DISCUSSIONThis study provides initi

DISCUSSION
This study provides initial evidence, from a family-based study, for association between RELN SNP rs362719 and BP in females from multiply affected pedigrees. Although candidate gene studies of RELN have been performed in schizophrenia and autism, this study represents, to our knowledge, the first focused association study of RELN in BP. Using a carefully characterized sample and a family-based design, we found overtransmission of the derived C allele in the overall sample to affected offspring (OR = 1.47), which was almost entirely accounted for by overtransmission to affected females (OR = 1.79). This finding remained significant after correction for multiple markers.

The Reelin protein is composed of a distinctive N-terminal domain followed by eight tandem repeats, each consisting of 350–390 amino acids. Each repeat comprises an extracellular growth factor (EGF)-like domain surrounded by two subrepeats. rs362719 is located 86 bp upstream of exon 42, which codes for the EGF-like domain of the fifth Reelin repeat [Royaux et al., 1997]. Interestingly, recent in vitro studies have found that both the fifth and sixth Reelin repeats are essential for binding to the two Reelin receptors, ApoER2 and VLDLR [Chameau et al., 2009]. Moreover, addition of the repeat 5–6 fragments was also sufficient to induce phosphorylation of Dab1, an “adapter” molecule responsible for triggering the Reelin intracellular signaling cascade. It is also possible that a potential risk allele is located in the intron itself, perhaps within a regulatory element with sex-specific effects.

Despite its important role in neurodevelopment and plasticity, genetic variation in RELN has only been comprehensively studied by the recent GWASs of BP and schizophrenia, along with a Scandinavian case–control study of schizophrenia [Käahler et al., 2008]. The latter study of 577 cases and 1,136 controls genotyped 71 markers in RELN and found 6 nominal associations (P values of 0.046–0.003) with schizophrenia, although the authors did not report a sex-specific analysis and it is unclear whether rs362719 was assayed. In the BP and schizophrenia GWAS results to date, there has been little support for association in RELN. However, most of these studies have used the Affymetrix platform which does not assay rs362719. As shown in Figure 1, rs362719 lies in a region of low LD that is poorly imputed; indeed, even with all genotypes of the HapMap phases I–III, the most closely linked SNP to rs362719 is insufficiently correlated (r2 = 0.44) to allow imputation with high confidence. To our knowledge, only one published GWAS of BP or schizophrenia has assayed this SNP [Need et al., 2009]. This schizophrenia case–control study found no overall association with rs362719, but did not report sex-specific analyses for this marker.

Notably, our female-specific finding with RELN parallels the results from a recent schizophrenia GWAS [Shifman et al., 2008], albeit with a different marker. Although sex-specific associations may be vulnerable to higher rates of type I error [Patsopoulos et al., 2007], our analyses were hypothesis driven and within the context of several converging lines of evidence suggesting a sex-specific effect for Reelin. For example, rat studies have provided evidence that the female hormone progesterone strongly upregulates the expression of Reelin in peripheral nerves [Roglio et al., 2008]. In addition, studies of the heterozygous reeler mouse have found significant cell loss in the cerebellum of males, with no evident effect in females [Hadj-Sahraoui et al., 1996]. The heterozygous reeler mouse was also found to have diminished expression of the oxytocin receptor [Liu et al., 2005], which is key to one of the most well characterized sexually dimorphic signaling pathways in the brain [de Vries, 2008]. While such mechanistic data are not available in humans, a meta-analysis of 12 post-mortem brain expression studies found RELN levels to be moderately, but significantly, lower in females compared with males (–1.10 change, P-value = 1.5 × 10–4), as well as lower in BP cases compared with controls (–1.11 fold change; P-value = 0.03), however, data on diagnosis-sex interaction is not available [Stanley Medical Research Institute Online Genomics Database, 2009]. We further note that there have been several prior sex-specific genetic association findings in BP including those in GPR50 [Thomson et al., 2005]. Such findings might reflect genetic correlates of well-known clinical variation in illness patterns between the sexes, such as those associated with the female reproductive cycle [Payne et al., 2007].

