Tissue culture conditions for regen

Tissue culture conditions for regeneration of fertile plants from immature embryos were optimized using four local inbred lines of Zea mays.
Immature embryos were cultured on five different media. The highest regeneration efficiency of 86.40% was observed for BR-6 at N6 modified
media (supplemented with 1.0 mg L−1 2,4-D, 25 mM L-Proline, and 100 mg L−1 Casein Hydrolysate) while B-46, EX-285 and EX-295 gave a
regeneration percentage of 57%, 77%, and 63%, respectively. A total number of 1646 immature embryos were bombarded by a gene gun using
tungsten micro projectiles coated with a multi-gene plasmid pCMAC, containing gusA (reporter gene), hpt (hygromycin phosphotransferase), and
cry1Ac genes driven by maize ubiquitin promoter. Regenerates were selected on a medium containing 40 μg/L hygromycin and then screened
with GUS assay. Thirty-five transgenic lines were obtained with a transformation frequency of 2.21%. The integration and expression of cry1Ac
was confirmed with PCR, Southern Blot analysis, ELISA, and Western Blot analysis. The studies confirmed that cry1Ac gene has been stably
transformed into the local inbred line (BR-6) and caused 80–100% mortality to armyworm (Spodoptera frugiperda) in insect feeding bioassay.
© 2006 SAAB. Published by Elsevier B.V. All rights reserved.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สภาพเนื้อเยื่อสำหรับการฟื้นฟูของพืชอุดมสมบูรณ์จากโคลน immature ได้ปรับใช้สี่บรรทัด inbred เฉพาะของซี mays
Immature โคลนมีอ่างบนสื่อต่าง ๆ ได้ 5 86.40% ประสิทธิภาพฟื้นฟูสูงสุดถูกตรวจสอบสำหรับ BR-6 ที่ปรับเปลี่ยน N6
สื่อ (เสริม ด้วย 1.0 มิลลิกรัม L−1 2, 4-D, 25 มม. L Proline และ 100 มิลลิกรัม L−1 เคซีนด้วย) ในขณะที่ B-46 EX-285 และ EX 295 ให้เป็น
เปอร์เซ็นต์ฟื้นฟู 57%, 77% และ 63% ตามลำดับ จำนวน 1646 immature โคลนได้ระดมยิง โดยใช้ปืนยีนการ
ทังสเตนมาขนาดเล็กเคลือบ ด้วยเป็น plasmid หลายยีน pCMAC, gusA มี (โปรแกรมรายงานยีน), hpt (hygromycin phosphotransferase), และ
cry1Ac ยีนควบคุม โดยโปรโมเตอร์ ubiquitin ข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ สร้างใหม่ไว้กลางประกอบด้วย 40 μg/L hygromycin แล้ว ฉาย
กับ GUS วิเคราะห์ สามสิบห้าบรรทัดถั่วเหลืองได้รับกับการเปลี่ยนแปลงความถี่ของ 2.21% รวมกับค่าของ cry1Ac
ถูกยืนยัน ด้วย PCR ทำลายภาคใต้วิเคราะห์ ELISA และตะวันตกทำลายการวิเคราะห์ การศึกษายืนยันว่า ยีน cry1Ac ได้รับ stably
เปลี่ยนเฉพาะบรรทัด inbred (BR-6) และเกิดการตาย 80-100% กับ armyworm (Spodoptera frugiperda) ในแมลงอาหาร bioassay
