PRIMARY, SECONDARY, TERTIARY, AND Q

PRIMARY, SECONDARY, TERTIARY, AND QUATERNARY STRUCTURE.

Primary Sequence from Cloning The sequence of wild-type Aequorea GFP is given in Figure 1. Sequences ofatleastfourotherisoformsareknown(19),thoughnoneofthemutationsseem to be in positions known to influence protein behavior. Most cDNA constructs derivedfromtheoriginalsequencecontaintheinnocuousmutationQ80R,probably resulting from a PCR error (11). Also, the gene has been resynthesized withalteredcodonsandimprovedtranslationalinitiationsequences(seesection on “Promoters, Codon Usage, and Splicing”). The chromophore is a p-hydroxybenzylideneimidazolinone (10,20) formed from residues 65–67, which are Ser-Tyr-Gly in the native protein. Figure 2 shows the currently accepted mechanism (21–23) for chromophore formation. First, GFP folds into a nearly native conformation, then the imidazolinone is formed by nucleophilic attack of the amide of Gly67 on the carbonyl of residue 65, followed by dehydration. Finally, molecular oxygen dehydrogenates the α-β bond of residue 66 to put its aromatic group into conjugation with the imidazolinone. Only at this stage does the chromophore acquire visible absorbance and fluorescence. This mechanism is based on the following arguments: (a) Atmospheric oxygen is required for fluorescence to develop (21,24). (b) Fluorescence of anaerobically preformed GFP develops with a simple exponential time course after air is readmitted (21,25), which is essentially unaffected by the concentration of the GFP itself or of cellular cofactors. (c)Analogousimidazolinonesautoxidizespontaneously(26).(d)Theproposed

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โครงสร้างหลัก รอง ระดับมหาวิทยาลัย และ QUATERNARYPrimary Sequence from Cloning The sequence of wild-type Aequorea GFP is given in Figure 1. Sequences ofatleastfourotherisoformsareknown(19),thoughnoneofthemutationsseem to be in positions known to influence protein behavior. Most cDNA constructs derivedfromtheoriginalsequencecontaintheinnocuousmutationQ80R,probably resulting from a PCR error (11). Also, the gene has been resynthesized withalteredcodonsandimprovedtranslationalinitiationsequences(seesection on “Promoters, Codon Usage, and Splicing”). The chromophore is a p-hydroxybenzylideneimidazolinone (10,20) formed from residues 65–67, which are Ser-Tyr-Gly in the native protein. Figure 2 shows the currently accepted mechanism (21–23) for chromophore formation. First, GFP folds into a nearly native conformation, then the imidazolinone is formed by nucleophilic attack of the amide of Gly67 on the carbonyl of residue 65, followed by dehydration. Finally, molecular oxygen dehydrogenates the α-β bond of residue 66 to put its aromatic group into conjugation with the imidazolinone. Only at this stage does the chromophore acquire visible absorbance and fluorescence. This mechanism is based on the following arguments: (a) Atmospheric oxygen is required for fluorescence to develop (21,24). (b) Fluorescence of anaerobically preformed GFP develops with a simple exponential time course after air is readmitted (21,25), which is essentially unaffected by the concentration of the GFP itself or of cellular cofactors. (c)Analogousimidazolinonesautoxidizespontaneously(26).(d)Theproposed

