Table 5: Genes Regulated by BCM-7

Table 5: Genes Regulated by BCM-7 treatment involved in glucose homeostasis (P

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตาราง 5: ยีน Regulated BCM-7 รักษาในภาวะธำรงดุลกลูโคส (P < FDR 0.01, < 0.1)ทั้งพันธุดีเอ็นเอ MBD seq เปิดเผย differentially methylated ใบ (DMTs),5 ตามที่กำหนด โดยอัตราการค้นพบเท็จ (FDR) < 0.1 และ ANOVA ตาม ด้วย t นักเรียนไปรษณีย์เฉพาะกิจ -ทดสอบ (p < 0.05) ใบรวมทั้งยีนและ RNAs ไม่ใช่รหัสที่differentially methylated/ทับ ศัพท์ การเปลี่ยนแปลงเหนือพันธุกรรมเป็นการถอดเทป เปลี่ยนแปลงที่เกิดจาก BCM 7 ในทางชีวภาพ หรือหน้าที่เกี่ยวข้องเฉพาะ รับประเมินการใช้เครื่องมือการวิเคราะห์ทางความฉลาด (IPA) และเส้นทางต่าง ๆ ในการแสดงผลสูงสุด 10 ระบุ ผลลัพธ์ที่แสดงในตาราง 5 การเปลี่ยนแปลงในการ สถานะเหนือพันธุกรรมของยีนสำหรับการเผาผลาญน้ำตาลกลูโคส สังเคราะห์ และกลูโคส ภาวะธำรงดุลยังมีรายงานการเปลี่ยนแปลงภายใต้ BCM-7 ดังที่แสดงในตัวเลข 5 และ 6ตัวอย่างที่ 4: ผลของเบต้า Caseins อินซูลินรีเซพเตอร์หนูพยักหน้า 15 (ชาย และหญิง) ได้ถูกป้อนอาหารเสริมใน A1 หรือ A2 เบต้าเคโปรตีนนมจากหย่านม อาหารเหล่านี้ทำ โดยเฉพาะฟีดออสเตรเลียให้องค์ประกอบที่เพียงพอและโภชนาการ รุ่นของหนู (n. = 10) จากแต่ละเพศและอาหารมี euthanased ที่ 10W, 20W และขณะทำการผ่า ที่มีการรวบรวมตัวอย่างต่าง ๆและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ-80 องศาเซลเซียส หนูพยักหน้า 40 แล้วในการศึกษานี้: 10 ต่อกลุ่มชายหญิงอัล 20/A2); 10 ได้ euthanased ที่ 10W 20W รวบรวม และแช่แข็งในตับอ่อนRNAlaterTM'RNA จากเนื้อเยื่อในการวิเคราะห์การถอดรหัส RNA ถูกแยกโดยใช้ชุดการ RNAqueous ® 4PCR จาก Ambion (Austin, TX) ตามขั้นตอนตาม 13โพรโทคอลของผู้ผลิต RNA แยกได้รับการรักษากับ DNase การ RNA ตามนับ RNA โดยใช้ spectrophotometer ND-1000 NanoDrop เพิ่มเติม cDNA เป็น synthesised ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดยใช้การสังเคราะห์ cDNA แรกสาระจากโรช (ใน อินเดียนา) ผสม 1 มิลลิกรัมของ RNA, dNTP มม. 1, 60 mM hexamer สุ่มไพรเมอร์ 5 กับระดับอณูชีววิทยาพอ H2O ถูกเพิ่มเพื่อให้ได้ปริมาณตัวอย่างสุดท้ายของ13 ml ถัดไป ตัวอย่างได้เอทิลแอลกอฮอล์ที่อุณหภูมิ 65° C นาน 5 นาที และจากนั้น วางบนน้ำแข็งTranscriptor RT (20 หน่วย ml) (Roche), ยับยั้งป้องกัน RNase (40 U m1) (Roche), 5เกรด Transcriptor ปเทปฏิกิริยาบัฟเฟอร์ (Roche), และอณูชีววิทยาH2O ถูกเพิ่มไปยังไดรฟ์ข้อมูลสุดท้ายของ 7 ml ในส่วนสองของปฏิกิริยาและสุดท้ายเปลี่ยนปริมาตร 10 กับ 20 mi นี้ตามมา โดยกกไข่ใน PTCThermocycler (M3วิจัย St. Bruno, QC แคนาดา) ที่ 25 ° C 10 นาที และ 30 นาทีในการสิ้นสุด55 