนองของเซลล์ขั้นสุดท้าย
ได้รับการถ่ายโอนไปยังหลอดทดลองแก้วที่มีสารสกัดจาก 5 มิลลิลิตร (5 กรัม
ML-1) และ 5 มิลลิลิตรสองเข้มข้นพีบีเอส หลังจาก 1 ชั่วโมงบ่มที่
30 ◦C, 4mL ถูกกรองโดยผ่านทาง 0.45 μmmembranes
(ฟิชเชอร์วิทยาศาสตร์ออตตาวา, แคนาดา) ความเข้มข้นของเอทีพีญาติ
ใน filtrates ถูกวัดโดยใช้ระบบ Novalum จาก
เสน่ห์วิทยาศาสตร์อิงค์ (St Lawrence, MA, USA) การรั่วไหลของเอทีพีได้รับการ
อนุมานจากการเปรียบเทียบกับการควบคุมบวกและลบ
การทดลองได้ดำเนินการสามครั้งกับแต่ละสายพันธุ์
สถิติวิเคราะห์
ค่า MIC และ MBC ข้อมูลและผลลัพธ์ที่ได้จากการวิเคราะห์ทางเคมีที่ถูก
ยัดเยียดให้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA) โดยใช้โปรแกรม SPSS สถิติ
ซอฟต์แวร์มาตรฐาน (ไอบีเอ็มคอร์ป , ซอมเมอร์, นิวยอร์ก, สหรัฐอเมริกา) ความแตกต่างที่
P ≤ 0.05 ได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญ ข้อมูลที่ได้จากการเพิ่มประสิทธิภาพ
experimentswere วิเคราะห์โดยใช้ขั้นตอน PROC GLM ของ SAS
(SAS Institute, แครี, NC, USA) แปลงที่กำลังพอดีกับ Sigma แปลง
(SystatSoftware, SANJOSE, CA, USA) โดยใช้ the3-D พล็อตการแก้ไข
ฟังก์ชั่นสำหรับข้อมูลที่ขาดหาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การประเมินความเสียหายโดยเอทีพีรั่ว
L ลาย monocytogenes S . aureus และเซลล์ที่ได้รับจากวัฒนธรรมค้างคืน
เตรียมตามที่อธิบายไว้ข้างต้น เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดย
3 g 6000 × 10 นาทีและล้างด้วย pbs
2 ค่า pH 7.4 . ตัวอย่าง ( 10 ml ) เซลล์แขวนลอยของ
สุดท้ายคือ แก้ว หลอดทดลองบรรจุ 5 ml สารสกัด (
5 กรัมมล − 1 ) และ 5 ml 2 เข้มข้น PBS หลังจาก 1 ชั่วโมง บ่มที่ 30 ◦
C 4ml ถูกกรองโดยผ่าน 0.45 μ mmembranes
( ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ , ออตตาวา , แคนาดา )
ATP ในสารละลายความเข้มข้นสัมพัทธ์วัดโดยใช้ระบบ novalum จาก
เสน่ห์วิทยาศาสตร์ Inc . ( St Lawrence , MA , USA ) การรั่วของ ATP ถูก deduced จากการเปรียบเทียบกับการควบคุม

ทางบวกและทางลบทดลองสามครั้งแต่ละชนิด วิเคราะห์ทางสถิติและข้อมูล

' MBC และผลวิเคราะห์ทางเคมีเป็น
ภายใต้การวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) โดยใช้โปรแกรม SPSS สถิติ
มาตรฐานซอฟต์แวร์ ( IBM Corp , ซัมเมอร์ , NY , USA ) ความแตกต่างที่
P ≤ 0.05 ถือว่าสำคัญ ข้อมูลจากการทำการทดลอง วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้ glm proc

ขั้นตอนของแซส( สถาบัน SAS , แครี่ , NC , USA ) แปลงให้เหมาะสมกับ Sigma พล็อต
( systatsoftware ซานโจส , CA , USA ) โดยใช้ฟังก์ชันการแปลง the3-d
สำหรับข้อมูลที่หายไป