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประถมมัธยมตติยและ Quaternary โครงสร้าง. ลำดับหลักจากโคลนลำดับของป่าประเภท Aequorea GFP จะได้รับในรูปที่ 1 ลำดับ ofatleastfourotherisoformsareknown (19), thoughnoneofthemutationsseem ที่จะอยู่ในตำแหน่งที่เป็นที่รู้จักกันในอิทธิพลพฤติกรรมโปรตีน ส่วนใหญ่สร้าง cDNA derivedfromtheoriginalsequencecontaintheinnocuousmutationQ80R อาจจะเป็นผลมาจากข้อผิดพลาด PCR (11) นอกจากนี้ยีนที่ได้รับการ resynthesized withalteredcodonsandimprovedtranslationalinitiationsequences (seesection ที่ "โปรโมเตอร์การใช้งาน Codon และ Splicing") chromophore เป็นพี hydroxybenzylideneimidazolinone (10,20) เกิดขึ้นจากสารตกค้างที่ 65-67 ซึ่งเป็น Ser-เทอร์-Gly ในโปรตีนพื้นเมือง รูปที่ 2 แสดงให้เห็นว่ากลไกที่ยอมรับในปัจจุบัน (21-23) สำหรับ chromophore ก่อ ครั้งแรก GFP พับเป็นโครงสร้างพื้นเมืองเกือบแล้ว imidazolinone จะเกิดขึ้นจากการโจมตี nucleophilic ของเอไมด์ของ Gly67 ในคาร์บอนิลของสารตกค้างที่ 65 ตามด้วยการคายน้ำ สุดท้ายโมเลกุลออกซิเจน dehydrogenates พันธบัตรαβ-66 ที่เหลือจะนำกลุ่มที่มีกลิ่นหอมของมันเข้าไปผันกับ imidazolinone เฉพาะในขั้นตอนนี้ไม่ได้รับการดูดกลืนแสง chromophore ที่มองเห็นและ uorescence ชั้น กลไกนี้จะขึ้นอยู่กับข้อโต้แย้งดังต่อไปนี้ (ก) บรรยากาศออกซิเจนเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับ uorescence ชั้นในการพัฒนา (21,24) (ข) การเรืองแสงของ preformed แบบไม่ใช้อากาศ GFP พัฒนากับเวลาที่แน่นอนชี้แจงง่ายหลังจากที่อากาศสิ่งสมควร (21,25) ซึ่งได้รับผลกระทบหลักโดยความเข้มข้นของ GFP ตัวเองหรือของปัจจัยโทรศัพท์มือถือ (ค) Analogousimidazolinonesautoxidizespontaneously (26). (ง) Theproposed

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประถมศึกษา มัธยมศึกษา อุดมศึกษา และโครงสร้าง quaternary

หลักลำดับจากการลำดับของ aequorea GFP จะได้รับในรูปที่ 1 ลำดับ ofatleastfourotherisoformsareknown ( 19 ) , thoughnoneofthemutationsseem อยู่ในตำแหน่งที่รู้จักกันในfl uence โปรตีนพฤติกรรม วิธีสร้าง derivedfromtheoriginalsequencecontaintheinnocuousmutationq80r ที่สุด ,อาจเป็นผลจาก PCR ข้อผิดพลาด ( 11 ) ทั้งนี้ จีนได้ resynthesized withalteredcodonsandimprovedtranslationalinitiationsequences ( seesection " โปรโมเตอร์ , การใช้งาน codon และ splicing " ) ส่วนที่มีสีเป็น p-hydroxybenzylideneimidazolinone ( , ) เกิดขึ้นจากสารตกค้าง 65 – 67 ซึ่งเป็นเซอร์ tyr GLY ในโปรตีนพื้นเมืองรูปที่ 2 แสดงการยอมรับกลไกในปัจจุบัน ( 21 – 23 ) สำหรับการพัฒนาที่มีสี แรก , GFP พับเป็นโครงสร้างดั้งเดิมเกือบแล้ว imidazolinone เกิดจากการโจมตี nucleophilic ของเอไมด์ของ gly67 กับคาร์บอนิลของกาก 65 , ตามด้วยการขาดน้ำ ในที่สุดโมเลกุลออกซิเจน dehydrogenates ที่แอลฟาบีตาพันธบัตรของกาก 66 ใส่หอมของมันเข้าไปในกลุ่ม ) กับ imidazolinone . แต่ในขั้นตอนนี้จะได้รับค่าflที่มีสีที่มองเห็นและ uorescence . กลไกนี้จะขึ้นอยู่กับเหตุผลดังต่อไปนี้ ( ก ) บรรยากาศมีออกซิเจนเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับfl uorescence พัฒนา ( 21,24 )( ข ) การเรืองแสงของ GFP พ preformed พัฒนากับหลักสูตรเวลาแบบเลขชี้กำลังง่ายหลังจากที่อากาศคือการผูกประโยค ( 21,25 ) ซึ่งเป็นหลักไม่ได้รับผลกระทบ โดยความเข้มข้นของ GFP เองหรือปัจจัยของเซลล์ ( C ) analogousimidazolinonesautoxidizespontaneously ( 26 ) ( D ) จริง