© 2006 ซาบ เผยแพร่ โดย Elsevier b.v สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เงื่อนไขในการเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อสำหรับการฟื้นฟูความอุดมสมบูรณ์ของพืชจากตัวอ่อนที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะถูกปรับใช้สี่สายพันธุ์แท้ของท้องถิ่น Zea mays
ตัวอ่อนอ่อนถูกนำมาเลี้ยงในห้าสื่อที่แตกต่างกัน ที่มีประสิทธิภาพสูงสุดของการฟื้นฟู 86.40% เป็นที่สังเกตสำหรับ BR-6 ที่ N6 ดัดแปลง
สื่อ (เสริมด้วย 1.0 mg L-1 2,4-D, 25 มิลลิ L-Proline, และ 100 mg L-1 เคซีนไฮโดรไล) ในขณะที่ B-46 , EX-285 และ EX-295 ทำให้
เปอร์เซ็นต์การงอก 57%, 77% และ 63% ตามลำดับ จำนวน 1,646 ตัวอ่อนที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะถูกจู่โจมโดยปืนยีนโดยใช้
ขีปนาวุธไมโครทังสเตนเคลือบด้วยพลาสมิดหลายยีน pCMAC มี gusA (นักข่าวยีน) hpt (ไฮโกรไม phosphotransferase) และ
ยีน cry1Ac ขับเคลื่อนด้วยข้าวโพด ubiquitin ก่อการ ฟื้นพลังได้รับการคัดเลือกในการขนาดกลางที่มี 40 g / L ไฮโกรไมแล้วฉาย
ด้วย GUS ทดสอบ สามสิบห้าสายพันธุ์ที่ได้รับกับการเปลี่ยนแปลงความถี่ของ 2.21% บูรณาการและการแสดงออกของ cry1Ac
ได้รับการยืนยันด้วยวิธี PCR วิเคราะห์ใต้เปื้อน, ELISA และการวิเคราะห์ดวงตะวัน การศึกษาได้รับการยืนยันว่ายีน cry1Ac ได้รับเสถียร
กลายเป็นสายพันธุ์แท้ท้องถิ่น (BR-6) และก่อให้เกิดการตาย 80-100% ถึงหอม (Spodoptera frugiperda) ในการให้อาหารทางชีวภาพของแมลง
© 2006 SAAB จัดทำโดย Elsevier BV สงวนลิขสิทธิ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อพืชที่อุดมสมบูรณ์สำหรับการฟื้นฟูสภาพจากเอ็มบริโออ่อนเหมาะสมใช้สี่สายท้องถิ่นสายพันธุ์แท้ข้าวโพด .
เอ็มบริโออ่อนมาเลี้ยงบนอาหารแข็งสูตร 5 สื่อที่แตกต่างกัน ฟื้นฟูประสิทธิภาพสูงสุดของ 86.40 % เป็นสังเกตสำหรับ br-6 ที่ n6
สื่อแก้ไข ( ระดับ 1.0 mg L − 1 2 25 มม. โพรและ 100 มิลลิกรัมต่อลิตร casein hydrolysate b-46 − 1 ) ในขณะที่ ,และให้ ex-285 ex-295
ฟื้นฟูจำนวน 57 , 77 % และ 63 ตามลำดับ จำนวน 1646 เอ็มบริโออ่อนถูกระดมยิงด้วยปืนยีนโดยใช้
ทังสเตนไมโครเคลือบขีปนาวุธกับหลายยีนที่พลาสมิดที่มียีน pcmac gusa , นักข่าว , HPT ( ยีนต้านยา hygromycin phosphotransferase ) และ
cry1ac ยีนข้าวโพดข้างนอกเคลื่อน โดยโปรโมเตอร์สร้างใหม่ถูกเลือกบนอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี 40 μกรัม / ลิตรและคัดกรองยีนต้านยา hygromycin
กับกัส ตามลำดับ สามสิบห้าต้นสายได้ด้วยการเปลี่ยนแปลงความถี่ของ 2.21 % การบูรณาการและการแสดงออกของ cry1ac
ถูกยืนยันด้วย PCR , Southern blot analysis ) และการวิเคราะห์ Western blot . การศึกษายีนที่ได้รับการยืนยัน cry1ac
อย่างถาวรเปลี่ยนเป็นสายสายพันธุ์ท้องถิ่น ( br-6 ) จาก 80 – 100 % ตายหนอนกระทู้หอม ( Spodoptera frugiperda ) ในแมลงอาหารไม่
© 2006 Saab . ที่ตีพิมพ์โดยเอลส์เท่าสงวนลิขสิทธิ์