We investigated the enzymatic prope

We investigated the enzymatic properties of a serralysin-type metalloenzyme, provisionally named as
protease B, which is secreted by Xenorhabdus bacterium, and probably is the ortholog of PrA peptidase of
Photorhabdus bacterium. Testing the activity on twenty-two oligopeptide substrates we found that protease B
requires at least three amino acids N-terminal to the scissile bond for detectable hydrolysis. On such substrate
protease B was clearly specific for positively charged residues (Arg and Lys) at the P1 substrate position and
was rather permissive in the others. Interestingly however, it preferred Ser at P1 in the oligopeptide substrate
which contained amino acids also C-terminal to the scissile bond, and was cleaved with the highest kcat/KM
value. The pH profile of activity, similarly to other serralysins, has a wide peak with high values between pH
6.5 and 8.0. The activity was slightly increased by Cu2+ and Co2+ ions, it was not sensitive for serine protease
inhibitors, but it was inhibited by 1,10-phenanthroline, features shared by many Zn-metalloproteases. At the
same time, EDTA inhibited the activity only partially even either after long incubation or in excess amount,
and Zn2+ was inhibitory (both are unusual among serralysins). The 1,10-phenanthroline inhibited activity
could be restored with the addition of Mn2+, Cu2+ and Co2+ up to 90–200% of its original value, while Zn2+
was inefficient. We propose that both the Zn inhibition of protease B activity and its resistance to EDTA
inhibition might be caused by an Asp in position 191 where most of the serralysins contain Asn.
Crown Copyright © 2011 Published by Elsevier B.V. All rights reserved

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราตรวจสอบคุณสมบัติของ metalloenzyme เป็นชนิด serralysin สู่ชื่อเป็นเอนไซม์ในระบบรติเอส B ที่ secreted โดยแบคทีเรีย Xenorhabdus และอาจจะเป็น ortholog ของ peptidase พระของPhotorhabdus แบคทีเรีย ทดสอบกิจกรรมบนพื้นผิว oligopeptide ยี่สิบสองเราพบว่ารติเอส Bต้องน้อย 3 กรดอะมิโน N-เทอร์มินัลเพื่อพันธะ scissile สำหรับไฮโตรไลซ์อาสา บนพื้นผิวดังกล่าวรติเอส B ถูกชัดเจนเฉพาะเจาะจงสำหรับการคิดค่าธรรมเนียมบวกตก (อาร์กิวเมนต์ของค่าและ Lys) ที่ตำแหน่ง P1 พื้นผิว และมีแต่ permissive อื่น ๆ เรื่องน่าสนใจอย่างไรก็ตาม มันต้อง Ser ที่ P1 ในพื้นผิว oligopeptideซึ่งประกอบด้วยกรดอะมิโนยังสถานี C กับตราสารหนี้ scissile และถูกแหวกกับ kcat/KM สูงสุดค่า โพรไฟล์ค่า pH ของกิจกรรม ทำนองอื่น ๆ serralysins มีช่วงกว้าง มีค่าระหว่างค่า pH ที่สูง6.5 และ 8.0 กิจกรรมที่เพิ่มขึ้น Cu2 + และ Co2 + กันเล็กน้อย ไม่สำคัญสำหรับรติเอสแถinhibitors แต่ถูกห้าม โดย 1,10-phenanthroline คุณลักษณะที่ใช้ร่วมกัน โดยหลาย Zn-metalloproteases ที่กัน EDTA ห้ามกิจกรรมเพียงบางส่วนได้หรือหลัง จากบ่มนาน ในยอด เงินส่วนเกินและ Zn2 + ลิปกลอสไข (ทั้งปกติระหว่าง serralysins) กิจกรรมห้าม phenanthroline 1,10ไม่สามารถคืนค่าแห่ง Mn2 + Cu2 + และ Co2 + ค่า 90 – 200% ของค่าเดิม ขณะ Zn2 +ไม่ไม่ เราเสนอที่ทั้งยับยั้ง Zn กิจกรรมรติเอส B และความต้านทานการ EDTAยับยั้งอาจเกิดจากการ Asp ในตำแหน่ง 191 ที่สุดของ serralysins ประกอบด้วย Asnคราวน์ลิขสิทธิ์ © 2011 เผยแพร่ โดย Elsevier b.v สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราตรวจสอบคุณสมบัติของเอนไซม์ metalloenzyme serralysin ชนิดชื่อชั่วคราวเป็น
โปรติเอสบีซึ่งจะหลั่งจากแบคทีเรีย Xenorhabdus และอาจจะเป็น ortholog ของพระ peptidase ของ
แบคทีเรีย Photorhabdus การทดสอบกิจกรรมบนยี่สิบสองพื้นผิว Oligopeptide เราพบว่า B โปรติเอส
ต้องมีอย่างน้อยสามกรดอะมิโน N-terminal เพื่อพันธบัตร scissile การย่อยที่ตรวจพบ บนพื้นผิวเช่น
โปรติเอสบีได้อย่างชัดเจนที่เฉพาะเจาะจงสำหรับสารตกค้างที่มีประจุบวก (หาเรื่องและลิซ) ที่ตำแหน่งพื้นผิว P1 และ
ค่อนข้างบุตรในคนอื่น ๆ ที่น่าสนใจ แต่ก็ต้องการ Ser ที่ P1 ในพื้นผิว Oligopeptide
ซึ่งประกอบด้วยกรดอะมิโนยัง C-terminal เพื่อพันธบัตร scissile และถูกตัดด้วยสูงสุด kcat / KM
ค่า รายละเอียดค่า pH ของกิจกรรมคล้าย ๆ กับ serralysins อื่น ๆ มียอดกว้างที่มีค่าพีเอชสูงระหว่าง
6.5 และ 8.0 กิจกรรมที่ได้รับการเพิ่มขึ้นเล็กน้อย Cu2 + และ Co2 + ไอออนมันก็ไม่มีอะไรที่มีความสำคัญสำหรับซีรีนน้ำย่อย
ยับยั้ง แต่มันก็ถูกยับยั้งโดย 1,10-phenanthroline คุณสมบัติที่ใช้ร่วมกันโดยหลาย Zn-metalloproteases ใน
เวลาเดียวกัน, EDTA ยับยั้งกิจกรรมเพียงบางส่วนเท่านั้นแม้แต่อย่างใดอย่างหนึ่งหลังจากที่บ่มนานหรือในปริมาณที่มากเกินไป
และ Zn2 + เป็นยับยั้ง (ทั้งสองมีความผิดปกติในหมู่ serralysins) กิจกรรม 1,10-phenanthroline ยับยั้ง
อาจถูกเรียกคืนด้วยนอกเหนือจาก Mn2 + Cu2 + และ Co2 + ได้ถึง 90-200% ของมูลค่าเดิมในขณะที่ Zn2 +
ก็ไม่มีประสิทธิภาพ เราเสนอว่าทั้งยับยั้งเอนไซม์โปรติเอ Zn กิจกรรม B และความต้านทานต่อ EDTA
ยับยั้งอาจเกิดจากงูเห่าใน 191 ตำแหน่งที่มากที่สุดของ serralysins มี Asn.
มงกุฎลิขสิทธิ์© 2011 จัดทำโดย Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์