cut from the apical end of each pie

cut from the apical end of each piece of petiole. The total
number of petiole segments from which endophytes were
isolated, for each palm at each sampling date, is given in
Table 1.
Surface sterilisation techniques followed Petrini, Stone &
Carroll (1982) as this method proved successful in a study on
the endophytes of L. ramsayi by Rodrigues & Samuels (1990)
and was also tested and found to be effective by Schulz et al.
(1993). Each leaf disc taken from the frond blade was surface
sterilised by dipping in 96% ethanol for 1 min, then in 65%
commercial Chlorax2 (final concentration 3±25% aqueous
sodium hypochlorite) for 10 min and, finally, in 96% ethanol
for 30 s. The leaf discs were then transferred to labelled
100 mm Petri dishes containing potato dextrose agar (PDA,
200 g l−" potatoes, infusion form, 20 g l−" Bacto dextrose,
Difco), incorporating 1 % (w}v) streptomycin sulphate (Sigma).
Four discs were placed in each dish.
The same procedure was applied to the 5 mm wide petiole
segments except that they were dipped in alcohol for 90 s,
Chlorax for 15 min and 96% alcohol for 30 s. Two petiole
sections were then placed in each Petri dish.
Petri dishes containing leaf-discs and stem fragments were
incubated at room temperature (ca 22 °C), with 12 h cool,
white, fluorescent light and 12 h darkness. Fungi that grew
from the tissue fragments were subcultured onto PDA in Petri
dishes (90 mm). Some months later, isolates that had failed to
produce reproductive structures were subcultured again onto
malt extract agar (MEA, 30 g l−" malt extract, Oxoid) in a
50 mm Petri dish containing a thin strip (40¬5 mm) of
autoclaved host tissue to encourage sporulation (Matsushima
1971, 1975, cited in Bills & Polishook 1994). This method of
subculturing was slightly modified for fungi from the second
and third Brunei samplings. The initial medium was supplemented
with 0±03% Rose Bengal (BDH Laboratory Supplies)
to slow the growth of faster growing fungi, and fungi that
grew from tissue fragments were subcultured directly onto
MEA containing a strip of autoclaved host tissue.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัดจากท้ายปลายยอดของแต่ละชิ้นของ petiole ผลรวมหมายเลขของเซ็กเมนต์ petiole ซึ่งถูก endophytesแยกต่างหาก สำหรับปาล์มแต่ละที่แต่ละวันสุ่มตัวอย่าง ได้รับในตารางที่ 1เทคนิคผิว sterilisation ตาม Petrini หินและคาร์ (1982) เป็นวิธีนี้พิสูจน์แล้วว่าประสบความสำเร็จในการศึกษาendophytes ของ ramsayi L. โดยโรดริเกวส & Samuels (1990)และยังทดสอบ และพบว่ามีผลโดย Schulz et al(1993) ดิสก์แต่ละใบจากใบมีด frond มีพื้นผิวsterilised โดยจุ่มใน 96% เอทานอลในนาทีที่ 1 แล้วใน 65%Chlorax2 ค้า (ความเข้มข้นสุดท้าย 3±25% อควีฟอกขาว) ใน 10 นาที และ สุดท้าย 96% เอทานอลสำหรับ 30 s ใบดิสก์ถูกโอนย้ายไปที่มันแล้วจาน Petri 100 มม.ประกอบด้วยมันฝรั่งขึ้น agar (PDAขึ้น Bacto 200 g l−"มันฝรั่ง แบบฟอร์มคอนกรีต l− 20 g"Difco), เพจซัลเฟต streptomycin 1% (w } v) (ซิกมา)4 ดิสก์ถูกวางในแต่ละจานใช้กระบวนการเดียวกันกับ petiole กว้าง 5 มม.ส่วนยกเว้นว่าพวกเขาถูกจุ่มลงในแอลกอฮอล์สำหรับ 90 sChlorax สำหรับแอลกอฮอล์ 96% และ 15 นาทีสำหรับ 30 s สอง petioleส่วนที่อยู่ในแต่ละจานเพาะเชื้อPetri อาหารใบดิสก์ที่มี และมีบางส่วนของต้นกำเนิดincubated ที่อุณหภูมิห้อง (ca 22 ° C), กับ 12 h เย็นสีขาว เรืองแสงไฟและ 12 h ความมืด เชื้อราที่เติบโตจากเนื้อเยื่อ บางส่วนของถูก subcultured ไปยัง PDA ใน Petriอาหาร (90 มิลลิเมตร) เดือนต่อมา แยกที่มีล้มโครงสร้างสืบพันธุ์ผลิตได้ subcultured ไปอีกมอลต์สกัด agar (MEA, l− 30 g"มอลต์สกัด Oxoid) ในการ50 มม.จานเพาะเชื้อที่ประกอบด้วยตอก (40¬5 mm)เนื้อเยื่อโฮสต์ autoclaved ส่งเสริม sporulation (มัตสึชิมะปี 1971, 1975 อ้างถึงในสูตรและ Polishook 1994) วิธีการนี้subculturing ถูกปรับเปลี่ยนเล็กน้อยสำหรับเชื้อราจากที่สองและสามบรูไน samplings มีเสริมสื่อเริ่มต้น0±03% โรสเบงกอล (BDH ห้องปฏิบัติการวัสดุ)จะชะลอการเติบโตของการเจริญเติบโตได้เร็วขึ้นเชื้อรา และเชื้อราที่เติบโตจากเนื้อเยื่อบางส่วนของถูก subcultured โดยตรงไปยังสถานที่ที่ประกอบด้วยแถบของเนื้อเยื่อโฮสต์ autoclaved

