by HMBC data. Thus, peak 8 in the l

by HMBC data. Thus, peak 8 in the leaf and flower extract
represents 3¢-O-acetyl-3¢-epiafroside34 (5, Table 1). This natural
product appears to have been encountered only once prior to this
work.34
Separation of the stem and root extracts required different
chromatographic conditions compared to the leaf and flower
extracts (Figure 1). The chromatograms contained seven and five
main peaks, respectively, numbered 9-15 (Figure 1), which were
subjected to HPLC-DAD-SPE-NMR analysis. Compounds responsible
for peaks 9, 11, and 13-15 were present in both extracts
(1H NMR, UV). Peak 10 contained isorhamnetin 3-O-rutinoside
(4), already identified as peak 4 in the leaf and flower extract.
Peak 9 also contained a flavonol glycoside not investigated in
detail. The NMR spectra obtained with peaks 12, 14, and 15
provided insufficient data for structure elucidation.
The 1H NMR spectra obtained with peaks 11 (Figure 3A) and
13 both exhibited characteristic features of a 5R-cardenolide with
a sugar moiety attached to C3. However, one of the angular methyl
groups (C19) was missing and replaced by a hydroxymethyl
group, as shown by 1H NMR and HSQC data (Figure 3). The
compound eluted as peak 11 showed two anomeric hydrogens at
ä 4.62 (d, J ) 8.10 Hz) and 4.37 (d, J ) 7.8 Hz, H1¢¢), whereas
only a single anomeric resonance was observed with peak 13 (ä
4.59, d, J ) 7.96 Hz). Both compounds exhibited a methyl group
doublet (ä 1.23 and 1.17 for peaks 11 and 13, respectively; J ) 6.3
Hz) characteristic of a 6-deoxy-â-D-allopyranose moiety common
in 5R-cardenolides. The HSQC spectrum obtained with peak 13
provided 13C chemical shifts practically identical to those reported
for coroglaucigenin â-D-allopyranoside, i.e., frugoside (6).38 Similarly,
HSQC spectrum obtained with peak 11 (Figure 3B) disclosed
the presence of a â-D-glucopyranosyl residue attached to C4¢ of
the 6-deoxyallose moiety, as shown by the chemical shift of C4¢
(ä 83.7), changed by +9.5 ppm compared to 6.36 Therefore, the
diglycoside eluted as peak 11 was identified as coroglaucigenin
3-O-(4-O-â-D-glucopyranosyl)-6-deoxy-â-D-glucopyranoside 7 (Table
1).39
Although the identification of compounds 1-7 was performed
on the basis of detailed interpretation of NMR data alone in order
to demonstrate the power of the HPLC-DAD-SPE-NMR technique,
molecular masses obtained in separate HPLC-MS experiments
fully confirmed the assignments. Thus, ESI spectra obtained in
positive-ion mode exhibited MH+ ions and fragments corresponding
to the loss of the sugar residues. The MS data are summarized
in Table 1.
The detection of chromatographic peaks in this work was
based on UV absorption. While most organic compounds have
some end absorption around 200 nm and can be detected using
water/acetonitrile mobile phases, very low-absorbing constituents
could give rise to insignificant peak intensities. To make sure that
no significant constituents of the K. laniflora extracts have escaped
the present analysis, 1H NMR spectra of the crude extracts were
acquired in NMR tubes in CD3OD. Inspection of these spectra
confirmed the presence of free carbohydrates, which were
presumably eluted from the HPLC column with the solvent front.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โดยข้อมูล HMBC ดังนั้น peak 8 ในสารสกัดจากใบไม้และดอกไม้
แทนเลข 3-O-acetyl-เลข 3-epiafroside34 (5 ตารางที่ 1) ธรรมชาตินี้
ผลิตภัณฑ์ปรากฏพบได้เพียงครั้งเดียวก่อนที่จะ this
work.34
Separation สารสกัดจากก้านและรากต้องแตกต่าง
chromatographic เงื่อนไขเปรียบเทียบกับใบไม้และดอกไม้
สารสกัด (รูปที่ 1) Chromatograms ที่ประกอบด้วยเจ็ดและห้า
ยอดหลัก ตามลำดับ ลำดับเลข 9-15 (รูป 1), ซึ่งถูก
การวิเคราะห์ HPLC-พ่อ-SPE-NMR สารชอบ
สำหรับยอด 9, 11 และ 13-15 มีอยู่ในสารสกัดทั้ง
(1H NMR, UV) 3-O-rutinoside
(4) isorhamnetin พีค 10 อยู่ แล้วระบุเป็น peak 4 ในใบไม้และดอกไม้สารสกัด
9 พีคยังอยู่ glycoside flavonol ที่ไม่ตรวจสอบใน
รายละเอียด แรมสเป็คตรา NMR รับ ด้วยยอด 12, 14 และ 15
ให้ข้อมูลไม่เพียงพอสำหรับโครงสร้าง elucidation.
