2.2. Sample preparationExtractions

2.2. Sample preparation

Extractions of PSPAs were performed as previously described (Li et al., 2013), with some modifications. Briefly, each sample of PSP powder (50.0 g) was centrifuged for 15 min (4000 rpm, 3500g, 4 °C) after extraction with 1.0 L 50% aqueous ethanol containing 0.05% hydrochloric acid for 24 h at 4 °C in the dark. The supernatant was concentrated by evaporation under vacuum at 40 °C and the concentrated extract was applied to a macroporous resin AB-8 column that had been pre-equilibrated with water containing 1% formic acid. The column was then equilibrated with three column volumes (3 CV) of the equilibrium liquid to remove sugars and proteins. PSPAs were then eluted with 3 CV 70% aqueous ethanol containing 1% formic acid; the eluent was concentrated under vacuum (40 °C) to remove the ethanol from the solution. The concentrate was partitioned with ethyl acetate (200 mL × 3) to remove other phenols ( Oki et al., 2002). The aqueous fraction was then lyophilised (−40 °C) to obtain a dry powder, 10% of which was weighed and dissolved in 100 mL water prior to total anthocyanin content (TAC) analysis, while the remaining powder was stored at −20 °C for use in the other experiments.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 เตรียมตัวสกัดของ PSPAs ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Li et al., 2013) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง สั้น ๆ ตัวอย่างของผง PSP แต่ละ (50.0 กรัม) ถูกปั่นเป็นเวลา 15 นาที (4000 รอบต่อนาที 3500g 4 ° C) หลังจากที่สกัด 1.0 L 50% เอทานอลในน้ำที่มี 0.05% กรดไฮโดรคลอริกเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสในที่มืด . สารละลายเข้มข้นโดยการระเหยภายใต้สุญญากาศที่ 40 องศาเซลเซียสและสารสกัดเข้มข้นถูกนำไปใช้เรซิน macroporous คอลัมน์ AB-8 ที่ได้รับก่อน equilibrated กับน้ำที่มี 1% กรด คอลัมน์ถูก equilibrated แล้วกับสามเล่มคอลัมน์ (3 CV) สมดุลของของเหลวในการลบน้ำตาลและโปรตีน PSPAs ถูกชะแล้วกับ 3 CV 70% เอทานอลที่มีส่วนผสมของน้ำ 1% กรด; ชะถูกเข้มข้นภายใต้สูญญากาศ (40 ° C) เพื่อเอาเอทานอลจากการแก้ปัญหา สมาธิกั้นด้วยเอทิลอะซิเตท (200 มิลลิลิตร× 3) เพื่อเอาฟีนอลอื่น ๆ (โอกิ et al., 2002) ส่วนน้ำที่ถูกแล้ว lyophilised (-40 ° C) เพื่อให้ได้ผงแห้ง 10% ของที่ได้รับการชั่งน้ำหนักและละลายในน้ำ 100 มิลลิลิตรก่อนที่จะมีเนื้อหา anthocyanin รวม (TAC) การวิเคราะห์ในขณะที่ผงที่เหลือเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 ° C เพื่อใช้ในการทดลองอื่น ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . ตัวอย่างการเตรียม

การสกัดของ pspas จำนวนตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า ( Li et al . , 2013 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน สั้น ๆ , แต่ละตัวอย่างของ PSP ผง ( 50.0 g ) ไฟฟ้า 15 นาที ( 4000 รอบต่อนาที 3500g 4 ° C ) หลังจากการสกัด 1.0 ลิตร สารละลายเอธานอล 50% ประกอบด้วย 0.05% กรดเกลือ 35% เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 4 ° C ในที่มืดการทำเข้มข้นโดยการระเหยภายใต้สูญญากาศสูงที่ 40 ° C และสารสกัดเข้มข้นที่ใช้กับ macroporous เรซิน ab-8 คอลัมน์ที่ได้รับก่อน equilibrated กับน้ำที่มี 1% กรด . คอลัมน์ก็ equilibrated สามคอลัมน์ปริมาณ ( 3 พันธุ์ ) ของสมดุลของเหลวที่จะเอาน้ำตาลและโปรตีนpspas จำนวน 3 ตัวอย่าง CV 70% เอทานอลที่มีสารละลาย 1 % กรด ; สารละลายข้นภายใต้สุญญากาศ ( 40 ° C ) ให้เอาเอทานอลจากสารละลาย สมาธิถูกกั้นด้วยเอทิลอะซิเตท ( 200 ml × 3 ) เพื่อกำจัดฟีนอลอื่นๆ ( โอคิ et al . , 2002 ) ส่วนน้ำก็ lyophilised ( − 40 ° C ) เพื่อให้ได้ผงแห้ง10 % ของที่หนักและละลายในน้ำ 100 มิลลิลิตร จะมีปริมาณแอนโธไซยานิน ( TAC ) การวิเคราะห์ในขณะที่ผงที่เหลือก็เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 20 ° C −เพื่อใช้ในการทดลองอื่น ๆ