2.4. ABA analysisSeeds with a weigh

2.4. ABA analysis

Seeds with a weight of 2 g were transferred to a mortar and ground into a powder before being mixed with 0.5 g sodium diethyldithiocarbamate and 20 mL 80% methanol. They were left to stand overnight in darkness. The next day, the solution was shaken using a vortex with 0.4 g polyvinyl pyrrolidone for 10 min, centrifuged at 3000 × g for 10 min and the supernatant was extracted with 10 mL 80% methanol twice. The combined solution was then vacuum concentrated (35 °C), extracted with ethyl acetate and filtered with a 0.22 μm membrane.

ABA was determined via the UPLC–MS/MS method. Liquid chromatography: Agilent 1260 Infinity; mass spectrometer: AB SCIEX QTRAP 5500; UPLC: Agilent SB-C18 column (4.6 mm × 50 mm, 1.8 μm particle size). The column temperature was 35 °C, flow rate was 0.8 mL min−1 and injection volume was 1 μL. The solvent system consisted of acetonitrile (A) and 0.1% acetic acid (B); MS: electro-spray ionization (negative mode) via multiple reaction monitoring (MRM) mode. The ion source temperature was 600 °C, ion source capillary voltage was 4500 V and the pressure of the nebulizer gas was 40 psi. Analyst version: 1.6.1. All the operations were performed according to the manufacturer's instructions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4. ABA วิเคราะห์เมล็ด มีน้ำหนัก 2 กรัมถูกโอนไปยังครก และบดเป็นผงก่อนการผสมกับ 0.5 กรัมโซเดียม diethyldithiocarbamate และ 20 mL 80% เมทานอล พวกเขาถูกทิ้งให้ยืนค้างคืนในความมืด ในวันถัดไป โซลูชันเขย่าด้วยวังวน pyrrolidone โพลีไวนิล 0.4 g 10 นาที จากที่ 3000 × g 10 นาที และ supernatant ถูกสกัด ด้วยเมทานอล 80% 10 mL สองครั้ง โซลูชั่นที่รวมได้แล้วดูดเข้มข้น (35 ° C), สกัด ด้วยเอทิลอะซิเตท และกรอง ด้วยเยื่อที่ 0.22 ไมครอนABA ที่ถูกกำหนด ด้วยวิธีการเผาผลาญ UPLC – MS/MS ของเหลว chromatography: Agilent อินฟินิตี้ 1260 สเปกโตรมิเตอร์มวล: AB SCIEX QTRAP 5500 เผาผลาญ UPLC: คอลัมน์ Agilent SB-C18 (4.6 มม. × 50 มม. 1.8 ไมครอนอนุภาคขนาด) แก้ไขคอลัมน์อุณหภูมิ 35 ° C อัตราการไหล 0.8 mL min−1 และฉีดปริมาณ 1 μL ระบบตัวทำละลายประกอบด้วย acetonitrile (A) และกรดซิตริก 0.1% (B); MS: ไอออไนซ์ไฟฟ้าสเปรย์ (โหมดลบ) ผ่านหลายปฏิกิริยา (MRM) โหมดการตรวจสอบ อุณหภูมิแหล่งไอออน 600 ° C แรงดันไฟฟ้าฝอยแหล่งไอออนถูก 4500 V และความดันของก๊าซฝอยละออง 40 psi นักวิเคราะห์รุ่น: 1.6.1 การดำเนินงานถูกดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 ABA วิเคราะห์

เมล็ดมีน้ำหนัก 2 กรัมถูกโอนไปยังครกและบดเป็นผงก่อนที่จะถูกนำมาผสมกับ 0.5 กรัมโซเดียมและ diethyldithiocarbamate 20 มลเมทานอล 80% พวกเขาถูกทิ้งให้ยืนค้างคืนอยู่ในความมืด ในวันถัดไป, การแก้ปัญหาถูกเขย่าโดยใช้น้ำวนที่มี 0.4 กรัม pyrrolidone โพลีไวนิลเป็นเวลา 10 นาที, หมุนเหวี่ยงที่ 3000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีและใสถูกสกัดด้วย 10 มลเมทานอล 80% เป็นครั้งที่สอง วิธีการแก้ปัญหาร่วมกันจากนั้นก็สูญญากาศเข้มข้น (35 ° C) สกัดด้วยเอทิลอะซิเตทและกรองด้วยเมมเบรน 0.22 ไมโครเมตร.

