2.8. β-oxidation of [1-14C]-labelle

2.8. β-oxidation of [1-14C]-labelled fatty acids
Oxidation of [1-14C]-labelled fatty acids was determined essentially
as described previously but with some modifications (Tocher et al.,
2004). The cells were incubated with [1-14C]-labelled fatty acids as
described above and at the end of the incubation, a 0.5 mL subsample
of the medium was taken and set aside. The remainder of the medium
was discarded, the cell monolayer was washed with PBS and the cells
were detached with 0.05% (w/v) trypsin/0.02% (w/v) EDTA in PBS. The
isolated cells were washed in HBSS containing 1% (w/v) FAF-BSA before
being resuspended in HBSS alone and homogenised using an ULTRATURRAX®
(IKA®) mechanical homogeniser. A subsample (0.5 mL) of
the homogenate was taken and set aside. One-hundred microlitres of
6% (w/v) FAF-BSA in water was added to the subsamples of both the
culture medium and the homogenised cells before acid-insoluble products
were precipitated by the addition of 1.0 mL of ice-cold 4 M HClO4.
The samples were centrifuged at 3500 g for 10 min and 0.5 mL of the
supernatant was mixed with 4 mL of scintillation fluid and radioactivity

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.8. β-ออกซิเดชันของ [1-14C] -มันกรดไขมันออกซิเดชันของ [1-14C] -กรดไขมันมันถูกกำหนดเป็นตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ แต่ มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง (Tocher et al.,2004) เซลล์มี incubated กับ [1-14 C] -มันกรดไขมันเป็นอธิบายไว้ข้างต้น และ ที่สิ้นสุดของคณะทันตแพทยศาสตร์ subsample 0.5 mLของกลางถูกถ่าย และดอง ส่วนเหลือของสื่อถูกละทิ้ง monolayer เซลล์ถูกล้าง ด้วย PBS และเซลล์ที่เดี่ยวกับ trypsin/0.02% 0.05% (w/v) (w/v) EDTA ใน PBS ที่แยกเซลล์ถูกล้างใน HBSS ประกอบด้วย 1% (w/v) บีเอสเอ FAF ก่อนกำลัง resuspended ใน HBSS เพียงอย่างเดียวและ homogenised โดยใช้การ ULTRATURRAX ®(IKA ®) กล homogeniser Subsample (0.5 มล.) ของhomogenate ถูกถ่าย และดอง Microlitres ร้อยของ6% (w/v) FAF บีเอสเอในน้ำถูกเพิ่มเข้าไป subsamples ของทั้งสองสื่อวัฒนธรรมและเซลล์ homogenised ก่อนผลิตภัณฑ์กรดไม่ละลายมีตะกอน โดยการเพิ่ม 1.0 mL ฉ่ำ 4 M HClO4ตัวอย่างถูก centrifuged ที่ 3500 g 10 นาที และ 0.5 mL ของsupernatant ถูกผสมกับ 4 มล.ของเหลว scintillation radioactivity

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.8 ออกซิเดชันของβ [1-14C] -labelled
กรดไขมันออกซิเดชันของ[1-14C] -labelled
กรดไขมันที่ถูกกำหนดเป็นหลักตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้แต่มีการปรับเปลี่ยนบางส่วน (Tocher et al.,
2004) เซลล์ที่ถูกบ่มด้วย [1-14C] -labelled
กรดไขมันที่เป็นอธิบายไว้ข้างต้นและในตอนท้ายของการบ่มที่0.5 มิลลิลิตร subsample
ของกลางถูกนำตัวและการตั้งสำรอง ที่เหลือของกลางที่ถูกทิ้ง monolayer เซลล์ถูกล้างด้วยพีบีเอสและเซลล์ถูกเดี่ยวพร้อม0.05% (w / v) trypsin / 0.02% (w / v) EDTA ในพีบีเอส เซลล์ที่แยกถูกล้างใน HBSS มี 1% (w / v) FAF-BSA ก่อนที่จะถูกresuspended ใน HBSS คนเดียวและ homogenised ใช้ULTRATURRAX® (IKA®) กล homogeniser subsample (0.5 มิลลิลิตร) homogenate ถูกนำตัวและการตั้งสำรอง หนึ่งร้อย microlitres ของ6% (w / v) FAF-BSA ในน้ำเพิ่มขึ้น subsamples ของทั้งสองสื่อวัฒนธรรมและเซลล์homogenised ก่อนผลิตภัณฑ์กรดที่ไม่ละลายน้ำถูกเร่งโดยนอกเหนือจาก1.0 มิลลิลิตรเย็น 4 เอ็ม HClO4. กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงที่ 3,500 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีและ 0.5 มิลลิลิตรของสารละลายผสมกับ4 มิลลิลิตรของของเหลวประกายและกัมมันตภาพรังสี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.8 . บีตา - ออกซิเดชันของ [ 1-14c ] - กระดุม
ออกซิเดชัน [ 1-14c ] - กระดุมถูกกำหนดเป็นหลัก
ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ แต่ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ( tocher et al . ,
2004 ) เซลล์ที่ถูกบ่มด้วย [ 1-14c ] - กระดุมเป็น
อธิบายไว้ข้างต้นและที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลา 0.5 ml subsample
ในสื่อที่ถูกเมินเฉย ส่วนที่เหลือของตัวกลาง
ถูกทิ้ง , เซลล์อย่างถูกล้างด้วย pbs และเซลล์
เป็นเดี่ยวกับ 0.05% ( w / v ) ทริป / 0.02 % ( w / v ) EDTA ใน PBS
แยกเซลล์ก็ล้างใน hbss ที่มี 1% ( w / v )
faf-bsa ก่อนถูก resuspended ใน hbss คนเดียวและ homogenised ใช้ ultraturrax ®
( Ika ® ) กล homogeniser . เป็น subsample ( 0.5 ml )
อนถูกเมินเฉย หนึ่งร้อย microlitres ของ
6 % ( w / v ) faf-bsa ในน้ำเพิ่มให้ subsamples ทั้ง
สื่อวัฒนธรรมและ homogenised เซลล์ก่อนไม่ละลายในกรดผลิตภัณฑ์
ถูกตกตะกอนโดยนอกเหนือจาก 1.0 มิลลิลิตร hclo4 เย็นน้ำแข็ง 4 M .
จำนวนไฟฟ้าที่ 3500 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีและ 0.5 ml ของ
น่านคือ ผสมกับ 4 ml ของของเหลวเกิดประกายไฟและกัมมันตภาพรังสี