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัดออกมาจากปลายยอดของแต่ละชิ้นส่วนของก้านใบ รวมจำนวนของกลุ่มก้านใบที่ endophytes ถูกแยกสำหรับปาล์มณ วันที่สุ่มตัวอย่างแต่ละจะได้รับในตารางที่1 เทคนิคการฆ่าเชื้อตามพื้นผิว Petrini, หินและแครอล(1982) ในขณะที่วิธีการนี้ประสบความสำเร็จในการศึกษาในendophytes ของ ลิตร ramsayi โดยโรดริกูและแอล (1990) และยังได้รับการทดสอบและพบว่ามีประสิทธิภาพโดยชัลส์ et al. (1993) แต่ละแผ่นใบนำมาจากใบเฟินที่ถูกพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อโดยการจุ่มในเอทานอล 96% เป็นเวลา 1 นาทีแล้ว 65% ในเชิงพาณิชย์ Chlorax2 (ความเข้มข้นสุดท้าย 3 ± 25% น้ำโซเดียมไฮโปคลอไรต์) เป็นเวลา 10 นาทีและในที่สุดในเอทานอล 96% สำหรับ 30 วินาที แผ่นใบถูกย้ายไปแล้วติดป้าย100 มิลลิเมตรจานเลี้ยงเชื้อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่ง (PDA, 200 gl- "มันฝรั่งแบบแช่ 20 gl-" เดกซ์โทรส Bacto, Difco) มาตรการ 1% (w} V) ซัลเฟต streptomycin (ซิกม่า ). สี่แผ่นถูกวางไว้ในแต่ละจาน. ขั้นตอนเดียวกันถูกนำไปใช้กับ 5 มิลลิเมตรกว้างก้านใบส่วนยกเว้นว่าพวกเขาถูกจุ่มลงในเครื่องดื่มแอลกอฮอล์เป็นเวลา90 วินาที, Chlorax นาน 15 นาทีและเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ 96% เป็นเวลา 30 วินาที สองก้านใบส่วนที่ถูกวางไว้แล้วในแต่ละจานเลี้ยงเชื้อ. จานเลี้ยงเชื้อที่มีใบแผ่นและเศษลำต้นถูกบ่มที่อุณหภูมิห้อง (ca 22 ° C) ที่มี 12 ชั่วโมงเย็นสีขาวไฟเรืองแสงและความมืด12 ชั่วโมง เชื้อราที่ขยายตัวจากเศษเนื้อเยื่อที่ถูกเลี้ยงบน PDA ใน Petri อาหาร (90 มิลลิเมตร) หลายเดือนต่อมาแยกที่เคยล้มเหลวในการผลิตโครงสร้างสืบพันธุ์ที่ถูกเลี้ยงอีกครั้งบนมอลต์สกัดจากวุ้น(กฟน. 30 gl- "สารสกัดจากมอลต์ Oxoid) ใน50 มิลลิเมตรจานเลี้ยงเชื้อที่มีเส้นบาง ๆ (40¬5มิลลิเมตร) เป็นเจ้าภาพอิฐ เนื้อเยื่อที่จะสนับสนุนให้สร้างสปอร์ (Matsushima 1971, 1975, อ้างในตั๋วเงินและ Polishook 1994). วิธีการนี้ในการถ่ายเชื้อมีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยสำหรับเชื้อราจากสองบรูไนและสามกลุ่มตัวอย่าง. กลางเริ่มต้นก็ตบท้ายด้วย 0 ± 03% โรสเบงกอล (BDH ห้องปฏิบัติการ วัสดุ) เพื่อชะลอการเจริญเติบโตของเชื้อราเจริญเติบโตได้เร็วและเชื้อราที่งอกออกมาจากเศษเนื้อเยื่อที่ถูกเลี้ยงโดยตรงไปยังการไฟฟ้านครหลวงที่มีแถบของเนื้อเยื่อเจ้าภาพอิฐ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัดจากปลายยอดของแต่ละชิ้นของก้านใบ .
รวมจำนวนกลุ่มก้านใบที่ endophytes ถูก
แยกสำหรับแต่ละปาล์มในแต่ละคนอาจจะได้รับใน sterilisation

