Establishment of Croton stellatopil

Establishment of Croton stellatopilosus Suspension Culture for
Geranylgeraniol Production and Diterpenoid Biosynthesis
Juraithip Wungsintaweekula,*, Chutima Sriyapaia
, Sanlaya Kaewkerda
,
Supinya Tewtrakula
, Damrong Kongduangb
, and Wanchai De-Eknamkulb
a Department of Pharmacognosy and Pharmaceutical Botany, Faculty of Pharmaceutical
Sciences, Prince of Songkla University, Hat Yai, Songkhla 90112, Thailand.
Fax: [phone]. E-mail: [e-mail] b Department of Pharmacognosy, Faculty of Pharmaceutical Sciences, Chulalongkorn
University, Bangkok 10330, Thailand
* Author for correspondence and reprint requests
Z. Naturforsch. 62 c, 389Ð396 (2007); received December 18, 2006/January 19, 2007
Diterpenoids in higher plants are biosynthesized from isoprene units obtained from two
distinct pathways: the mevalonate pathway and the deoxyxylulose phosphate pathway. The
metabolic partitioning of both pathways in plant species is dependent upon the type of culture.
In order to study the diterpenoid biosynthesis in Croton stellatopilosus cell culture,
callus culture was firstly induced from C. stellatopilosus young leaves in Murashige and Skoog
(MS) medium in the presence of 1.0 mg/l 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D), 1.0 mg/l
benzyladenine (BA), 3% (w/v) sucrose and 0.8% (w/v) agar. The suspension culture was
further induced from its callus in the same medium without gelling agent. Detection of diterpenoid
accumulation by gas chromatography-mass spectrometry revealed that a cell culture
could accumulate a low amount of geranylgeraniol (GGOH) and a high content of fatty acids
and phytosterols. To improve the GGOH production, the culture conditions were optimized
by medium manipulation in terms of hormonal factors. The growth rates of cell cultures were
similar in all kinds of media. The GGOH production curve indicated that GGOH plays an
important role as a primary metabolite in the cell culture. The optimum medium for GGOH
production was MS medium supplemented with 2.0 mg/l 2,4-D and 2 mg/l BA that could
produce GGOH with a yield of 1.14 mg/g FW.
Key words: Croton stellatopilosus, Geranylgeraniol, Suspension Culture

