protection. A percentage of plants ranging from 25 to
33%, depending on the transgenic line, did not develop
symptoms in any of the three flushes and did
not contain virus as determined by DAS-ELISA,
whereas all the control plants became infected and
were symptomatic by the second flush after inoculation
(Figures 3 and 4, Table 1). These transgenic
plants were considered resistant to CTV infection and
the rest of the transgenic plants from the same lines
showed symptom attenuation (Figures 3 and 4) and
lower virus accumulation compared to control plants
(Table 1). None of these plants showed vein corking
in old leaves, a symptom shown by many control
plants as well as plants from the susceptible transgenic
lines (results not shown). Significant differences
were also observed in virus accumulation and symptom
intensity between transgenic lines showing a susceptible
phenotype and those showing protection
(Figure 4, Table 1). This protection was more evident
in the two first flushes post-inoculation, but was
markedly reduced by the third flush (Figure 4, Table
1).
To confirm these results, transgenic lines SCP.10,
SCP.11, SCP.13, SCP.15, SCP.16 and MCP.24, were
subjected to a new challenge experiment. Furthermore,
the two SCP.15 plants that escaped virus infection
in the previous challenge were also included in
this experiment as independent lines, referred to as
SCP.15-5 and SCP.15-7. Eight to ten graft-propagated
plants from each transgenic line and the same number
of control plants were graft-inoculated with T-305
and virus resistance evaluated as before. Results with
lines SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15, SCP.16 and
MCP.24 were similar to those obtained previously
(not shown), indicating that the protection pattern
against CTV exhibited by these transgenic lines was
consistent. Regarding plants propagated from
SCP.15-5 and SCP.15-7, 33% (2 out of 9) of the
SCP.15-5 plants and 20% (2 out of 10) of the
SCP.15-7 plants were resistant to CTV, a protection
pattern similar to that observed in the original SCP.15
line (25%; or 2 out of 8 plants resistant to CTV).
Protection of transgenic lime plants against CTV
aphid-inoculation
Selected transgenic lines included in the last graft-inoculation
experiment were challenged with CTV
T-300 by aphid inoculation, the natural via of CTV
dispersal under field conditions. Ten graft-propagated
plants from lines SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15,
SCP.16, MCP.24 and the corresponding non-transgenic
controls were inoculated by aphid feeding and
evaluated for resistance. Virus transmission was efficient
since all non-transgenic controls became infected