องศาเซลเซียส สุดท้าย เอนไซม์ปเทถูกยับยั้ง โดยบ่มที่อุณหภูมิ 85° C 5นาทีตาราง 15 6: ลำดับรองพื้นสำหรับ qRTPCRSr--> ไม่ไปยีน 5' 3' ย้อนหลัง 51--> 3'1 INSR ATCCAGCCTGGGTGACATAG AGGGAG ผม 1 ฉัน GGACAACAACG2 IRS1 AAATTAGCCTGCCCTTCGTT TGCTGGAAACTTCTGCATTGต่อมา ทำทดสอบ qRT PCR ในเพิ่มขึ้นสามเท่าตัวอย่างที่ใช้ในเครื่อง qRT PCR LightCycler 480 จากโรช (Trivedi et al. Mol. Pharmcol. 2014) qRT-ทำ 20 PCR ใช้ 5 มล.ของ cDNA แม่ 10 มม. sense และ antisense ไพร เมอร์ 10SYBR เขียวผมหลักจากโรช dH2O เสียงสุดท้ายของ 20 ml รายชื่อไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับวัตถุประสงค์นี้จะแสดงในตารางที่ 6 ตัวอย่างที่ใส่ผ่านการโพรโทคอต่อไปนี้ กกไข่ 5 นาทีที่ 95° C และ 95° C แล้ว 45 รอบ 10วินาที 60° C เป็นเวลา 20 วินาที และ 72° C เป็นเวลา 30 วินาที ตาม ด้วยรอบเดียว 95° c25 5 วินาที 1 นาทีที่ 65° C และ 97° C สำหรับเส้นโค้งหลอม ตาม ด้วยการทำความเย็นที่40° C สำหรับ 90 วินาที ไม่ควบคุมต้นแบบ (NTC) ถูกเรียกใช้บนแผ่น และเส้นโค้ง dissociation สร้างการตรวจสอบผลิตภัณฑ์เจาะจง และนี้ถูกตามปกติเพื่อหลีกเลี่ยงการขยายใด ๆ ไม่เฉพาะเจาะจง ข้อมูลที่ได้วิเคราะห์โดยใช้วิธีการนับโรช และถูกปกติระดับแอกตินเบต้า30แม้การประดิษฐ์ได้รับการอธิบายเช่น มันควรจะนิยมที่เปลี่ยนแปลงและปรับเปลี่ยนได้โดยไม่ต้องออกจากขอบเขตของการประดิษฐ์ตามที่กำหนดในการเรียกร้อง นอกจากนี้ เรียกว่าเทียบเท่าอยู่ในคุณลักษณะเฉพาะ เทียบเท่าดังกล่าวจะถูกรวมเป็นถ้าเรียกเฉพาะในนี้ข้อกำหนด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตารางที่ 5: ยีนควบคุมโดย BCM-7 การรักษาส่วนร่วมในการรักษาสมดุลของน้ำตาลกลูโคส (P <0.01, FDR <0.1)
ทั้งจีโนมดีเอ็นเอ MBD-seq เปิดเผยจิตบำบัดสารที่แตกต่างกัน (DMTs)
5 ตามที่กำหนดโดยอัตราการเท็จ Discovery (FDR) <0.1 ANOVA ตาม T- โพสต์-hoc นักเรียน
ทดสอบ (p <0.05) ใบรับรองผลการเรียนรวมทั้งยีนและ RNAs การเข้ารหัสที่ไม่ใช่ที่เป็น
สารที่แตกต่างกัน / คัดลอก การเปลี่ยนแปลงที่เหนือพันธุกรรมเช่นเดียวกับการถอดรหัส
การเปลี่ยนแปลงที่เกิดจาก BCM-7 ในทางเดินที่เกี่ยวข้องเฉพาะทางชีวภาพหรือตามหน้าที่ที่ได้รับ
การประเมินโดยใช้เครื่องมือ Ingenuity Pathway วิเคราะห์ (IPA) และเส้นทางที่แสดงถึงผลกระทบสูงสุด 10 ถูกระบุ ผลที่จะได้แสดงในตารางที่ 5. การเปลี่ยนแปลงใน
เหนือพันธุกรรมสถานะของยีนที่รับผิดชอบในการเผาผลาญกลูโคสการสังเคราะห์และน้ำตาลใน