โต๊ะ 1 . เทคนิคพื้นผิวตาม เปตรินี , หิน&
คาร์โรลล์ ( 1982 ) เป็นวิธีนี้พิสูจน์ความสําเร็จในการศึกษา
endophytes ของ L . ramsayi โดย Rodrigues &ซามูเอล ( 2533 )
และยังถูกทดสอบและพบว่ามีประสิทธิภาพโดยชูลซ์ et al .
( 1993 ) แต่ละใบดิสก์ที่ถ่ายจากใบดาบถูกผิว
sterilised จุ่มแอลกอฮอล์ 96% เป็นเวลา 1 นาที จากนั้นใน chlorax2 พาณิชย์ 65 %
( ความเข้มข้นสุดท้าย 3 ± 25% น้ำ
โซเดียมไฮโปคลอไรต์ ) เป็นเวลา 10 นาทีและในที่สุดใน 96 % เอทานอล
30 . ใบดิสก์ถูกโอนไปติดป้าย
100 มม. จานเลี้ยงเชื้อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ,
200 g L − " มันฝรั่ง , แบบฟอร์ม , แบบ 20 g L − " Bacto เดกซ์โทรส
difco ) ผสมผสาน 1% ( w } v ) สเตรปโตมัยซินซัลเฟต ( Sigma ) .
4 แผ่นอยู่ในแต่ละจาน
ขั้นตอนเดียวกันจะใช้ 5 มิลลิเมตร กว้างส่วนก้านใบ
ยกเว้นว่าพวกเขาถูกจุ่มลงในแอลกอฮอล์ 90 S ,
chlorax 15 นาทีและแอลกอฮอล์ 96% 30 s
2 ก้านส่วนที่ถูกวางไว้แล้วใน Petri แต่ละจาน จานเลี้ยงเชื้อที่มีแผ่นใบ

และเศษลำต้นถูกบ่มที่อุณหภูมิห้อง ( CA 22 ° C ) , กับ 12 ชั่วโมง เย็น
สีขาว , ไฟเรืองแสงและ 12 ชั่วโมง ความมืด เชื้อราที่เติบโต
จากเนื้อเยื่อชิ้นส่วนถูก subcultured บน PDA ในจาน Petri
( 90 มม. ) หลายเดือนต่อมา ไอโซเลตที่ได้ล้มเหลวที่จะ
ผลิตโครงสร้างการสืบพันธุ์เป็น subcultured อีกครั้งบน malt extract agar
( กฟน. , 30 g L − " มอลสกัด oxoid ) ใน
50 mm จานเพาะเชื้อที่มีแถบบาง ( 40 ¬ 5 มิลลิเมตร ) เพื่อส่งเสริมการสร้างเนื้อเยื่อสังเคราะห์
โฮสต์ ( Matsushima
1971 , 1975 , อ้างในตั๋ว& polishook 1994 ) วิธีนี้คือการแก้ไขเล็กน้อยเพื่อเลี้ยง

โดยเชื้อราจากที่สองและที่สามบรูไนระดับเริ่มต้นเสริม
0 ± 03 % โรสเบงกอล ( bdh อุปกรณ์ห้องปฏิบัติการ )
เพื่อชะลอการเจริญเติบโตของเชื้อรา และเชื้อราที่เติบโตได้เร็วขึ้น , เพิ่มขึ้นจากเศษเนื้อเยื่อถูก subcultured

การไฟฟ้านครหลวงโดยตรงลงบนเนื้อเยื่อสังเคราะห์ที่มีแถบของโฮสต์