and CTV was serologically detected in the first
flush post-inoculation (Figure 4c). As observed in
graft-inoculation tests, a significant ratio, ranging
from 10 to 30%, of the transgenic plants from the six
lines escaped virus infection (Figure 4; results not
shown). In the rest of the transgenic plants, symptom
development and virus accumulation were delayed,
การป้องกัน เปอร์เซ็นต์ของพืชตั้งแต่ 25 ถึงไม่ได้พัฒนา 33% ตามบรรทัดถั่วเหลืองอาการในสาม flushes และได้ไม่ประกอบด้วยไวรัสดัส-ELISAในขณะที่พืชควบคุมทั้งหมดกลายเป็นติดเชื้อ และมีอาการ โดยการลบรายการบัญชีที่สองหลังจาก inoculation(ตัวเลข 3 และ 4 ตาราง 1) ถั่วเหลืองเหล่านี้พืชถือว่าทนทานต่อการติดเชื้อของ CTV และส่วนเหลือของพืชถั่วเหลืองจากบรรทัดเดียวพบอาการอ่อน (ตัวเลข 3 และ 4) และรวบรวมไวรัสต่ำกว่าเมื่อเทียบกับพืชควบคุม(ตาราง 1) ไม่มีของเหล่านี้พืชแสดงหลอดเลือดดำ corkingในใบเก่า อาการที่แสดงในตัวควบคุมพืชเป็นพืชจากการไวต่อถั่วเหลืองรายการ (ไม่แสดงผล) ความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญสุภัคยังสะสมไวรัสและอาการความเข้มระหว่างถั่วเหลืองเส้นแสดงความไวต่อphenotype และผู้แสดงการป้องกัน(รูปที่ 4 ตารางที่ 1) การป้องกันนี้ได้ชัดมากขึ้นในที่สองแรกล้างหลัง inoculation แต่ถูกลดลงอย่างเด่นชัด โดยล้างสาม (รูปที่ 4 ตาราง1)เมื่อต้องการยืนยันผลลัพธ์เหล่านี้ SCP.10 ถั่วเหลืองบรรทัดSCP.11, SCP.13, SCP.15, SCP.16 และ MCP.24ต้องการทดสอบความท้าทายใหม่ นอกจากนี้พืช SCP.15 สองที่หนีการติดไวรัสในความท้าทายที่ก่อนหน้านี้ยังรวมอยู่ในการทดลองนี้เป็นอิสระบรรทัด เรียกว่าSCP.15-5 และ SCP.15-7 แปดสิบไปรับสินบนเผยแพร่พืชจากแต่ละบรรทัดถั่วเหลืองและหมายเลขเดียวกันควบคุมพืชมี inoculated รับสินบนกับ T-305และประเมินความต้านทานไวรัสเป็นมาก่อน ผลรายการ SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15, SCP.16 และMCP.24 คล้ายกับได้รับก่อนหน้านี้(ไม่แสดง), ซึ่งบ่งชี้ว่า รูปแบบการป้องกันกับ CTV ที่จัดแสดง โดยเส้นเหล่านี้ถั่วเหลืองมีสอดคล้องกัน พืชที่เกี่ยวข้องเผยแพร่จากSCP.15-5 และ SCP.15-7, 33% (2 จาก 9) ของการSCP.15-5 พืชและ 20% (2 จาก 10) ของการSCP.15-7 พืชทนต่อ CTV การป้องกันรูปแบบคล้ายกับที่พบใน SCP.15 เดิมบรรทัด (25% หรือ 2 จาก 8 พืชทนต่อ CTV)ป้องกันพืชถั่วเหลืองมะนาวกับ CTVaphid inoculationในสุดท้ายรับสินบน inoculation ใบถั่วเหลืองการทดลองที่ท้าทายกับ CTVT-300 โดย inoculation aphid ธรรมชาติผ่านของ CTVdispersal ภายใต้ฟิลด์เงื่อนไข สิบเผยแพร่รับสินบนพืชจากรายการ SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15SCP.16, MCP.24 และตรงกันไม่ใช่ถั่วเหลืองตัวควบคุมถูก inoculated โดย aphid อาหาร และประเมินความต้านทาน ส่งไวรัสมีประสิทธิภาพเนื่องจากตัวควบคุมไม่ใช่ถั่วเหลืองทั้งหมดเป็นการติดเชื้อและ CTV serologically ตรวจพบในครั้งแรกล้าง inoculation หลัง (รูปที่ 4 c) เท่าที่สังเกตในทดสอบรับสินบน inoculation อัตราส่วนที่สำคัญ จนถึงจาก 10 เป็น 30% พืชถั่วเหลืองจาก 6บรรทัดหนีติดไวรัส (รูปที่ 4 ผลไม่shown). In the rest of the transgenic plants, symptomdevelopment and virus accumulation were delayed,