แรมสเป็คตรา NMR 1H ได้ ด้วยยอด 11 (รูปที่ 3A) และ
13 ทั้งจัดแสดงลักษณะคุณสมบัติของ cardenolide 5R ด้วย
moiety น้ำตาลกับ C3 อย่างไรก็ตาม methyl แองกูลาร์หนึ่ง
กลุ่ม (C19) การขาดหายไป และแทนที่ ด้วยการ hydroxymethyl
กลุ่ม แสดง 1H NMR และ HSQC ข้อมูล (รูปที่ 3) ที่
สารประกอบ eluted เป็น peak 11 แสดงสอง anomeric hydrogens ที่
4.62 ä (d, J) 8.10 Hz) และ 4.37 (d, J) 7.8 Hz หมายเลข H1), ในขณะที่
สั่นพ้อง anomeric เดียวเท่าที่ได้สังเกต ด้วยสูงสุด 13 (ä
4.59, d, J) 7.96 Hz) สารทั้งสองจัดแสดงกลุ่ม methyl
คำซ้อนในภาษา (ä 1.23 และความ 1.17 สำหรับยอด 11 และ 13 ตามลำดับ เจ) 6.3
Hz) ลักษณะของ moiety 6-deoxy-â-D-allopyranose ทั่วไป
ใน 5R cardenolides คลื่น HSQC ได้ ด้วยสูงสุด 13
มี 13C เคมีกะจริงเหมือนกับที่รายงาน
สำหรับ coroglaucigenin â-D-allopyranoside เช่น frugoside (6) .38 ทำนอง,
HSQC สเปกตรัมได้ ด้วยสูงสุด 11 (รูปที่ 3B) เปิดเผย
ของตกค้างเป็นâ-D-glucopyranosyl กับ C4 เลข ของ
moiety 6 deoxyallose แสดง โดยการเปลี่ยนแปลงทางเคมีของ C4 เลข
(ä 83.7) เปลี่ยนแปลง โดย ppm 9.5 เมื่อเทียบกับเหตุ 6.36
diglycoside eluted ตามที่ระบุได้สูงสุด 11 7 coroglaucigenin
3-O-(4-O-â-D-glucopyranosyl)-6-deoxy-â-D-glucopyranoside (ตาราง
1) . 39
แม้ทำรหัสของสาร 1-7
ตามการตีความรายละเอียดของ NMR ข้อมูลในใบสั่งเดียว
แสดงให้เห็นถึงพลังของเทคนิค HPLC-พ่อ-SPE-NMR,
รับมวลชนโมเลกุลใน HPLC MS ทดลองแยก
ยืนยันครบกำหนด ดัง ESI แรมสเป็คตรารับใน
จัดแสดงโหมดบวกไอออนประจุ MH และบางส่วนของตรง
การสูญเสียของตกค้างของน้ำตาล มีสรุปข้อมูล MS
ในตารางที่ 1.