The strengths of our study include the rigorous characterization of subjects using the DIGS, a well validated diagnostic instrument. Our study also benefits from a family-based design that is robust to spurious findings from population stratification. This is of particular concern for markers like rs362719, which show marked allele frequency differences between populations. However, one limitation of our family-based sample is that we had suboptimal power to detect alleles of small effect (OR < 1.4). A second limitation is that, because the tagSNP selection was based on Phase I of the HapMap project, we did not cover the common variation in RELN as comprehensively as a tagging approach based on the more recent Phase II version of HapMap would have. Third, our sex-specific analyses were exploratory and require confirmation in additional samples.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สนทนาการศึกษานี้ช่วยให้การเริ่มต้นหลักฐาน จากพื้นฐานครอบครัวการศึกษา การเชื่อมโยงระหว่าง RELN SNP rs362719 และ BP ในหญิงจากพันธุ์คูณผลกระทบ ถึงแม้ว่าศึกษายีน RELN ผู้สมัครได้ปฏิบัติในโรคจิตเภทและโรคออทิซึม ศึกษาหมาย ถึง การเพิ่ม การศึกษาเน้นสมาคมแรกของ RELN ใน BP. ใช้อย่างรอบคอบ characterized และออกแบบตามครอบครัว เราพบ overtransmission ของ allele C ได้รับตัวอย่างให้ลูกหลานได้รับผลกระทบโดยรวม (หรือ = 1.47), ซึ่งถูกเกือบทั้งหมดคิด โดย overtransmission เพื่อหญิงที่ได้รับผลกระทบ (หรือ = 1.79) ค้นหานี้ยังคงสำคัญหลังจากการแก้ไขสำหรับเครื่องหมายหลายประกอบด้วยโปรตีน Reelin ของโดดเด่นเอ็นเทอร์มินัลโดเมนตามทำซ้ำแปดตัวตามกันไป แต่ละที่ประกอบด้วยกรดอะมิโน 350-390 แต่ละซ้ำประกอบด้วยสัดส่วนการเติบโตการ extracellular (EGF) -เช่นโดเมนที่ล้อมรอบ ด้วย subrepeats 2 rs362719 มี 86 ห้อง bp ต้นน้ำของ exon 42 รหัสโดเมนเช่น EGF ของ Reelin ห้าที่ทำซ้ำ [Royaux et al., 1997] เป็นเรื่องน่าสนใจ ในการศึกษาล่าสุดพบว่า ทั้งสองที่ห้า และหก Reelin ทำซ้ำเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการรวมไป 2 Reelin receptors, ApoER2 และ VLDLR [Chameau et al., 2009] นอกจากนี้ เพิ่มชิ้นส่วนซ้ำ 5 – 6 นั้นยังเพียงพอที่จะก่อให้เกิด phosphorylation ของ Dab1 โมเลกุล "การ์ด" ชอบเรียก Reelin intracellular signaling แบบเรียงซ้อน ก็ยังเป็นไปได้ว่า allele ความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นอยู่ใน intron เอง บางทีภายในองค์ประกอบข้อบังคับมีผลเฉพาะเพศแม้ มีบทบาทสำคัญในการ neurodevelopment และ plasticity ความผันแปรทางพันธุกรรมใน RELN มีเฉพาะถูกสาธารณชนศึกษา GWASs BP และโรคจิตเภท กับการศึกษากรณี – ควบคุมสแกนดิเนเวียของโรคจิตเภท [Käahler et al., 2008] ล่าสุด การศึกษาหลังกรณี 577 และ 1,136 ควบคุมเครื่องหมาย 71 genotyped ใน RELN และพบสมาคมระบุ 6 (ค่า P ของ 0.046 – 0.003) กับโรคจิตเภท