ABA ถูกกำหนดโดยผ่านวิธีการ UPLC-MS / MS ของเหลว chromatography: Agilent 1260 อินฟินิตี้; สเปกโตรมิเตอร์มวล: AB SCIEX QTRAP 5500; UPLC: Agilent SB-C18 คอลัมน์ (4.6 มิลลิเมตร× 50 มิลลิเมตร 1.8 ไมครอนขนาดอนุภาค) อุณหภูมิคอลัมน์ 35 ° C อัตราการไหล 0.8 มลนาทีที่ 1 และฉีดปริมาณ 1 ไมโครลิตร ระบบตัวทำละลายประกอบด้วย acetonitrile (A) และ 0.1% กรดอะซิติก (B); MS: สเปรย์ไฟฟ้าไอออไนซ์ (โหมดลบ) ผ่านโหมดการตรวจสอบปฏิกิริยาหลาย ๆ (MRM) อุณหภูมิแหล่งกำเนิดไอออน 600 ° C, แรงดันไฟฟ้าไอออนแหล่งที่มาของเส้นเลือดฝอยเป็น 4500 V และความดันของก๊าซ nebulizer คือ 40 ปอนด์ต่อตารางนิ้ว รุ่นนักวิเคราะห์: 1.6.1 การดำเนินงานทั้งหมดได้ดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การวิเคราะห์ 2เมล็ดพันธุ์ที่มีน้ำหนัก 2 กรัม มีการโอนครกและบดเป็นผงก่อนจะถูกผสมกับ 0.5 กรัม และโซเดียม diethyldithiocarbamate 20 ml 80% เมทานอล พวกเขาถูกทิ้งให้ยืนค้างคืนในที่มืด วันต่อมา โซลูชั่นที่ถูกเขย่าใช้ Vortex กับไวนิล pyrrolidone 0.4 กรัม 10 นาที ระดับที่ 3 × G 10 นาที และนำสาร 10 ml 80% เมทานอลสองครั้ง โซลูชั่นรวมแล้วสูญญากาศ ( 35 ° C ) เข้มข้นสกัดด้วยเอทิลอะซิเตท และกรองด้วย 0.22 μ M ของเยื่อแผ่นABA ตั้งใจผ่าน MS / MS uplc –วิธีการ วิธีโครมาโทกราฟีของเหลว : Agilent 1260 ไม่มีที่สิ้นสุด ; แมสสเปกโทรมิเตอร์ : AB sciex qtrap 5500 ; uplc : คอลัมน์ด้าน sb-c18 ( 4.6 มิลลิเมตร× 50 mm 1.8 μ M ขนาดอนุภาค ) คอลัมน์ที่อุณหภูมิ 35 องศา C อัตราการไหล 0.8 มิลลิลิตรต่อนาที− 1 และปริมาณการฉีดคือ 1 ลิตร ละลายμประกอบด้วยไน ( ) และ 0.1% กรด ( b ) ; MS : ไอพ่นไฟฟ้า ( โหมดลบ ) ผ่านการตรวจสอบปฏิกิริยาหลาย ( mrm ) โหมด แหล่งกำเนิดไอออนที่อุณหภูมิ 600 องศา C ซึ่งเป็นแหล่งกำเนิดไอออนแรงดันไฟฟ้า ( V ) และแรงดันของแก๊ส nebulizer 40 psi . รุ่นนักวิเคราะห์ : . . การดำเนินงานทั้งหมด มีการปฏิบัติตามคำแนะนำของผู้ผลิต