ตรวจยอด chromatographic ในงานนี้ได้
ตามดูดซึม UV ในขณะที่มีสารอินทรีย์มากที่สุด
บางจบดูดซึมประมาณ 200 nm และสามารถพบการใช้
ระยะเคลื่อน น้ำ/acetonitrile, constituents มากต่ำดูด
อาจก่อให้เกิดการปลดปล่อยก๊าซสูงสุดที่สำคัญได้ เพื่อให้แน่ใจว่า
หนี constituents ไม่สำคัญของสารสกัดจาก laniflora คุณ
วิเคราะห์ปัจจุบัน 1H NMR แรมสเป็คตราของสารสกัดหยาบได้
รับหลอด NMR ใน CD3OD ตรวจสอบแรมสเป็คตราเหล่านี้
ยืนยันสถานะของคาร์โบไฮเดรตฟรี ซึ่ง
eluted สันนิษฐานจากคอลัมน์ HPLC ที่มีด้านหน้าเป็นตัวทำละลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โดยข้อมูล HMBC ดังนั้นยอดที่ 8 ในสารสกัดจากใบและดอก
เป็น 3 ¢-O-acetyl-3 ¢-epiafroside34 (5, ตารางที่ 1) ธรรมชาติ
ผลิตภัณฑ์ที่ดูเหมือนจะได้รับการพบเพียงครั้งเดียวก่อนหน้านี้
work.34
การแยกสารสกัดจากต้นกำเนิดและรากที่แตกต่างกันจำเป็นต้องมี
เงื่อนไขโครมาเมื่อเทียบกับใบและดอก
สารสกัดจาก (รูปที่ 1) chromatograms มีเจ็ดและห้า
ยอดเขาหลักตามลำดับเลขที่ 9-15 (รูปที่ 1) ซึ่งได้รับการ
ภายใต้การวิเคราะห์ HPLC-DAD-SPE-NMR สารประกอบที่มีความรับผิดชอบ
ในการยอด 9, 11, และ 13-15 มีอยู่ในสารสกัดทั้งสอง
(1H NMR, UV) สูงสุด 10 มี isorhamnetin 3-O-rutinoside
(4) ระบุไว้ว่าเป็นจุดสูงสุดที่ 4 ในใบและสารสกัดจากดอก
พีค 9 ยังมี glycoside flavonol ไม่ได้ตรวจสอบใน
รายละเอียด สเปกตรัม NMR รับกับยอดเขาที่ 12, 14, และ 15
ที่ให้ข้อมูลไม่เพียงพอสำหรับการชี้แจงโครงสร้าง
สเปกตรัม 1H NMR ได้มียอดที่ 11 (รูปที่ 3A) และ
13 ทั้งสองแสดงให้เห็นลักษณะของ 5R-cardenolide ด้วย
น้ำตาลครึ่งหนึ่งที่ติดอยู่กับ C3 แต่หนึ่งในเมธิลเชิงมุม
กลุ่ม (C19) เป็นที่หายไปและแทนที่ด้วย hydroxymethyl
กลุ่มที่แสดงโดย 1H NMR และข้อมูล HSQC (รูปที่ 3)
สารชะเป็นจุดสูงสุด 11 แสดงให้เห็นว่าทั้งสอง anomeric ไฮโดรเจนที่
ä 4.62 (งเจ) 8.10 Hz) และ 4.37 (งเจ) 7.8 เฮิรตซ์ H1 ¢¢) ในขณะที่
มีเพียงเสียงเดียว anomeric ถูกพบกับจุดสูงสุด 13 (ä
4.59 , D, J) 7.96 Hz) สารทั้งสองแสดงกลุ่มเมธิล