ถึงแม้ว่าผู้เขียนไม่ได้วิเคราะห์เฉพาะเพศ และเป็นที่ชัดเจนว่าถูก assayed rs362719 ใน BP และโรคจิตเภท GWAS ผลลัพธ์วัน มีการสนับสนุนความสัมพันธ์ใน RELN น้อย อย่างไรก็ตาม ส่วนใหญ่ของการศึกษาเหล่านี้ได้ใช้แพลตฟอร์ม Affymetrix ซึ่ง assay rs362719 ดังแสดงในรูปที่ 1, rs362719 อยู่ในบริเวณของ LD ต่ำที่เป็นงานควาบ จริง ๆ แม้จะ มีการศึกษาจีโนไทป์ทั้งหมดของการ HapMap ระยะฉัน – III, SNP เชื่อมโยงอย่างใกล้ชิดที่สุดกับ rs362719 เป็น insufficiently correlated (r2 = 0.44) ให้ imputation มีความมั่นใจสูง ความรู้ของเรา เพียงเผยแพร่ GWAS BP หรือโรคจิตเภทมี assayed SNP นี้ [ต้อง et al., 2009] กรณี – ควบคุมโรคจิตเภทนี้ศึกษาพบความสัมพันธ์โดยรวมไม่ มี rs362719 แต่ไม่ได้วิเคราะห์เฉพาะเพศสำหรับเครื่องนี้Notably, our female-specific finding with RELN parallels the results from a recent schizophrenia GWAS [Shifman et al., 2008], albeit with a different marker. Although sex-specific associations may be vulnerable to higher rates of type I error [Patsopoulos et al., 2007], our analyses were hypothesis driven and within the context of several converging lines of evidence suggesting a sex-specific effect for Reelin. For example, rat studies have provided evidence that the female hormone progesterone strongly upregulates the expression of Reelin in peripheral nerves [Roglio et al., 2008]. In addition, studies of the heterozygous reeler mouse have found significant cell loss in the cerebellum of males, with no evident effect in females [Hadj-Sahraoui et al., 1996]. The heterozygous reeler mouse was also found to have diminished expression of the oxytocin receptor [Liu et al., 2005], which is key to one of the most well characterized sexually dimorphic signaling pathways in the brain [de Vries, 2008]. While such mechanistic data are not available in humans, a meta-analysis of 12 post-mortem brain expression studies found RELN levels to be moderately, but significantly, lower in females compared with males (–1.10 change, P-value = 1.5 × 10–4), as well as lower in BP cases compared with controls (–1.11 fold change; P-value = 0.03), however, data on diagnosis-sex interaction is not available [Stanley Medical Research Institute Online Genomics Database, 2009]. We further note that there have been several prior sex-specific genetic association findings in BP including those in GPR50 [Thomson et al., 2005]. Such findings might reflect genetic correlates of well-known clinical variation in illness patterns between the sexes, such as those associated with the female reproductive cycle [Payne et al., 2007].The strengths of our study include the rigorous characterization of subjects using the DIGS, a well validated diagnostic