สภาวะสมดุลนอกจากนี้ยังมีรายงานว่าจะมีการเปลี่ยนแปลงภายใต้ BCM-7 ดังแสดงในรูปที่ 5 และ 6 ตัวอย่างที่ 4: ผลกระทบ ของเบต้า cASEINS บนอินซูลิน15 หนู NOD (ชายและหญิง) ได้รับสารอาหารที่ทั้งใน A1 หรือ A2 เบต้าเคซีนโปรตีนนมจากหย่านม อาหารเหล่านี้ได้ทำโดยฟีดพิเศษออสเตรเลียเพื่อให้แน่ใจว่าองค์ประกอบเพียงพอและโภชนาการ ผองเพื่อนของหนู (n. = 10) จากแต่ละเพศและการรับประทานอาหารที่ถูก euthanased ที่ 10W, 20W และในเวลาของตัวอย่างต่างๆผ่าถูกเก็บรวบรวมและจัดเก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียส 40 NOD หนูถูกใช้ในการศึกษาครั้งนี้: 10 ต่อกลุ่ม (ชาย / หญิง20 AL / A2); 10 ถูก euthanased ที่ 10W และ 20W ตับอ่อนถูกเก็บรวบรวมและแช่แข็งในRNAlaterTM ' อาร์เอ็นเอจากเนื้อเยื่อสำหรับการวิเคราะห์ของ RNA ถอดความถูกแยกออกโดยใช้ชุดRNAqueous®-4PCR จาก Ambion (ออสติน, เท็กซัส) ขั้นตอนที่ตามมาคือตาม13 โปรโตคอลของผู้ผลิต อาร์เอ็นเอบางแห่งได้รับการรักษาด้วยการฟอก DNase RNA ตามด้วยอาร์เอ็นเอปริมาณการใช้ ND-1000 NanoDrop spectrophotometer นอกจากนี้ยีนสังเคราะห์ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยใช้การสังเคราะห์ cDNA แรก Strand จากRoche (อินเดียแนโพลิ) 1 mg ของ RNA 1 มิ dNTP Mix, 60 มิลลิไพรเมอร์ hexamer สุ่ม 5 เพียงพออณูชีววิทยาเกรด H2O ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อให้บรรลุปริมาณตัวอย่างสุดท้ายของ13 มล. ถัดไปตัวอย่างที่ถูกเอทิลแอลกอฮอล์ที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีและจากนั้นวางอยู่บนน้ำแข็ง. Transcriptor RT (20 หน่วย / ml) (Roche) Protector RNase ยับยั้ง (40 U / M1) (Roche) 5 Transcriptor ย้อนกลับ Transcriptase ปฏิกิริยาบัฟเฟอร์ (Roche) และชั้นประถมศึกษาชีววิทยาระดับโมเลกุลH2O ถูกเพิ่มเข้าไปในปริมาณสุดท้ายของ 7 มล. ในส่วนที่สองของการเกิดปฏิกิริยาและสุดท้ายปริมาณ 10 ปรับ 20 ไมล์ นี้ตามด้วยการบ่มใน PTCThermocycler (M3 วิจัยเซนต์บรูโน่, QC, แคนาดา) ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและจบลงด้วย 30 นาทีที่55 ° C สุดท้ายเอนไซม์ย้อนกลับ transcriptase ถูกยับยั้งโดยการบ่มที่ 85 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที. 15 ตารางที่ 6: รองพื้นลำดับสำหรับ qRTPCR Sr ไม่มียีนไปข้างหน้า 5 '-> 3' ย้อนกลับ 51 -> 3 ' 1 INSR ATCCAGCCTGGGTGACATAG AGGGAG ฉัน 1 ผม GGACAACAACG 2 IRS1 AAATTAGCCTGCCCTTCGTT TGCTGGAAACTTCTGCATTG ต่อจากนั้นทดสอบ qRT-PCR ได้รับการดำเนินการกับตัวอย่างเพิ่มขึ้นสามเท่าโดยใช้เครื่อง LightCycler 480 qRT-PCR จาก Roche (Trivedi et al., Mol. Pharmcol. 