การแปล กรุณารอสักครู่..

การป้องกัน ร้อยละของพืชเริ่มตั้งแต่ 25
ที่จะถึง33%
ขึ้นอยู่กับสายพันธุ์ที่ไม่ได้พัฒนาอาการใดๆ
ในสามวูบวาบและไม่ได้มีไวรัสตามที่กำหนดโดยDAS-ELISA, ในขณะที่โรงควบคุมกลายเป็นที่ติดเชื้อและมีอาการจากล้างครั้งที่สองหลังจากการฉีดวัคซีน(รูปที่ 3 และ 4 ตารางที่ 1) เหล่านี้พันธุ์พืชได้รับการพิจารณาความทนทานต่อการติดเชื้อ CTV และส่วนที่เหลือของพืชดัดแปรพันธุกรรมจากสายเดียวกันแสดงให้เห็นว่าการลดทอนอาการ(3 รูปที่ 4) และการสะสมไวรัสลดลงเมื่อเทียบกับพืชควบคุม(ตารางที่ 1) ไม่มีของเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าพืชหลอดเลือดดำ corking ในใบเก่าอาการที่แสดงให้เห็นโดยการควบคุมหลายโรงงานเช่นเดียวกับพืชจากพันธุ์ไวต่อเส้น(ผลไม่แสดง) แตกต่างที่สำคัญยังพบการสะสมของไวรัสและอาการความรุนแรงระหว่างบรรทัดแสดงพันธุ์ไวต่อฟีโนไทป์และผู้ที่ป้องกันการแสดง(รูปที่ 4 ตารางที่ 1) การป้องกันนี้ได้มากขึ้นเห็นได้ชัดในช่วงสองวูบวาบแรกหลังการฉีดวัคซีนแต่ถูกลดลงอย่างเห็นได้ชัดโดยล้างสาม(รูปที่ 4 ตารางที่1). เพื่อยืนยันผลลัพธ์เหล่านี้สายพันธุ์ SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP 0.15, SCP.16 และ MCP.24 ถูกยัดเยียดให้ทดลองความท้าทายใหม่ นอกจากนี้ทั้งสอง SCP.15 พืชที่หนีการติดเชื้อไวรัสในความท้าทายที่ก่อนหน้านี้นอกจากนี้ยังได้รวมอยู่ในการทดลองเป็นเส้นอิสระนี้จะเรียกว่าSCP.15-5 และ SCP.15-7 แปดสิบสินบน-ขยายพันธุ์พืชจากแต่ละบรรทัดยีนและหมายเลขเดียวกันของพืชที่ถูกควบคุมการรับสินบน-เชื้อด้วยT-305 และความต้านทานต่อไวรัสก่อนที่จะประเมินว่า ผลด้วยสาย SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15, SCP.16 และ MCP.24 มีความคล้ายคลึงกับผู้ที่ได้รับก่อนหน้านี้(ไม่แสดง) แสดงให้เห็นว่ารูปแบบการป้องกันกับCTV แสดงโดยสายพันธุ์นี้คือที่สอดคล้องกัน เกี่ยวกับการขยายพันธุ์พืชจากSCP.15-5 และ SCP.15-7 33% (2 จาก 9) ของพืชSCP.15-5 และ 20% (2 จาก 10) ของพืชSCP.15-7 อยู่ ทนต่อ CTV, การป้องกันรูปแบบคล้ายกับที่พบในSCP.15 เดิมเส้น(25% หรือ 2 จาก 8 พืชทนต่อ CTV). คุ้มครองพันธุ์พืชมะนาวกับ CTV เพลี้ย-ฉีดวัคซีนเลือกสายพันธุ์รวมอยู่ในที่ผ่านมารับสินบนการฉีดวัคซีนทดลองถูกท้าทายด้วย CTV T-300 โดยการฉีดวัคซีนเพลี้ยธรรมชาติผ่านของ CTV กระจายในสภาพสนาม สิบสินบน-ขยายพันธุ์พืชจากเส้น SCP.10, SCP.11, SCP.13, SCP.15, SCP.16, MCP.24 และไม่ใช่ยีนที่เกี่ยวข้องควบคุมถูกเชื้อโดยการให้อาหารเพลี้ยและประเมินความต้านทาน ส่งไวรัสมีประสิทธิภาพตั้งแต่การควบคุมที่ไม่ได้ดัดแปรพันธุกรรมกลายเป็นที่ติดเชื้อและCTV ที่ตรวจพบทางน้ำเหลืองในครั้งแรกที่ล้างหลังการฉีดวัคซีน(รูปที่ 4c) ในฐานะที่เป็นข้อสังเกตในการทดสอบการรับสินบน-ฉีดวัคซีน, อัตราส่วนอย่างมีนัยสำคัญตั้งแต่ 10-30% ของพืชดัดแปรพันธุกรรมจากหกสายหนีการติดเชื้อไวรัส(รูปที่ 4 ผลการไม่แสดง) ในส่วนที่เหลือของพืชดัดแปรพันธุกรรมอาการการพัฒนาและการสะสมไวรัสถูกล่าช้า
การแปล กรุณารอสักครู่..

