The wild-type xylanase gene xyl7 wa

The wild-type xylanase gene xyl7 was cloned from the metagenomic
fosmid library using primers xyl7-1F and xyl7-1R. The signal
peptides and protein family domains were predicted by Signal 4.1
[15] and Pfam [16], respectively. The signal peptide was removed
from the xyl7 gene in all constructs. Four types of fragment that
included the GH11-conserved domain were cloned (Fig. 1): xyl7-1F
and xyl7-2R primers were used to amplify the truncated fragment
XYL7-Tr1 [amino acids (aa) 20–253], xyl-1F and xyl-3R were used
to amplify XYL7-Tr2 (aa 20–286), xyl-1F and xyl-4R were used to
amplify XYL7-Tr3 (aa 20–290) and xyl-2F and xyl-4R were used
to amplify XYL7-Tr4 (aa 33–253) (Table 1). The forward and the
reverse primers contained NdeI and EcoRI restriction sites, respectively.
The PCR products were double digested and ligated into
pET28a, and the resulting plasmids were used to transform E. coli
TOP10 for plasmid amplification.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Xyl7 ยีนชนิดป่าไซลาเนสถูกโคลนจาก metagenomicไลบรารี fosmid ที่ใช้ไพรเมอร์ xyl7-1F และ xyl7-1R สัญญาณเปปไทด์และโปรตีนครอบครัวโดเมนถูกทำนาย โดยสัญญาณ 4.1[15] และ Pfam [16], ตามลำดับ เพปไทด์สัญญาณถูกเอาออกจากยีน xyl7 ในโครงสร้างทั้งหมด สี่ชนิดแยกส่วนที่รวมโดเมนอยู่ GH11 ถูกโคลน (Fig. 1): xyl7-1Fและใช้ไพรเมอร์ xyl7-2R ขยายส่วนตัดใช้ XYL7-Tr1 [กรดอะมิโน (aa) 20 – 253], xyl 1F และ xyl 3Rขยาย XYL7-Tr2 (เอเอ 20-286), xyl 1F และ xyl 4R ใช้ขยาย XYL7-Tr3 (aa 20 – 290) และใช้ xyl-2F และ xyl 4Rขยาย XYL7-Tr4 (aa 33 – 253) (ตารางที่ 1) ไปข้างหน้าและไพรเมอร์ย้อนอยู่อเมริกาจำกัด NdeI และ EcoRI ตามลำดับผลิตภัณฑ์ PCR ถูกคู่เจ่า และควบเข้าใช้เพื่อแปลง E. coli pET28a และ plasmids ผลลัพธ์TOP10 สำหรับขยาย plasmid

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ชนิดป่ายีน xyl7 ไซลาเนสเป็นโคลนจาก Metagenomic
ห้องสมุด fosmid โดยใช้ไพรเมอร์ xyl7-1F และ xyl7-1R สัญญาณ
เปปไทด์และโปรตีนโดเมนครอบครัวได้รับการคาดการณ์โดยสัญญาณ 4.1
[15] และ Pfam [16] ตามลำดับ เปปไทด์สัญญาณจะถูกลบออก
จากยีน xyl7 ในโครงสร้างทั้งหมด สี่ประเภทของส่วนที่
รวมโดเมน GH11-ป่าสงวนถูกโคลน (รูปที่ 1.) xyl7-1F
และไพร xyl7-2R ถูกนำมาใช้เพื่อขยายส่วนที่ถูกตัดทอน
XYL7-TR1 [กรดอะมิโน (AA) 20-253] xyl- 1F และ XYL-3R ถูกนำมาใช้
ในการขยาย XYL7-Tr2 (AA 20-286) XYL-1F และ XYL-4R ถูกนำมาใช้เพื่อ
ขยาย XYL7-TR3 (AA 20-290) และ XYL-2F และ XYL-4R ถูกนำมาใช้
ในการ ขยาย XYL7-Tr4 (AA 33-253) (ตารางที่ 1) ไปข้างหน้าและ
ย้อนกลับไพรเมอร์ที่มี NdeI และ EcoRI เว็บไซต์ข้อ จำกัด ตามลำดับ.
ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ถูกย่อยคู่และ ligated เป็น
pET28a และพลาสมิดที่เกิดถูกนำมาใช้ในการแปลงเชื้อ E. coli
TOP10 สำหรับการขยายพลาสมิด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ของยีนไซแลเนส xyl7 ถูกโคลนจากเมตาจีโนมิค
fosmid ห้องสมุดใช้ไพรเมอร์และ xyl7-1f xyl7-1r สัญญาณเปปไทด์และโปรตีนโดเมนเป็นครอบครัว
ทำนายโดยสัญญาณ 4.1
[ 15 ] และ pfam [ 16 ] ตามลำดับ สัญญาณเปปไทด์ถูกลบออก
จากยีน xyl7 ในโครงสร้าง . สี่ประเภทของชิ้นส่วนที่
รวม gh11 เพื่อโดเมนถูกโคลน ( รูปที่ 1 ) : xyl7-1f
xyl7-2r ไพรเมอร์และถูกใช้เพื่อขยายส่วนปลาย
xyl7-tr1 [ กรดอะมิโน ( AA ) และ 20 ( 253 ) xyl-1f xyl-3r ใช้
เพื่อขยาย xyl7-tr2 AA ( 20 – 286 ) และใช้ xyl-1f xyl-4r

ขยาย xyl7-tr3 AA ( 20 – 290 ) และ xyl-2f xyl-4r และถูกใช้เพื่อขยาย xyl7-tr4
AA ( 33 ) 253 ) ( ตารางที่ 1 ) ไปข้างหน้าและย้อนกลับและเว็บไซต์ที่มีอยู่ ndei ไพรเมอร์

ด้วยการ จำกัด ตามลำดับผลิตภัณฑ์ทั้งหมดจะถูกย่อยและผูกเป็นคู่
pet28a และผล ) ถูกใช้เพื่อแปลง E . coli
TOP10 สำหรับพลาสมิดที่ขยาย .