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Stellatopilosus ก่อตั้ง Croton ระงับวัฒนธรรมสำหรับGeranylgeraniol ผลิตและสังเคราะห์ DiterpenoidJuraithip Wungsintaweekula, *, ชุติมา Sriyapaia, Sanlaya Kaewkerda,Supinya Tewtrakulaดำรง Kongduangbและวันเดอ Eknamkulbภาควิชาเภสัชเวทและยาสมุนไพร คณะเภสัชกรรมศาสตร์ มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ หาดใหญ่ สงขลา 90112 ไทยโทรสาร: + 66 74 82 42 20 อีเมล์: [e-mail] b ภาควิชาเภสัชเวท คณะของเภสัชศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย กรุงเทพ 10330 ประเทศไทย* ผู้เขียนจดหมายโต้ตอบและพิมพ์คำขอZ. Naturforsch c 62, 389Ð396 (2007); รับ 18 ธันวาคม 2006/19 มกราคม 2007Diterpenoids ในพืชสูงจะ biosynthesized จากหน่วย isoprene ที่ได้รับจากสองทางเดินที่แตกต่าง: ทางเดินของ mevalonate และทางเดินฟอสเฟต deoxyxylulose ที่เผาผลาญการพาร์ทิชันของทั้งสองหลักในพืชชนิดนั้นขึ้นกับชนิดของวัฒนธรรมเพื่อศึกษาการสังเคราะห์ diterpenoid ใน Croton stellatopilosus เซลล์วัฒนธรรมวัฒนธรรมให้มีประการแรกเกิดจาก C. stellatopilosus ใบไม้หนุ่ม Murashige และ Skoogปานกลาง (MS) ในต่อหน้าของกรด 1.0 mg/l 2, 4-dichlorophenoxyacetic (2, 4-D), 1.0 mg/lbenzyladenine (BA), ซูโครส 3% (w/v) และ agar 0.8% (w/v) วัฒนธรรมการระงับได้เพิ่มเติม เกิดเป็นแคลลัสในเดียวกันโดย gelling agent ตรวจสอบ diterpenoidรวบรวม โดย spectrometry chromatography ก๊าซมวลเปิดเผยที่วัฒนธรรมเซลล์สามารถสะสมยอดเงินต่ำสุดของ geranylgeraniol (GGOH) และเนื้อหาที่สูงของกรดไขมันและ phytosterols เพื่อปรับปรุงการผลิต GGOH เงื่อนไขวัฒนธรรมถูกปรับให้เหมาะสมโดยการจัดการปานกลางในฮอร์โมนปัจจัย มีอัตราการขยายตัวของวัฒนธรรมเซลล์คล้ายคลึงกันในทุกสื่อ ระบุโค้งผลิต GGOH GGOH เล่นการบทบาทที่สำคัญเป็น metabolite หลักในเซลล์ สื่อที่เหมาะสมสำหรับ GGOHผลิตได้กลาง MS เสริม ด้วย 2, 4-D 2.0 mg/l และ 2 mg/l บาที่สามารถผลิต GGOH กับผลตอบแทนของ 1.14 mg/g FWคำสำคัญ: Croton stellatopilosus, Geranylgeraniol วัฒนธรรมการระงับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จัดตั้งสลอด stellatopilosus วัฒนธรรมสะเทือนสำหรับ
Geranylgeraniol การผลิตและการ diterpenoid สังเคราะห์
Juraithip Wungsintaweekula *, ชุติมา
Sriyapaia, Sanlaya
Kaewkerda,
สุภิญญา
Tewtrakula, ดำรง Kongduangb
และวันชัย De-Eknamkulb
กรมเภสัชเวทและเภสัชพฤกษศาสตร์,
คณะเภสัชศาสตร์วิทยาศาสตร์มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์. มหาวิทยาลัยหาดใหญ่จังหวัดสงขลา 90112 ประเทศไทยโทรสาร: 66 74 42 82 20 E-mail: [e-mail] ขกรมเภสัชเวทคณะเภสัชศาสตร์จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัยกรุงเทพฯ10330 * สำหรับผู้เขียนและพิมพ์จดหมายร้องขอซี Naturforsch 62 C, 389Ð396 (2007); ได้รับ 18 ธันวาคม 2006/19 มกราคม 2007 Diterpenoids ในพืชที่สูงขึ้นจะ biosynthesized จากหน่วยงาน isoprene ที่ได้รับจากสองทางเดินที่แตกต่างกันทางเดินmevalonate และทางเดินฟอสเฟต deoxyxylulose แบ่งการเผาผลาญอาหารของทางเดินทั้งในพันธุ์พืชที่ขึ้นอยู่กับประเภทของวัฒนธรรม. เพื่อที่จะศึกษาการสังเคราะห์ diterpenoid ในสลอด stellatopilosus เพาะเลี้ยงเซลล์เพาะเลี้ยงแคลลัสถูกชักนำแรกจากซีใบอ่อนstellatopilosus ในอาหารสูตร Murashige และ Skoog (MS) ขนาดกลางใน การปรากฏตัวของ 1.0 mg / l กรด 2,4-dichlorophenoxyacetic (2,4-D) 1.0 mg / l benzyladenine (BA), 3% (w / v) และซูโครส 0.8% (w / v) วุ้น วัฒนธรรมที่ถูกระงับการชักนำให้เกิดแคลลัสต่อไปจากในสื่อเดียวกันโดยไม่ต้องสารก่อเจล การตรวจหา diterpenoid สะสมโดยมวลสาร-แก๊ส chromatography เปิดเผยว่าวัฒนธรรมเซลล์สามารถสะสมเป็นจำนวนเงินที่ต่ำของgeranylgeraniol (GGOH) และเนื้อหาที่สูงของกรดไขมันและphytosterols เพื่อปรับปรุงการผลิต GGOH ที่เงื่อนไขวัฒนธรรมได้รับการปรับให้เหมาะสมโดยการจัดการกลางในแง่ของปัจจัยฮอร์โมน อัตราการเจริญเติบโตของเซลล์วัฒนธรรมมีความคล้ายคลึงกันในทุกชนิดของสื่อ เส้นโค้งการผลิต GGOH ชี้ให้เห็นว่า GGOH เล่นบทบาทสำคัญเป็นสารหลักในการเพาะเลี้ยงเซลล์ สื่อที่เหมาะสมสำหรับการ GGOH ผลิตสูตร MS เสริมด้วย 2.0 mg / l 2,4-D และ 2 มิลลิกรัม / ลิตร BA ที่สามารถผลิตGGOH กับผลผลิตของ 1.14 mg / g FW. คำสำคัญ: สลอด stellatopilosus, Geranylgeraniol วัฒนธรรมการระงับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ก่อตั้งสลอด stellatopilosus ระงับวัฒนธรรมการผลิตและการพัฒนา