การป้องกัน เปอร์เซ็นต์ของพืชตั้งแต่ 25
33 % ขึ้นอยู่กับสายพันธุ์ ไม่ได้พัฒนา
อาการวูบวาบในใด ๆของทั้งสามและ
ไม่ประกอบด้วยไวรัสตามที่กําหนด โดย das-elisa
ในขณะที่พืชทั้งหมด , ควบคุมและกลายเป็นติดเชื้อ
ถูกอาการโดยล้างที่สองหลังจากการฉีดวัคซีน
( ตัวเลข 3 และ 4 ตารางที่ 1 ) ต้น
เหล่านี้ถือว่าเป็นพืชทน CTV และการติดเชื้อ
ส่วนที่เหลือของพืชดัดแปรพันธุกรรม จากสายเดียวกัน มีการลดทอนอาการ
( ตัวเลข 3 และ 4 ) และ
ลดไวรัสสะสมเมื่อเทียบกับการควบคุมพืช
( ตารางที่ 1 ) ไม่มีของพืชเหล่านี้มีเส้นเลือดสุดยอด
ใบเก่า อาการที่แสดงโดยพืชควบคุม
มากมาย เช่นเดียวกับพืชจากไวพันธุกรรม
เส้น ( ผลลัพธ์ไม่แสดง )ความแตกต่าง
พบในไวรัสที่สะสมและความรุนแรงระหว่างต้นบรรทัดแสดงอาการ
การเสี่ยงและผู้แสดงการป้องกัน
( รูปที่ 4 , ตารางที่ 1 ) การป้องกันนี้ชัดเจนมากขึ้น
ในแรกสองวูบวาบโพสต์ต่อแต่ถูก
เด่นชัดลดลงสามล้าง (
ตารางรูป 4 , 1 ) .
ยืนยันผลลัพธ์เหล่านี้เป็นสายพันธุกรรม . 10
scp.11 SCP , .13 , scp.15 scp.16 mcp.24 , และ ,
ภายใต้การทดลองความท้าทายใหม่ นอกจากนี้ ,
2 scp.15 พืชที่หนีจากการติดเชื้อไวรัส
ในความท้าทายที่ก่อนหน้านี้ยังรวมอยู่ในการทดลองนี้เป็นเส้นอิสระ
และเรียกว่า scp.15-5 scp.15-7 . แปดถึงสิบตอนกิ่งขยายพันธุ์พืชแต่ละต้นสาย
และ หมายเลขเดียวกันของพืชควบคุมการใส่ t-305
และความต้านทานไวรัสขึ้นก่อน ผลลัพธ์กับ
เส้น scp.10 scp.11 scp.13 scp.15 , , , , และ scp.16
mcp.24 คล้ายกับผู้ที่ได้รับก่อนหน้านี้
( ไม่แสดง ) แสดงว่าการป้องกันรูปแบบ
กับ CTV แสดงโดยเส้นเหล่านี้พันธุกรรมคือ
ที่สอดคล้องกัน เกี่ยวกับพืชที่ขยายพันธุ์จาก
scp.15-5 และ scp.15-7 33% ( 1 ใน 9 ) ของพืช scp.15-5
20 % ( 1 ใน 10 )
SCP .15-7 พืชทนต่อ CTV , การป้องกัน
รูปแบบคล้ายกับที่พบในเซลล์เดิม สาย 15
( 25% หรือ 2 จากทน CTV 8 พืช ) .
คุ้มครองพันธุกรรมพืชมะนาวกับ CTV
เลือกต้นสาย ได้แก่ เชื้ออ่อนในช่วงการท้าทายกับการทดลองวัคซีน
ทีวีสี
t-300 โดยเพลี้ยอ่อนต่อธรรมชาติผ่านทาง CTV
การแพร่กระจายภายใต้เงื่อนไขด้าน สิบตอนกิ่งขยายพันธุ์
พืชจากเส้น scp.10 scp.11 scp.13 , , ,
scp.16 SCP . 15 , และ mcp.24 ที่ไม่ใช่ยีนในการควบคุมเชื้ออ่อน
ให้อาหารและประเมินความต้านทาน การส่งไวรัสมีประสิทธิภาพทั้งหมดตั้งแต่ต้น การควบคุมก็ไม่ใช่
และ CTV คือคนที่ติดเชื้อที่ตรวจพบในการโพสต์แรก
ล้าง ( รูป 4C )เท่าที่สังเกตในการทดสอบวัคซีน
กราฟ อัตราส่วนที่สำคัญตั้งแต่
จาก 10 ถึง 30 เปอร์เซ็นต์ ของพืชดัดแปรพันธุกรรม จากหก
เส้นหลบหนี การติดเชื้อไวรัส ( รูปที่ 4 ; ผลไม่
แสดง ) ในส่วนที่เหลือของพืชดัดแปรพันธุกรรม พัฒนาการและการสะสมอาการ
ไวรัสได้ล่าช้า
การแปล กรุณารอสักครู่..
