C. gloeosporioides transformation b

C. gloeosporioides transformation by electroporation. Oval spores of C. gloeosporioides were prepared in shaken cultures from 7 d-old conidia, grown in 50 mL of FRIES culture medium (30 g of sucrose, 5 g of (NH4)2C4H4O6,1gofNH4NO3,1gofKH2PO4, 0.25 g of MgSO4 (anhydrous), 1 g of NaCl, 0.13 g of CaCl2 .2H2O, 1 g of yeast extract topped up with 1 L of distilled water) at 25 C for 24 h in the dark. To induce the formation of germlings, young spores were spread on cellophane sheets overlaid on half-strength Difco
PDB (BD, Madison, USA) plus 0.5% agar for 2–3 h at room temperature. Germinated spores were scraped off and harvested in the presence of cold electroporation buffer (1 mMHEPES, 50 mMmannitol, pH adjusted to 7.5 with 5NNaOH). The suspension was kept on ice before use

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

C. gloeosporioides แปลง โดย electroporation รูปไข่จำนวนสปอร์ของ C. gloeosporioides มีเตรียมในวัฒนธรรมเขย่าจาก conidia d อายุ 7 ปลูกกลางวัฒนธรรมมันทอด (30 กรัมของน้ำตาลซูโครส 5 กรัม (NH4) 2C4H4O6, 1gofNH4NO3, 1gofKH2PO4, MgSO4 (รัส), 1 กรัมของ NaCl, CaCl2 .2H2O สารสกัดจากยีสต์ที่ราดน้ำกลั่น 1 L g 1 0.13 กรัม 0.25 กรัม) 50 มิลลิลิตรที่ 25 C ใน 24 h ในมืด เพื่อก่อให้เกิดการก่อตัวของ germlings หนุ่มราได้แพร่บนกระดาษแก้วแผ่นที่วางทับบนครึ่งแรง PDB Difco (BD เมดิสัน สหรัฐอเมริกา) บวก 0.5% อาหารสำหรับ 2-3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เปลือกงอกราถูกขูดออก และเก็บเกี่ยวในบัฟเฟอร์ electroporation เย็น (1 mMHEPES, mMmannitol 50 ค่า pH ปรับ 7.5 กับ 5NNaOH) ช่วงล่างถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งก่อนใช้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

C. gloeosporioides การเปลี่ยนแปลงโดย electroporation สปอร์รูปไข่ของ C. gloeosporioides ได้จัดทำในวัฒนธรรมเขย่าจากสปอร์ 7 D-เก่าที่ปลูกใน 50 มลของกลางวัฒนธรรม FRIES (30 กรัมของน้ำตาลซูโครส 5 กรัม (NH4) 2C4H4O6,1gofNH4NO3,1gofKH2PO4, 0.25 กรัม MgSO4 (ไม่มีน้ำ ) 1 กรัมโซเดียมคลอไรด์ 0.13 กรัม CaCl2 .2H2O 1 กรัมของสารสกัดจากยีสต์เติมเงินกับ 1 ลิตรของน้ำกลั่น) ที่ 25 C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในที่มืด เพื่อก่อให้เกิดการก่อตัวของ germlings ที่สปอร์หนุ่มกระจายอยู่บนแผ่นกระดาษแก้ววางทับบนครึ่งแข็งแรง Difco? PDB (BD, Madison, USA) บวก 0.5% วุ้นสำหรับ 2-3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง สปอร์งอกถูกขูดออกและเก็บเกี่ยวในการปรากฏตัวของบัฟเฟอร์เย็น (1 mMHEPES 50 mMmannitol, ปรับ pH 7.5 กับ 5NNaOH) ระงับถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งก่อนการใช้งาน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เปลี่ยน C . gloeosporioides โดย electroporation . สปอร์ของเชื้อรา C . วงรีเป็นการเตรียมเขย่าวัฒนธรรมจากโคนิ 7 d-old ปลูกใน 50 มิลลิลิตร ฟรายอาหารเลี้ยงเชื้อ ( 30 กรัมน้ำตาลทราย 5 กรัม ( NH4 ) 2c4h4o6,1gofnh4no3,1gofkh2po4 0.25 กรัม MgSO4 ใ ( anhydrous ) 1 กรัมของเกลือ , 0.13 กรัม CaCl2 . 2H2O-dx , 1 กรัมยีสต์สกัดหน้าขึ้น 1 ลิตรของน้ำ ) ที่อุณหภูมิ 25 C เป็นเวลา 24 ชั่วโมงในที่มืด เพื่อก่อให้เกิดการก่อตัวของ germlings สปอร์ยังกระจายบนแผ่นกระดาษแก้วหุ้มครึ่งแรง difco PDB ( BD , เมดิสัน สหรัฐอเมริกา ) บวก 0.5% วุ้น 2 – 3 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เพาะสปอร์ถูกขูดออกและเก็บเกี่ยวในการแสดงตนของบัฟเฟอร์ electroporation เย็น ( 1 mmhepes 50 mmmannitol ปรับ pH 7.5 , กับ 5nnaoh ) ช่วงล่างที่ถูกเก็บไว้บนน้ำแข็ง ก่อนใช้