geranylgeraniol อยด์ juraithip wungsintaweekula , * , ชุติมา sriyapaia


sanlaya kaewkerda , สุภิญญา tewtrakula

kongduangb ดำรงค์ และวันชัย เดอ eknamkulb
ภาควิชาเภสัชเวทและเภสัชพฤกษศาสตร์ คณะเภสัชศาสตร์
มหาวิทยาลัยสงขลานครินทร์ หาดใหญ่สงขลา 90112 ประเทศไทย .
แฟกซ์ : 66 74 42 82 20 อีเมล : [e-mail] b ภาควิชาเภสัชเวท คณะเภสัชศาสตร์ จุฬาลงกรณ์มหาวิทยาลัย ,
, กรุงเทพมหานคร 10330
* ผู้เขียนจดหมาย และพิมพ์คำขอ
Z naturforsch . 62 C 389 Ð 396 ( 2007 ) ; ได้รับ 18 ธันวาคม 2549 /
เมื่อวันที่ 19 มกราคม 2550diterpenoids ในพืชสูง biosynthesized จากหน่วยไอโซพรีนได้มาจาก 2
แตกต่างกันทางเดิน : มีวาโลเนตทางเดินและ deoxyxylulose ฟอสเฟตเส้นทาง
สลายการทั้งเส้นทางในพืชชนิดขึ้นอยู่กับชนิดของวัฒนธรรม
เพื่อศึกษากระบวนการในการเพาะเลี้ยงเซลล์ stellatopilosus อยด์สลอด , การเลี้ยงแคลลัสจากเดิมที
จาก Cstellatopilosus ใบอ่อนในอาหารสูตร Murashige and Skoog ( MS )
) ในการแสดงตนของ 1.0 mg / L ครู ( 2 ) , 1.0 mg / l
benzyladenine ( BA ) 3% ( w / v ) ซูโครสและ 0.8 % ( w / v ) วุ้น การระงับวัฒน
เพิ่มเติมชักนำจากแคลลัสในตัวกลางเดียวกันโดยไม่ gelling ตัวแทน การตรวจหาอยด์
การสะสมก๊าซสัปดาห์วิธีพบว่าเซลล์เพาะเลี้ยงสามารถสะสมยอดเงินต่ำ
geranylgeraniol ( ggoh ) และเนื้อหาสูงของ
กรดไขมันและ Phytosterols . เพื่อปรับปรุง ggoh การผลิต เงื่อนไขวัฒนธรรมเหมาะสม
โดยการจัดการสื่อในแง่ของปัจจัยด้านฮอร์โมน อัตราการเติบโตของเซลล์วัฒนธรรมถูก
ที่คล้ายกันในทุกชนิดของสื่อที่โค้ง ggoh การผลิตพบว่า ggoh เล่นเป็นบทบาทสำคัญในฐานะที่เป็นอาหารหลักในเซลล์เพาะเลี้ยง อาหารที่เหมาะสมสำหรับการผลิต ggoh
คืออาหารสูตร MS ที่เติม 2 , 4-D 2.0 มิลลิกรัมต่อลิตร BA 2 มิลลิกรัม / ลิตร ที่สามารถผลิต ggoh
กับผลผลิตของ 1.14 mg / g FW .
คำสำคัญ : สลอด stellatopilosus geranylgeraniol , วัฒนธรรม , ระงับ