instrument. Our study also benefits from a family-based design that is robust to spurious findings from population stratification. This is of particular concern for markers like rs362719, which show marked allele frequency differences between populations. However, one limitation of our family-based sample is that we had suboptimal power to detect alleles of small effect (OR < 1.4). A second limitation is that, because the tagSNP selection was based on Phase I of the HapMap project, we did not cover the common variation in RELN as comprehensively as a tagging approach based on the more recent Phase II version of HapMap would have. Third, our sex-specific analyses were exploratory and require confirmation in additional samples.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อภิปรายการศึกษาครั้งนี้มีหลักฐานว่าเริ่มต้นจากการศึกษาครอบครัวที่ใช้สำหรับการเชื่อมโยงระหว่าง RELN SNP rs362719 และความดันโลหิตในสตรีที่ได้รับผลกระทบจาก pedigrees คูณ
ถึงแม้ว่าการศึกษายีนที่ผู้สมัครของ RELN ได้รับการดำเนินการในโรคจิตเภทและออทิสติกเป็นตัวแทนของการศึกษาครั้งนี้เพื่อความรู้ของเราที่มุ่งเน้นการศึกษาสมาคมแรกของ RELN ใน BP ใช้ตัวอย่างโดดเด่นอย่างระมัดระวังและการออกแบบที่ครอบครัวตามที่เราพบ overtransmission ของอัลลีลซีมาในตัวอย่างโดยรวมได้รับผลกระทบไปยังลูกหลาน (OR = 1.47) ซึ่งคิดเป็นสัดส่วนเกือบทั้งหมดโดย overtransmission หญิงได้รับผลกระทบ (OR = 1.79) การค้นพบนี้ยังคงอยู่อย่างมีนัยสำคัญหลังจากการแก้ไขสำหรับเครื่องหมายหลาย. โปรตีน Reelin ประกอบด้วยโดดเด่น N-terminal domain ตามด้วยแปดซ้ำควบคู่แต่ละที่ประกอบด้วยกรดอะมิโน 350-390 แต่ละซ้ำประกอบด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตนอก (EGF) เหมือนโดเมนล้อมรอบด้วยสอง subrepeats rs362719 ตั้งอยู่ 86 bp ต้นน้ำของเอกซ์ซอน 42 ซึ่งรหัสสำหรับโดเมน EGF เหมือนของซ้ำ Reelin ห้า [Royaux et al., 1997] ที่น่าสนใจที่ผ่านมาการศึกษาในหลอดทดลองพบว่าทั้ง Reelin ที่ห้าและหกซ้ำมีความจำเป็นสำหรับผูกพันกับทั้งสองรับ Reelin, ApoER2 และ VLDLR [Chameau et al., 2009] นอกจากนี้การเพิ่มขึ้นของการทำซ้ำ 5-6 ชิ้นก็ยังเพียงพอที่จะทำให้เกิด phosphorylation ของ Dab1 เป็น "อะแดปเตอร์" โมเลกุลรับผิดชอบในการเรียกน้ำตก Reelin ส่งสัญญาณภายในเซลล์ นอกจากนี้ยังเป็นไปได้ว่าอัลลีลที่มีความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นตั้งอยู่ใน intron ตัวเองอาจจะเป็นที่อยู่ในองค์ประกอบของการกำกับดูแลที่มีผลกระทบเพศที่เฉพาะเจาะจง. แม้จะมีบทบาทสำคัญใน neurodevelopment และปั้นการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมใน RELN มีเพียงการศึกษาอย่างทั่วถึงโดยแก้วเมื่อเร็ว ๆ นี้ ความดันโลหิตและโรคจิตเภทพร้อมกับกรณีศึกษาการควบคุมสแกนดิเนเวียนของโรคจิตเภท [Käahler et al., 2008] การศึกษาหลังของ 577 รายและ 1,136 ควบคุม genotyped 71 เครื่องหมายใน RELN และพบ 6 