2014) qRT- 20 PCR ได้ดำเนินการโดยใช้ขนาด 5 ml ของแม่แบบ cDNA 10 มิลลิความรู้สึกและแอนตี้ไพรเมอร์ 10 มล. สีเขียว SYBR ฉันโทจาก Roche เช่นเดียวกับ dH2O ในปริมาณสุดท้ายของ 20 มล. รายชื่อของไพรเมอร์ใช้เพื่อวัตถุประสงค์นี้จะแสดงในตารางที่ 6 กลุ่มตัวอย่างที่ถูกนำผ่านโปรโตคอลดังต่อไปนี้ บ่มเป็นเวลา 5 นาทีที่ 95 ° C แล้ว 45 รอบจาก 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 วินาที 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 วินาทีและ 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 วินาทีตามด้วยรอบเดียว 95 ° C 25 สำหรับ 5 วินาที 1 นาทีที่ 65 องศาเซลเซียสและ 97 องศาเซลเซียสเป็นเวลาโค้งละลายตามด้วยการระบายความร้อนที่40 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 90 วินาที ไม่มีแม่แบบการควบคุม (กทช) กำลังวิ่งบนจานและเส้นโค้งที่แยกออกจากกันถูกสร้างขึ้นเพื่อตรวจสอบผลิตภัณฑ์เชิญชมและนี่ก็เป็นปกติที่จะหลีกเลี่ยงการใช้เครื่องขยายเสียงที่ไม่เฉพาะเจาะจง วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้วิธีการหาปริมาณ Roche และปกติระดับเบต้าโปรตีน. 30 แม้ว่าการประดิษฐ์ได้รับการอธิบายโดยวิธีการเช่นนี้ก็ควรได้รับการชื่นชมว่ารูปแบบและการปรับเปลี่ยนอาจจะทำโดยไม่ต้องออกจากขอบเขตของการที่ประดิษฐ์ ตามที่กำหนดไว้ในการเรียกร้อง นอกจากนี้ที่เทียบเท่าที่รู้จักกันอยู่เพื่อคุณลักษณะเฉพาะเทียบเท่าดังกล่าวได้มีการรวบรวมเป็นถ้าเรียกโดยเฉพาะในเรื่องนี้สเปค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตารางที่ 5 : ยีนควบคุมโดยการมีส่วนร่วมใน bcm-7 homeostasis กลูโคส ( p < 0.01 , FDR < 0.1 )ทั้งจีโนมดีเอ็นเอ mbd seq พบต่างกัน methylated transcripts ( dmts )5 ตามที่กำหนดโดยอัตราการค้นพบเท็จ ( FDR ) < 0.1 และ ANOVA ตามโพสต์ hoc นักเรียนทีทดสอบ ( p < 0.05 ) ใบรวมทั้งยีนและรหัส RNAs ที่โนนต่างกัน methylated / การทับศัพท์ การเปลี่ยนแปลงเหนือพันธุกรรมเช่นเดียวกับบัณฑิตยสถานการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจาก bcm-7 เฉพาะในทางชีวภาพ หรือติดทางเดินที่เกี่ยวข้องคือประเมินความฉลาดทางเครื่องมือและแนวทางวิเคราะห์ ( IPA ) ซึ่ง 10 สูงสุดผลกระทบแบบระบุ ผลลัพธ์ที่ได้จะแสดงใน ตารางที่ 5 การเปลี่ยนแปลงในเหนือพันธุกรรมสถานะของยีนที่รับผิดชอบในการเผาผลาญกลูโคส การสังเคราะห์ และกลูโคสภาษีอากรยังรายงานว่า จะเปลี่ยนแปลงไปตาม bcm-7 ดังแสดงในรูปที่ 5 และ 6ตัวอย่างที่ 4 : ผลของเบต้าตระหนกตกใจในตัวรับอินซูลิน15 พยักหน้า หนู ( ชายและหญิง ) ได้รับอาหารอุดมสมบูรณ์ ทั้ง A1 หรือ A2 เบต้าเคซีนนมโปรตีนจากหย่านม อาหารเหล่านี้ได้ โดยเฉพาะอาหารออสเตรเลียเพื่อให้แน่ใจว่าองค์ประกอบที่เพียงพอและโภชนาการ เพื่อนของหนู ( N = 10 ) จากแต่ละเพศและอาหารเป็น euthanased ที่แกะสลัก , แกะสลักและในเวลาของการเก็บตัวอย่างต่าง ๆเก็บไว้ที่อุณหภูมิ - 80 องศา C 40 พยักหน้า หนูติดตามในการศึกษา : 10 กลุ่ม ( ชาย / หญิง20 อัล / A2 ) ; 10 euthanased ที่ 10W และแกะสลัก ตับอ่อนถูกเก็บและแช่แข็งในrnalatertm 'DNA จากเนื้อเยื่อสำหรับการวิเคราะห์ RNA ถอดแยกใช้® - rnaqueous 4pcr ชุดจาก ambion ( TX Austin ) ขั้นตอนที่ตามมาคือตาม13 .