Assay of Proinflammatory Mediators

Assay of Proinflammatory Mediators and Cytokines.
Nitrite Assay. Nitrite (NO) accumulation can be estimated
as a measure of NO production, using the Griess reaction.
Briefly, 100 μL of cell culture medium will be mixed with
100 μL of Griess reagent (equal volumes of 1% (w/v)
sulfanilamide in 5% (v/v) phosphoric acid and 0.1% (w/v)
naphthylethylenediamine-HCl), incubated at room temperature
for 10 min. Absorbance at 550 nm will be measured by
a microplate reader, using fresh culture medium as a blank
for all experiments. The amount of nitrite in samples will
be measured by standard curve prepared by using sodium
nitrite solutions. PGE2, TNF-α, Interleukine (IL-2, IL-6, etc.)
Assay. Prostaglandin E2 (PGE2), tumor necrosis factor α
(TNF-α) interleukine levels in macrophage culture medium
will be quantified by commercially available enzyme immunoassay
(EIA) kits according to the manufacture’s instructions.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Assay ของ proinflammatory ไกล่เกลี่ยและไซโตไค.
ไนไตรท์ Assay ไนไตรท์ (NO)
สะสมสามารถประมาณเป็นตัวชี้วัดของการผลิตไม่มีการใช้ปฏิกิริยาGriess.
สั้น ๆ , 100 ไมโครลิตรของกลางการเพาะเลี้ยงเซลล์จะได้รับการผสมกับ
100 ไมโครลิตรของสาร Griess (ปริมาณเท่ากับ 1% (w / v)
sulfanilamide ใน 5% (v / v) กรดฟอสฟอรัสและ 0.1% (w / v)
naphthylethylenediamine-HCl)
บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา10 นาที การดูดกลืนแสงที่ 550
นาโนเมตรจะมีการวัดโดยผู้อ่านmicroplate
โดยใช้อาหารเลี้ยงเชื้อสดเป็นที่ว่างเปล่าสำหรับการทดลองทั้งหมด ปริมาณของไนไตรท์ในตัวอย่างจะวัดได้จากกราฟมาตรฐานที่จัดทำโดยใช้โซเดียมโซลูชั่นไนไตรท์ PGE2, TNF-α, Interleukine (IL-2, IL-6, ฯลฯ ) Assay prostaglandin E2 (PGE2) เนื้องอกเนื้อร้ายกรณีα (TNF-α) ระดับ interleukine ในอาหารเลี้ยงเชื้อ macrophage จะถูกวัดโดย immunoassay เอนไซม์ใช้ได้ในเชิงพาณิชย์(EIA) ชุดตามคำแนะนำของผู้ผลิต

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทดสอบของผู้ไกล่เกลี่ย proinflammatory และ cytokines .
ไนไตรท์ ตามลำดับ ไนไตรท์ ( ไม่ ) การสะสม สามารถประเมิน
เป็นวัดที่ไม่มีการผลิต โดยใช้ griess ปฏิกิริยา
สั้น 100 μ L ของการเพาะเลี้ยงเซลล์สื่อจะถูกผสมกับμ
100 ลิตร griess Reagent ( ปริมาณเท่ากับ 1% ( w / v )
sulfanilamide 5 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) กรด กรดฟอสฟอริกและ 0.1% ( w / v )

naphthylethylenediamine HCl ) บ่มที่อุณหภูมิห้อง10 นาที ค่าการดูดกลืนแสงที่ 550 นาโนเมตร จะวัดโดย
อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย , การใช้อาหารเลี้ยงเชื้อสดว่าง
ในทุกการทดลอง ปริมาณไนไตรท์ในตัวอย่างจะถูกวัดโดยมาตรฐาน
โค้งที่เตรียมโดยการใช้โซลูชั่น
โซเดียมไนไตร์ท pge2 TNF - α ( , , interleukine IL-2 , IL-6 , ฯลฯ )
( . . . โปรสตาแกลนดิน ทู ( pge2 ) , เนื้องอกเนื้อร้ายปัจจัยα
( TNF - α ) ในระดับ interleukine
อาหารเลี้ยงเชื้อแมคโครฟาจจะ quantified โดยในเชิงพาณิชย์เอนไซม์ Immunoassay
( EIA ) ติดตั้งตามคำแนะนำของผู้ผลิต