คู่ (ä 1.23 และ 1.17 ของยอดเขาที่ 11 และ 13 ตามลำดับ; J) 6.3
Hz) ลักษณะของครึ่ง 6 deoxy-A-D-allopyranose ทั่วไป
ใน 5R-cardenolides สเปกตรัม HSQC รับกับจุดสูงสุด 13
ให้ 13C เคมีกะจริงเหมือนกับที่รายงาน
การ coroglaucigenin â-D-allopyranoside คือ frugoside (6) .38 ในทำนองเดียวกัน
สเปกตรัม HSQC รับกับจุดสูงสุด 11 (รูปที่ 3B) เปิดเผย
การปรากฏตัวของ -D-glucopyranosyl สารตกค้างที่ติดอยู่กับ C4 ¢ของ
ครึ่ง 6 deoxyallose ที่แสดงโดยการเปลี่ยนแปลงทางเคมีของ C4 ¢
(ä 83.7) มีการเปลี่ยนแปลงโดย 9.5 ppm เทียบกับ 6.36 ดังนั้น
diglycoside ชะเป็นจุดสูงสุด 11 ถูกระบุว่าเป็น coroglaucigenin
3-O-(4-O-A-D-glucopyranosyl)-6-deoxy-A-D-glucopyranoside 7 (ตารางที่
1) 0.39
ถึงแม้ว่าตัวของสารประกอบ 1-7 ได้ดำเนินการ
บนพื้นฐานของการตีความรายละเอียดของ NMR ข้อมูลเพียงอย่างเดียวเพื่อ
ที่จะแสดงให้เห็นถึงพลังของเทคนิค HPLC-DAD-SPE-NMR,
มวลโมเลกุลที่ได้รับในการทดลองแยก HPLC-MS
อย่างเต็มที่ได้รับการยืนยันที่ได้รับมอบหมาย ดังนั้นสเปกตรัม ESI ได้รับใน
โหมดบวกไอออนแสดง MH + ไอโอนิกและชิ้นส่วนที่เกี่ยวข้อง
กับการสูญเสียของสารตกค้างน้ำตาล ข้อมูล MS สรุป
ในตารางที่ 1
การตรวจสอบของยอดเขาโครมาในงานนี้ก็
ขึ้นอยู่กับการดูดซึมรังสียูวี ในขณะที่สารอินทรีย์ส่วนใหญ่จะมี
การดูดซึมปลายบางประมาณ 200 นาโนเมตรและสามารถตรวจพบได้โดยใช้
น้ำ / มือถือขั้น acetonitrile, องค์ประกอบต่ำดูดซับมาก
อาจก่อให้เกิดความเข้มสูงสุดที่ไม่มีนัยสำคัญ เพื่อให้แน่ใจว่า
ไม่มีองค์ประกอบที่สำคัญของเค laniflora สารสกัดได้หนี
การวิเคราะห์ปัจจุบัน 1H NMR สเปกตรัมของสารสกัดที่
ได้มาในหลอด NMR ใน CD3OD การตรวจสอบของสเปกตรัมเหล่านี้
ได้รับการยืนยันการปรากฏตัวของคาร์โบไฮเดรตฟรีซึ่งถูก
ชะสันนิษฐานจากคอลัมน์ HPLC กับด้านหน้าตัวทำละลาย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โดยข้อมูลฤทธิ์ . ดังนั้น สูงสุด 8 ในใบและดอกสกัด 3
หมายถึงค่าความจริง o-acetyl-3 ค่าความจริง epiafroside34 ( 5 , ตารางที่ 1 ) ผลิตภัณฑ์ธรรมชาติ
นี้ปรากฏได้พบเพียงครั้งเดียวก่อนที่จะทำงานนี้
.
