MATERIALS AND METHODS Culture regime and acclimation to experimental conditions Daphnia magna(clone F[211 was maintained as described in Barata and Baird 122). The D. magna used for all experi ments were 4- to 5-d-old fourth instars. This life stage was chosen because it permitted the bioassay to be completed with in a single molt eycle. This was important because the molting process can interfere with feeding, thus introducing error(R.A. McWilliams, personal observation). To minimize maternal ef fects, only animals from the third to sixth broods were used in experiments[22]. Cultures were maintained and experi- ments were conducted in a constant-temperature room(14:10 light dark, 20 t I' C standard error[SE). In addition, all feeding experiments were performed in the dark because thi has been found to produce uniform feeding rates[23] All animals were acclimated in the same 6-L tank to min imize environmental variation. The volume of American so- ciety for Testing and Materials(ASTM hand water(24) that was used was determined by the number of animals to be acclimated: 200 500, 5.5 L, and fewer, 3 L; 200 to 400, 5 L; and 400 to was added Seaweed extract(Glenside Organics, Throsk, UK) and food to the culture medium at a concentration of 6 ml/ 12, (Chlorella vulgaris, Beijerink, strain CCAP C211i Institute of Freshwater Ecology, Cumbria, UK) was added daily at a concentration of 5 x 10' cells/ml. Animals were maintained under these conditions until 4 d old.
วัสดุและวิธีการของระบอบการปกครองวัฒนธรรมและการปรับตัวให้เข้ากับสภาพการทดลอง Daphnia magna (โคลน F [211 ถูกเก็บรักษาไว้ตามที่อธิบายใน Barata และบาร์ด 122) มหา D. ใช้สำหรับ ments ประสบทุกคน 4- วัยสี่ 5-D-เก่า ขั้นตอนที่ชีวิตนี้ได้รับเลือกเพราะมันได้รับอนุญาตทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพที่จะเสร็จใน eycle ลอกคราบเดียว นี่เป็นสิ่งสำคัญเพราะกระบวนการลอกคราบสามารถยุ่งเกี่ยวกับการให้อาหารจึงแนะนำข้อผิดพลาด (RA McWilliams สังเกตบุคคล) เพื่อลด fects EF มารดาเพียงสัตว์จากสามถึงหกกกถูกนำมาใช้ในการทดลอง [22] วัฒนธรรมที่ได้รับการดูแลและ ments ประสบการณ์ได้ดำเนินการในห้องคงอุณหภูมิ (14:10 เข้มแสง 20 T ฉัน 'C ข้อผิดพลาดมาตรฐาน [SE) นอกจากนี้ยังมีการทดลองให้อาหารทั้งหมดได้ดำเนินการในที่มืดเพราะรัชกาลที่ได้รับพบว่าอัตราการป้อนผลิตเครื่องแบบ [23] สัตว์ทั้งหมดถูกปรับในถัง 6-L เดียวกันกับการเปลี่ยนแปลงด้านสิ่งแวดล้อมนาที imize ปริมาณของ ciety ทีเราอเมริกันสำหรับการทดสอบและวัสดุ (ASTM น้ำมือ (24) ที่ถูกใช้ถูกกำหนดโดยจำนวนของสัตว์ที่จะปรับตัว: 200 500, 5.5 ลิตรและน้อยกว่า 3 l; 200-400, 5 ลิตร และ 400 ถูกเพิ่มสารสกัดจากสาหร่ายทะเล (Glenside Organics, Throsk สหราชอาณาจักร) และอาหารกลางวัฒนธรรมที่ความเข้มข้น 6 มล. / 12 (Chlorella vulgaris, Beijerink ความเครียด CCAP C211i สถาบันน้ำจืดนิเวศวิทยา, Cumbria, สหราชอาณาจักร) เป็น เพิ่มทุกวันที่ความเข้มข้น 5 x 10 'เซลล์ / มล. สัตว์ที่ถูกเก็บรักษาไว้ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้จนถึงวันที่ 4 d เก่า
การแปล กรุณารอสักครู่..