โปรโตคอลของผู้ผลิต แยก RNA ได้รับการตรวจหา ADNase ให้บริสุทธิ์ตามปริมาณอาร์เอ็นเอ RNA โดยใช้ nd-1000 nanodrop วัสดุ เพิ่มเติมถูกสังเคราะห์ cDNA ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ใช้วิธีสังเคราะห์จากเฟิร์ส สแตนด์โรช ( Indianapolis , ) 1 มิลลิกรัมของอาร์เอ็นเอ ผสม dntp 1 mm , 60 มม. แบบเฮกเซอเมอร์ไพรเมอร์ , 5 กับชีววิทยาระดับโมเลกุล H2O เพียงพอเกรดเพิ่มเพื่อให้บรรลุสุดท้ายตัวอย่าง ปริมาณของ13 มล. ต่อไป ตัวอย่าง ( denatured 65 ° C เป็นเวลา 5 นาที แล้ววางไว้บนน้ำแข็งtranscriptor RT ( 20 หน่วย / มล. ) ( ยา ) ป้องกันเลส inhibitor ( 40 U / M1 ) ( ยา ) , 5transcriptor reverse transcriptase ปฏิกิริยาบัฟเฟอร์ ( ยา ) , และระดับอณูชีววิทยาH2O ก็เพิ่มปริมาณสุดท้าย 7 ml ในส่วนที่สองของปฏิกิริยา และสุดท้ายเล่ม 10 ปรับ 20 มิ . นี้ตามด้วยการบ่มเพาะใน ptcthermocycler ( ลบ .วิจัย , St . Bruno , QC , แคนาดา ) ที่อุณหภูมิ 25 ° C เป็นเวลา 10 นาที และสิ้นสุด 30 นาทีที่55 องศา สุดท้าย , reverse transcriptase เอนไซม์ถูกยับยั้งโดยการบ่มที่ 85 ° C 5นาทีตารางที่ 6 : 15 qrtpcr รองพื้นลำดับสำหรับSR ไม่มียีนไปข้างหน้า 5 ' - 3 ' ย้อนกลับ ' 51 -- > 31 insr atccagcctgggtgacatag agggag ชั้น 1 ผม ggacaacaacg2 irs1 aaattagcctgcccttcgtt tgctggaaacttctgcattgภายหลัง ข้าพเจ้า PCR assay คือใช้ตัวอย่างทำสำเนาสามฉบับ โดยใช้lightcycler 480 ข้าพเจ้า PCR เครื่องจาก โรช ( ตริเวดี et al . , วิเคราะห์ pharmcol . 2014 ) ข้าพเจ้า -20 เทคนิคการใช้ 5 ml ของแม่แบบดีเอ็นเอ 10 มม. sense และ antisense ไพรเมอร์ , 10มล. สีเขียว SYBR ต้นแบบจากโรช ตลอดจน dh2o ในเล่มสุดท้ายของ 20 มล. รายการไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับวัตถุประสงค์นี้จะแสดงในตารางที่ 6 ตัวอย่างที่ใส่ผ่านดังต่อไปนี้โปรโตคอล ; บ่มเป็นเวลา 5 นาทีที่ 95 องศา C แล้ว 45 รอบ 95 องศา C 10วินาที , 60 ° C เป็นเวลา 20 วินาที กับ 72 ° C เป็นเวลา 30 วินาที ตามด้วยรอบเดียว 95 องศา C25 5 วินาที , 1 นาทีที่ 65 ° C และ 97 ° C ละลายโค้งตามความเย็นที่40 ° C เป็นเวลา 90 วินาที ไม่มีแม่แบบการควบคุม ( กทช ) วิ่งบนจานและการแยกตัวออกโค้งถูกสร้างขึ้นเพื่อตรวจสอบผลิตภัณฑ์ที่ไม่จำเพาะ และนี่เป็นปกติเพื่อหลีกเลี่ยงการใด ๆชนิดขยาย . วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้วิธีการและปริมาณยา เท่ากับระดับแอคตินเบต้า30แม้ว่าการประดิษฐ์ได้รับการอธิบายโดยวิธีการเช่นควรชื่นชมที่การเปลี่ยนแปลงและการปรับเปลี่ยนอาจจะทำโดยไม่ต้องเดินทางออกจากขอบเขตของการประดิษฐ์ตามที่กำหนดในการเรียกร้อง นอกจากนี้ที่รู้จักกันมีอยู่คุณสมบัติเฉพาะส่วน เช่น ส่วนจะรวมถ้าอ้างในนี้โดยเฉพาะสเปค