Clostridium botulinum is a diverse group of anaerobic spore-forming organisms that produce lethal botulinum neurotoxins (BoNT) during their growth. BoNTs cause a paralytic condition, botulism, to man and animals. The most common forms of human botulism include the classical foodborne botulism due to ingestion of BoNT preformed in food, and infant botulism due to spore germination, growth, and toxin production in the infant’s intestine. Botulism is diagnosed by detecting BoNT and/or C. botulinum in the patient and in suspected food samples. There are several drawbacks related to the diagnostics of botulism; the standard bioassay for toxin detection employs the use of laboratory animals, making it laborious and expensive and possessing ethical concern. Selective media for culturing the organism are not available. Neurotoxin gene-specific PCR has facilitated the detection of C. botulinum. In this chapter a multiplex PCR for simultaneous detection of C. botulinum types A, B, E, and F in foods and feces is described. The method involves sample dilution and homogenization, and two-step enrichment followed by cell wash, cell lysis, and multiplex PCR. Quantification is obtained by the most-probable-number technique. Depending on the type of sample material, the detection limit of the assay varies from 10−2 to 103 spores per gram of sample material.
สีลบคือกลุ่มที่มีความหลากหลายของสิ่งมีชีวิตที่สร้างสปอร์แบบผลิตพิษโบทูลินัมที่ ( Bont ) ในระหว่างการเจริญเติบโตของพวกเขา bonts ทำให้เกิดอาการอัมพาต , โรคโบทูลิซึม กับมนุษย์และสัตว์ รูปแบบที่พบบ่อยที่สุดของโรคอาหารเป็นพิษ botulism มนุษย์รวมถึงคลาสสิกเนื่องจากการบริโภคของ Bont preformed ในอาหาร และทารก botulism เนื่องจากการเจริญเติบโต งอก , สปอร์ ,และการผลิตสารพิษในลำไส้ของทารก . อาหารเป็นพิษเป็นนิจ โดยการตรวจจับ Bont และ / หรือ C เนื้อในผู้ป่วยและในตัวอย่างอาหารที่สงสัย มีประการต่าง ๆ ที่เกี่ยวข้องกับการวินิจฉัยของโรคอาหารเป็นพิษ ; ทดสอบมาตรฐานสำหรับการตรวจหาสารพิษ มีการใช้สัตว์ทดลอง ทำให้ลำบากและมีราคาแพง และมีจริยธรรมที่เกี่ยวข้องสื่อที่เลือกสำหรับการเพาะเลี้ยงสิ่งมีชีวิตจะไม่สามารถใช้ได้ โดยเฉพาะระบบประสาทมีความสะดวกในการตรวจหายีน C . รส . ในบทนี้เป็นเทคนิค multoplex PCR ในการตรวจหาซีโบทูลินั่มชนิด A , B , E และ F ในการอาหาร และอุจจาระจะอธิบาย วิธีนี้เกี่ยวข้องกับการเจือจางตัวอย่าง และการเสริม 2 ตามด้วยการสลายเซลล์เซลล์ล้าง ,กับ multiplex PCR ปริมาณที่ได้รับ โดยเทคนิคหมายเลขที่น่าจะเป็นมากที่สุด ขึ้นอยู่กับชนิดของวัสดุตัวอย่าง , ขีดจำกัดของการทดสอบที่แตกต่างกันจาก 10 − 2 103 สปอร์ต่อกรัมของวัสดุตัวอย่าง
การแปล กรุณารอสักครู่..