สมาคมเล็กน้อย (ค่า P ของ 0.046-0.003) มีอาการจิตเภทแม้ว่าผู้เขียนไม่ได้รายงานการวิเคราะห์เพศที่เฉพาะเจาะจงและยังไม่ชัดเจนว่า rs362719 ได้รับการวิเคราะห์ ในความดันโลหิตและโรคจิตเภท GWAS ส่งผลถึงวันที่ได้มีการสนับสนุนน้อยสำหรับการเชื่อมโยงใน RELN แต่ส่วนใหญ่ของการศึกษาเหล่านี้ได้ใช้แพลตฟอร์ม Affymetrix ซึ่งไม่ assay rs362719 ดังแสดงในรูปที่ 1 rs362719 อยู่ในพื้นที่ของ LD ต่ำที่รวมอยู่ในตั๋วไม่ดี; แน่นอนแม้จะมียีนทั้งหมดของขั้นตอน HapMap I-III, SNP ส่วนใหญ่เชื่อมโยงกับ rs362719 มีความสัมพันธ์ไม่เพียงพอ (r2 = 0.44) เพื่อให้การใส่ร้ายด้วยความมั่นใจสูง ความรู้ของเราเพียงคนเดียวที่ตีพิมพ์ GWAS ของ BP หรือจิตเภทได้ assayed SNP นี้ [ถ้าต้องการ et al., 2009] กรณีศึกษาการควบคุมจิตเภทนี้พบว่าไม่มีความสัมพันธ์โดยรวมที่มี rs362719 แต่ไม่ได้รายงานมีเซ็กซ์โดยเฉพาะการวิเคราะห์เครื่องหมายนี้. ยวดค้นพบหญิงที่เฉพาะเจาะจงของเรากับ RELN แนวผลจากอาการจิตเภทที่ผ่านมา GWAS [Shifman et al., 2008] แม้จะมีเครื่องหมายที่แตกต่างกัน แม้ว่าความสัมพันธ์ทางเพศที่เฉพาะเจาะจงอาจจะมีความเสี่ยงที่จะมีอัตราที่สูงขึ้นของความผิดพลาดประเภท [Patsopoulos et al., 2007] การวิเคราะห์ของเราได้ขับเคลื่อนและสมมติฐานในบริบทของสายมาบรรจบกันหลายหลักฐานผลเพศที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ Reelin ตัวอย่างเช่นการศึกษาหนูได้ให้หลักฐานที่แสดงว่าฮอร์โมนฮอร์โมนเพศหญิงอย่างยิ่ง upregulates การแสดงออกของ Reelin ในเส้นประสาทส่วนปลาย [Roglio et al., 2008] นอกจากนี้การศึกษาของเมาส์ reeler heterozygous พบการสูญเสียเซลล์ที่สำคัญในสมองของเพศชายที่ไม่มีผลกระทบที่เห็นได้ชัดในเพศหญิง [Hadj Sahraoui-et al., 1996] เมาส์ reeler heterozygous นอกจากนี้ยังพบว่าจะมีการแสดงออกลดลงของรับอุ้ง [หลิว et al., 2005] ซึ่งเป็นกุญแจสำคัญในการเป็นหนึ่งในลักษณะที่ดีที่สุดแต๊ะอั๋ง dimorphic เส้นทางการส่งสัญญาณในสมอง [de Vries 2008] ขณะที่ข้อมูลกลไกดังกล่าวจะไม่สามารถใช้ได้ในมนุษย์ meta-analysis 12 ชันสูตรศพการศึกษาการแสดงออกของสมองพบว่าระดับ RELN จะเป็นในระดับปานกลางอย่างมีนัยสำคัญ แต่ลดลงในเพศหญิงเมื่อเทียบกับผู้ชาย (-1.10 เปลี่ยนแปลง P-value = 1.5 × 10 -4) เช่นเดียวกับการลดลงในกรณีของ BP เมื่อเทียบกับการควบคุม (-1.11 เปลี่ยนแปลงเท่า; P-value = 0.03) แต่ข้อมูลเกี่ยวกับการทำงานร่วมกันวินิจฉัยเพศไม่สามารถใช้งาน [สแตนเลย์สถาบันการวิจัยทางการแพทย์ฟังก์ชั่นฐานข้อมูลออนไลน์ 2009] เรายังทราบว่ามีหลายก่อนมีเพศสัมพันธ์โดยเฉพาะการค้นพบความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมใน BP รวมทั้งผู้ที่อยู่ใน GPR50 [ทอมสัน et al., 2005] การค้นพบดังกล่าวอาจสะท้อนให้เห็นถึงความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมของการเปลี่ยนแปลงทางคลินิกที่รู้จักกันดีในรูปแบบการเจ็บป่วยระหว่างเพศเช่นผู้ที่เกี่ยวข้องกับวงจรการสืบพันธุ์เพศหญิง [เพน et al., 2007]. จุดแข็งของการศึกษาของเรารวมถึงตัวละครอย่างเข้มงวดของอาสาสมัครที่ใช้ ห้องว่างให้เช่า, เครื่องมือวินิจฉัยการตรวจสอบที่ดี การศึกษาของเรายังได้รับประโยชน์จากการออกแบบในครอบครัวตามที่มีประสิทธิภาพต่อการค้นพบปลอมจากการแบ่งชั้นของประชากร นี่คือความกังวลโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับเครื่องหมายเช่น rs362719 ซึ่งแสดงความแตกต่างความถี่อัลลีลที่ทำเครื่องหมายไว้ระหว่างประชากร แต่หนึ่งในข้อ จำกัด ของกลุ่มตัวอย่างที่ใช้ในครอบครัวของเราคือการที่เรามีอำนาจที่ก่อให้เกิดผลลัพธ์ในการตรวจสอบผลกระทบของอัลลีลขนาดเล็ก (หรือ <1.4) ข้อ จำกัด ที่สองคือเพราะการเลือก tagSNP ก็ขึ้นอยู่กับระยะของโครงการ HapMap เราไม่ได้ครอบคลุมถึงการเปลี่ยนแปลงที่พบบ่อยใน RELN เป็นกว้างเป็นวิธีการติดแท็กที่ขึ้นอยู่กับระยะที่ล่าสุดสองรุ่นของ HapMap จะมี ประการที่สามการวิเคราะห์เพศที่เฉพาะเจาะจงของเราได้สำรวจและต้องยืนยันในตัวอย่างเพิ่มเติม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การอภิปราย
การศึกษานี้มีหลักฐานเบื้องต้นจากครอบครัวศึกษาตามความสัมพันธ์ระหว่าง SNP rs362719 reln และ BP ในเพศหญิงจากคูณผลกระทบตาย . ถึงแม้ว่าผู้สมัครการศึกษายีนของ reln ได้ปฏิบัติในโรคจิตเภทและออทิสติก การศึกษานี้แสดงถึงความรู้ แรกเน้นสมาคมการศึกษาของ reln ใน BP .ใช้อย่างระมัดระวัง ลักษณะตัวอย่างและครอบครัวออกแบบตาม เราพบได้ใน overtransmission ของ C ในตัวอย่างโดยรวมจะมีผลต่อลูกหลาน ( OR = 1.47 ) ซึ่งเกือบทั้งหมดเป็นโดยได้รับผลกระทบ overtransmission เพศหญิง ( OR = 1.79 ) การค้นพบนี้ยังคงสำคัญหลังจากแก้ไขหลายเครื่องหมาย

การดึงโปรตีนประกอบด้วยกรดอะมิโนที่โดเมนตามแปดซ้ำกันไปละ 350 - 390 กรดอะมิโน ในแต่ละซ้ำประกอบด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตและ ( EGF ) - ชอบโดเมนล้อมรอบด้วยสอง subrepeats . rs362719 ตั้งอยู่ที่ 86 BP เหนือล้อหน้า 42 ซึ่งรหัสสำหรับ EGF ชอบโดเมนของห้ารีลินย้ำ [ royaux et al . , 1997 ) น่าสนใจล่าสุดในหลอดทดลองพบว่า ทั้ง 5 และ 6 รีลินซ้ำที่จําเป็นสําหรับผูกกับตัวรับสอง ดึง , และ apoer2 vldlr [ chameau et al . , 2009 ] นอกจากนี้ , นอกจากนี้ย้ำ 5 – 6 ชิ้นก็เพียงพอที่จะทำให้เกิดปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชันของ dab1 , " อะแดปเตอร์ " โมเลกุลรับผิดชอบการทริกเกอร์การดึงสัญญาณน้ำตกนอกจากนี้ยังเป็นไปได้ว่า ความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นซึ่งตั้งอยู่ใน iNtRON ตัวเอง บางทีอาจจะภายในองค์ประกอบที่เกี่ยวข้องกับผลตรวจหา

แม้จะมีบทบาทสำคัญใน neurodevelopment และปั้น , ความแปรปรวนทางพันธุกรรมใน reln ได้รับทั่วถึงศึกษาโดย gwass ล่าสุดของ BP และจิตเภท พร้อมกับกรณีศึกษาของโรคจิตเภทและสแกนดิเนเวียน ควบคุม [ K และ ahler et al . ,2008 ] การศึกษาหลัง 577 ราย และการควบคุม genotyped 71 1136 เครื่องหมายใน reln และพบ 6 สมาคมปกติ ( p ) ค่า ( 1 ) โรคจิตเภท แม้ว่าผู้เขียนจะไม่ได้รายงานการวิเคราะห์ตรวจหาและเป็นที่ชัดเจนว่า rs362719 ซีรั่ม . ใน BP และ gwas โรคจิตเภทผลลัพธ์วันที่ได้มีการรองรับสำหรับสมาคมใน reln . อย่างไรก็ตาม