34 แยกก้านและรากสกัดต้องการแตกต่างกัน
เมื่อเงื่อนไขเมื่อเทียบกับใบและสารสกัดจากดอกไม้
( รูปที่ 1 ) ส่วนกลิ่นที่มีอยู่เจ็ดและห้า
ยอดเขาหลักตามลำดับหมายเลข 9-15 ( รูปที่ 1 ) ซึ่งเป็น hplc-dad-spe-nmr
ภายใต้การวิเคราะห์ สารประกอบที่รับผิดชอบ
สำหรับยอด 9 , 11 และ 9 อยู่ในสารสกัดทั้งสอง
( 1H NMR , UV ) สูงสุด 10 ประกอบด้วยไอโซแรมเนติน 3-o-rutinoside
( 4 ) แล้วระบุว่าเป็นยอดที่ 4 ในใบและดอกสกัด
สูงสุด 9 ยังมีฟลาโวนไกลโคไซด์ใน
ไม่ได้ตรวจสอบรายละเอียดและ NMR สเปกตรัมที่ได้มียอด 12 , 14 และ 15 ให้ข้อมูลไม่เพียงพอในการประเมิน

1H NMR สเปกตรัมของโครงสร้าง ได้มียอด 11 ( รูปที่ 3 ) และ
13 ทั้งมีคุณลักษณะของคาร์ดิโนไลด์ 5R ด้วย
ตาลโดแนบ C3 อย่างไรก็ตาม หนึ่งในกลุ่มเมทิล
เชิงมุม ( c19 ) หายไปและถูกแทนที่ด้วยกลุ่มซี
,ที่แสดงโดยคุณ 1 และข้อมูล hsqc ( รูปที่ 3 )
สารตัวอย่างเป็นจุดสูงสุด 11 พบสอง anomeric ไฮโดรเจนที่
และ 4.62 ( D , J ) 8.10 Hz ) และ 4.37 ( D , J ) 7.8 Hz , H1 ¢¢ ) ส่วน
เดียว anomeric เรโซแนนซ์ ) กับยอด 13 ( การศึกษา
4.59 , D , J ) 7.96 Hz ) สารทั้งสองมีเมทิลกรุ๊ป
ดับเลต ( และ 1.23 และ 1.17 สำหรับยอด 11 และ 13 ตามลำดับ ; J (
)Hz ) ลักษณะของ 6-deoxy - â - d-allopyranose กึ่งหนึ่งทั่วไป
ใน 5R คาร์ดิโนไลด์ . การ hsqc สเปกตรัมได้สูงสุด 13
ให้ 13C เคมีกะจริงเหมือนที่รายงาน
สำหรับ coroglaucigenin â - d-allopyranoside ได้แก่ frugoside ( 6 ) . 38 เช่นเดียวกัน
hsqc สเปกตรัมได้สูงสุด 11 ( รูปที่ 3B ) เปิดเผย
สถานะของâ - กาก d-glucopyranosyl ติด C4
¢ของการ 6-deoxyallose กึ่งหนึ่งตามที่แสดงโดยทางเคมีกะของ C4 ¢
( และใช้ ) , การเปลี่ยนแปลงมาตรฐานบัญชี ppm เปรียบเทียบกับ 6.36 ดังนั้น
diglycoside ตัวอย่างเป็นจุดสูงสุดที่ 11 ที่ถูกระบุว่าเป็น coroglaucigenin
3-o - ( 4-o - â - d-glucopyranosyl ) - 6-deoxy - â - D-glucopyranoside 7 ( ตารางที่ 39

1 ) แม้ว่าตัวของสารประกอบ 1-7 ได้
บนพื้นฐานของการตีความของคุณคนเดียวเพื่อ
รายละเอียดข้อมูลเพื่อแสดงให้เห็นถึงพลังของเทคนิค hplc-dad-spe-nmr
, โมเลกุลมวลชนได้ทดลองแยก hplc-ms
อย่างเต็มที่ยืนยันที่ได้รับมอบหมาย ดังนั้น คิดว่าจะมีค่าในโหมดอิออนบวกและอิออนค่ะ

และชิ้นส่วนที่ต้องสูญเสียน้ำตาลที่ตกค้าง MS ข้อมูลสรุปได้ในตารางที่ 1
.
ตรวจหา และยอดในงานนี้
จากการดูดกลืนแสงยูวีในขณะที่สารประกอบอินทรีย์ส่วนใหญ่มี
บางสิ้นสุดการดูดซึมประมาณ 200 นาโนเมตร และสามารถตรวจพบการใช้
น้ำ / ไนมือถือขั้น ต่ำมากดูดซับองค์ประกอบ
อาจก่อให้เกิดความเข้มสูงสุดเล็กน้อย เพื่อให้แน่ใจว่าไม่พบองค์ประกอบของ K .

laniflora สกัดได้วิเคราะห์สเปกตรัมของ 1H NMR ปัจจุบันสารสกัดถูก
ได้มาในคุณหลอดใน cd3od .การตรวจสอบของสเปกตรัมเหล่านี้
ยืนยันการแสดงตนของคาร์โบไฮเดรตฟรี ซึ่งมีตัวอย่างจากคอลัมน์ HPLC
สันนิษฐานกับหน้าตัวทําละลาย