to the methods of Sauter and Kende

to the methods of Sauter and Kende (1992) by
taking 500 mg of fresh plant tissue was
homogenized in 5 ml of cold 25 mM borate-HCl
buffer (pH 8.8) containing 5 mM marcaptoethanol
and 1 % Polyvinylpyrrolidone and centrifuged at
12000 rpm for 20 min. The reaction mixture for
assaying PAL contained 0.5 ml 100 mM potassium
borate buffer (pH 8.8), 0.2 ml enzyme extract, 1.3
ml water and 1 ml L- phenylalanine (50 mM) and
kept for 1 h for incubation at room temperature.
The reaction was stopped by adding 10 % TCA and
the absorbance was recorded at 290 nm. The
activity was expressed μ mol trans–cinnamic acid
formed h-1 mg-1 protein using cinnamic acid as
standard.
The reaction mixture for the assay of CAD
contained 1.8 ml tris-HCl (400 mM) buffer (pH 9.2),
0.5 ml coniferyl alcohol (15 mM), 0.5 ml NADP+
(0.28 mM) and 0.2 ml enzyme extract. The
absorbance at 400 nm was monitored for 3min. The
activity was expressed in change

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิธี Sauter และ Kende (1992) โดยการมี 500 มิลลิกรัมของเนื้อเยื่อพืชสดได้homogenized เป็นกลุ่มใน 5 ml ของเย็น 25 มม. borate HClmarcaptoethanol 5 มม.มีบัฟเฟอร์ (pH 8.8)และ 1% Polyvinylpyrrolidone และ centrifuged ที่rpm 12000 สำหรับ 20 นาที ส่วนผสมของปฏิกิริยาassaying PAL ประกอบด้วยโพแทสเซียม 0.5 ml 100 มม.borate บัฟเฟอร์ (pH 8.8), สารสกัดจากเอนไซม์ 0.2 ml, 1.3น้ำมลและ 1 ml L phenylalanine (50 mM) และเก็บสำหรับ h 1 สำหรับบ่มที่อุณหภูมิห้องหยุดปฏิกิริยา ด้วยการเพิ่ม 10% TCA และบันทึกที่ absorbance ที่ 290 nm ที่กิจกรรมที่แสดงμโมลกรดทรานส์ – cinnamicรูปแบบ h-1 1 มิลลิกรัมโปรตีนโดยใช้กรดทรานส์-ซินนามิกเป็นมาตรฐานส่วนผสมปฏิกิริยาการทดสอบของ CAD1.8 ml มีทริสเรทติ้ง HCl (400 มิลลิเมตร) บัฟเฟอร์ (pH 9.2),0.5 ml coniferyl แอลกอฮอล์ (15 มม.), 0.5 ml NADP +(0.28 มิลลิเมตร) และสารสกัดจากเอนไซม์ 0.2 ml ที่absorbance ที่ 400 nm ถูกตรวจสอบใน 3 นาทีกิจกรรมได้แสดงออกในการเปลี่ยนแปลง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีการของ Sauter และ Kende นี้ (1992)
โดยการ500 mg
ของเนื้อเยื่อพืชสดปั่นใน5 มิลลิลิตรเย็น 25 มิลลิ borate-HCl
บัฟเฟอร์ (pH 8.8) ที่มี marcaptoethanol 5
มิลลิและPolyvinylpyrrolidone 1% และหมุนเหวี่ยงที่
12,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาที ผสมปฏิกิริยาสำหรับ
PAL assaying มี 0.5 มล. 100
มิลลิโพแทสเซียมบัฟเฟอร์borate (pH 8.8) 0.2 สารสกัดจากเอนไซม์มล. 1.3
มล. น้ำ 1 มิลลิลิตร L- phenylalanine (50 มิลลิเมตร)
และเก็บไว้เป็นเวลา1 ชั่วโมงสำหรับการบ่มที่อุณหภูมิห้อง.
ปฏิกิริยา หยุดการเพิ่ม TCA 10%
และการดูดกลืนแสงที่ถูกบันทึกไว้ที่290 นาโนเมตร
กิจกรรมได้แสดงออกไมครอน mol
กรดทรานส์ซินนามิกเกิดขึ้นH-1 มิลลิกรัม-1
โปรตีนโดยใช้กรดซินนามิกเป็นมาตรฐาน.
ผสมปฏิกิริยาสำหรับการทดสอบของ CAD
ที่มีอยู่ 1.8 มล. tris-HCl (400 มิลลิเมตร) บัฟเฟอร์ (pH 9.2)
0.5 มล. coniferyl เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ (15 มิลลิเมตร) 0.5 มล. NADP +
(0.28 มิลลิเมตร) และสารสกัดจากเอนไซม์ 0.2 มล.
การดูดกลืนแสงที่ 400 นาโนเมตรได้รับการตรวจสอบ 3 นาที
กิจกรรมได้แสดงออกในการเปลี่ยนแปลง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการของซอเตอร์ และ kende ( 1992 ) โดย
ถ่าย 500 มก. ของเนื้อเยื่อพืชสดถูกบดใน 5 ml
เย็น 25 มม. บอเรต HCl
บัฟเฟอร์ pH 8.8 ) ประกอบด้วย 5 มม. marcaptoethanol
1 % พอลิวินิลไพร์โรลิโดนไฟฟ้าที่
12 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีผสมปฏิกิริยาสำหรับ
assaying เพื่อนที่มีอยู่ 100 อืมโพแทสเซียม
บอเรตบัฟเฟอร์ 0.5 มล. ( พีเอช 8.8 ) 0.2 มิลลิลิตรเอนไซม์สกัด , 1.3
น้ำขนาด 1 มิลลิลิตร L - phenylalanine ( 50 มม. ) และ
เก็บไว้เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพื่อบ่มที่อุณหภูมิห้อง .
ปฏิกิริยาที่ถูกหยุดโดยการเพิ่ม 10 % TCA และ
นเท่ากับ 290 nm .
กิจกรรมแสดงออกμ mol Trans –กรดซินนามิก
ตั้งขึ้น mg-1 ส่วนโปรตีนโดยใช้กรดซินนามิก

เป็นมาตรฐาน สำหรับใช้ผสมปฏิกิริยาของ CAD ที่มีอยู่ 1.8 มล. โดย HCL
( 400 มม. ) บัฟเฟอร์ pH 9.2 )
0โคนิเฟอริลแอลกอฮอล์ 5 ml ( 15 มม. ) , 0.5 มล. nadp
( 0.28 มม. ) และ 0.2 มิลลิลิตรเอนไซม์สกัดเข้มข้น
การดูดกลืนแสงที่ 400 nm ถูกตรวจสอบสำหรับ 3min
กิจกรรมได้แสดงออกในการเปลี่ยนแปลง