Cell culture and chemicals
The mouse fibroblast L929 cell line (Chinese Academy of Preventive Medical Sciences, Beijing, China) was cultured in Dulbecco′s Modified Eagle Medium (DMEM, Gibco®, Grand Island, NY, USA) and murine macrophage-like RAW264.7 cell line (purchased from Cell lines Services) was cultured in RPMI medium (RPMI, Gibco®, Grand Island, NY, USA) in 75 cm2 culture flasks at 37 °C in a humidified atmosphere containing 5% CO2. All mediums were supplemented with 1% penicillin–streptomycin (Invitrogen, California, USA) and 10% fetal bovine serum (FBS; Sigma Aldrich, Missouri, USA). Cells were harvested with 0.25% trypsin–EDTA (Gibco (Invitrogen, California, USA) and diluted to a suspension in a fresh medium for further incubation.
การเพาะเลี้ยงเซลล์และสารเคมีfibroblast เมาส์ L929 เซลล์ (จีน Academy of Preventive วิทยาศาสตร์การแพทย์, ปักกิ่ง, จีน) เป็นที่เลี้ยงใน Dulbecco ของดัดแปลง Eagle กลาง (DMEM, Gibco®, Grand Island, NY, USA) และหมา macrophage เหมือน RAW264 0.7 เซลล์ (ซื้อมาจากเซลล์บริการ) เป็นที่เพาะเลี้ยงในอาหาร RPMI (RPMI, Gibco®, Grand Island, NY, USA) ใน 75 cm2 ขวดวัฒนธรรมที่ 37 ° C ในบรรยากาศที่มีความชื้น CO2 5% สื่อทั้งหมดถูกเสริมด้วยยาปฏิชีวนะ-streptomycin 1% (Invitrogen, แคลิฟอร์เนียสหรัฐอเมริกา) และ 10% ในเลือดวัวของทารกในครรภ์ (FBS; Sigma Aldrich มิสซูรีสหรัฐอเมริกา) เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวกับ trypsin-EDTA 0.25% (Gibco (Invitrogen, แคลิฟอร์เนียสหรัฐอเมริกา) และปรับลดการระงับในกลางใหม่สำหรับบ่มเพิ่มเติม
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
การเพาะเลี้ยงเซลล์และสารเคมี
เมาส์ l929 fibroblast เซลล์ไลน์ ( จีนสถาบันวิทยาศาสตร์การแพทย์เชิงป้องกัน , ปักกิ่ง , จีน ) เลี้ยงในดัลเบโค่’ดัดแปลงนกอินทรีขนาดกลาง ( dmem gibco , ® Grand Island , NY , USA ) และเซลล์แมคโครฟาจ ~ ชอบ raw264.7 ( ซื้อจากเซลล์เพาะเลี้ยง RPMI บริการ ) คือ ปานกลาง ( RPMI gibco ® , NY , เกาะแกรนด์ประเทศสหรัฐอเมริกา ) ใน 75 cm2 วัฒนธรรมอาหารที่ 37 °องศาเซลเซียสในบรรยากาศที่มีคาร์บอนไดออกไซด์ humidified 5 % ทุกสื่อที่ถูกเสริมด้วย 1% เพนนิซิลิน ( สเตร็ปโตมัยซิน ( Invitrogen , California , USA ) และ 10% fetal bovine serum ( FBS ; ซิกม่า Aldrich , Missouri , USA ) เซลล์มีเก็บเกี่ยวกับ 0.25% ซิน– EDTA ( gibco ( Invitrogen , California , USA ) และเจือจางไประงับในสื่อสดสำหรับการบ่มเพิ่มเติม
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)